Tris-平衡酚是什么东西啊
核酸裂解液。苯酚用水饱和的目的是使其抽提DNA过程中,不致吸收样品中含有DNA的水分,减少DNA的损失。用Tris调节至pH为8是因为DNA在此条件下比较稳定。在中性或碱性条件下(pH5~7),RNA比DNA更容易游离到水相,所以可获得RNA含量较少的DNA样品。保存在冰箱中的酚,容易被空气氧化而变成粉红色的,这样的酚容易降解DNA,一般不可以便用。为了防止酚的氧化,可加入疏基乙醇和8-羟基喹琳至终浓度为0.1%。8-羟基喹琳是带有淡黄色的固体粉末,不仅能抗氧化,并在一定程度上能抑制DNase的活性,它是金属离子的弱螯合剂。用Tris pH8.0水溶液饱和后的酚,最好分装在棕色小试剂瓶里,上面盖一层Tris水溶液或TE缓冲液,隔绝空气,以装满盖紧盖子为宜,如有可能,可充氮气,防止与空气接触而被氧化。平时保存在4℃或-20℃冰箱中,使用时,打开盖子吸取后迅速加盖,这样可使酚不变质,可用数月。
自己配很麻烦,毒性也大。试剂公司都有卖,200ml只要50块,提200个样没问题。
没太看明白。饱和酚、氯仿、异丙醇混合溶液本身就会分层,配完后要放2小时左右澄清了才能用~~~(混浊时我也用过,也可以)
我记得我配的时候,就是酚取下层,把三种溶液混合,摇一摇,放4度几个小时后用
但是我记得我用的是Tris饱和酚,
Tris平衡苯酚也称Tris平衡酚或Tris饱和酚(Tris
balanced
phenol或Tris
saturated
phenol),是添加了抗氧化剂8-羟基喹啉,
Tris,pH8.0充分平衡的苯酚。呈黄色
不知道你的那个水饱和的苯是否可以~~~~
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%(原液14.4 mol/ml),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行).
3、加入等溶剂的1 mol/ml的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层.
4、加固体Tris约1 g/100 ml酚,摇匀,去水相.
5、加0.1 mol/mlTris(PH 8.0)平衡数次,至PH为8.0.
6、加0.1 mol/mlTris(PH 8.0)于棕色瓶中4度保存.
1、冰箱取出重蒸酚,室温放置-68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)
3、加入等溶剂的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层
4、加固体Tris约1g/100ml酚,摇匀,去水相
5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡数次,至PH为8.0
6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存
7、如黄色消失或呈粉红色,则不能使用