能用乙醇做流动相吗?好像是可以,但为什么很少有人使用呢?
是在HPLC中吗?可以,但是很少情况会用,个人认为原因有二:1.分子中的羟基可以形成氢键,因此乙醇黏度很大,会使柱压过高;2.粘度大导致不及相近相对分子质量的有机化合物极性大,或者说溶剂强度不及甲醇或乙腈。溶剂强度在吸附色谱中也是一个很重要的指标。
研究表明,当流动相的A>0.7的时候,基线噪声会显著增加,一般选择的吸收值<0.5。当A>1.0时,基本就不能用使了。对于示差折光检测器,主要考虑样品和流动相的折光率,这里不 再赘述。
选用的溶剂粘度要低、沸点适中使用低粘度溶剂,可减小容质的传质阻力,降低柱压,利于提高柱效。从分离制备和色质连用考虑,沸点要适中,低沸点的溶剂有它的优点但仅仅用 于分析,沸点太低,反而由于溶剂的挥发,造成保留时间的变化。
尽量不用高毒性的溶剂不只是环境,单从我们自身的安全考虑,当然用低毒溶剂最好。
溶剂对样品有足够的溶解力样品如果不能溶解在选用的溶剂里,还怎么分析?
但如果样品在流动相里溶剂仍然不大,可以用样品的最佳溶剂先溶解,再用流动相稀释,就 可以了。
知道了上面选择溶剂的一般原则,就不难理解为什么不同乙醇、丙醇做流动相的原因了,因 为它们的粘度大。 还有丙酮,虽然粘度和毒性较低、溶解度大、极性适中,但用于它的截至吸收波长为330nm, 所以不常用,如果样品的吸收大于330nm,其实用丙酮是一个不错的选择。
理论上乙醇是可以用作流动相.一般情况下不选择乙醇作流动相,因为乙醇的黏度相对较大,用作流动相时柱压太大.以水作1计,乙醇1.2 丙酮0.32 甲醇0.60 乙腈0.37 .另外,使用乙醇的成本要高于甲醇,所以一般不用乙醇用流动相.
设置梯度的话,需要两个以上的高压泵,设置其中的一个泵为主泵,其它的泵都设为副泵.再在主泵或工作站中设置梯度参数,如下,以双泵为例
time A :水(%) B:甲醇(%)
0.00 20 80
10.0 50 50
20.0 60 40
25.0 80 20
这样就设置了0~10min,10~20min,20~25min三个不同的梯度.
故毒性比较大),
但甲醇的极性(polarity)较大,
容易带走你要分离的小分子,
若改用乙醇为流动相,
会产生下列情况:
待测物流动缓慢,
RP-HPLC分析时间较长,
实验时间增加.
但若甲醇分析的结果不理想(化合物分离不完全时),
则可能是甲醇极性过高,
仪器可分析时间过短
此时用乙醇可得到较为清晰的结果
希望能对你有帮助
1、反相固定相:C18、C8
2、正相固定相:硅胶、氨基键合、氰基键合
3、流动相:甲醇、乙腈、水
一、固定相的形状
1、全多孔型
最初由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体 100μm的大颗粒,表面涂渍固定液。传质速度慢,柱效低。 现采用10μm以下的小颗粒。
2、表面多孔型(薄壳型微珠)
30~40μm的玻璃微球,表面附着一层厚度为1 ~ 2μm的多孔硅胶。表面积小,传质速度快,但柱容量低。
二、流动相类别
1、按流动相组成分:单组分和多组分;
2、按极性分:极性、弱极性、非极性;
3、按使用方式分:固定组成淋洗和梯度淋洗
1.先说流动相:
a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等
b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等
2.固定相
a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱
b.正相:氨基柱、氰基柱、二醇基等等。
1、如果流动相中有乙醇成分,一定要使用色谱纯。
2、如果流动相中没有乙醇成分,可以使用分析纯。
3、配制样品用的乙醇由于进入色谱系统的量不是很大,理论上对色谱系统的影响可以忽略,所以可以使用分析纯,但如果流动相中有乙醇成分则一定要使用色谱纯,否则对色谱系统的影响不能忽略。
色谱纯一般是指色谱专用溶剂或者试剂,在低波长处的透光率比较好。色谱纯是指进行色谱分析时使用的标准试剂,在色谱条件下只出现指定化合物的峰,不出现杂质峰。质量指标注重干扰液相色谱峰的杂质。主成分含量高。
分析是化学试剂的纯度规格,属于二级品,标签为金光红,用于重要分析和一般性研究工作。分析纯纯度略低于优级纯,杂质含量略高于优级纯,适用于重要分析和一般性研究工作,如一般实验室、研究所等地方常用试剂。常以AR表示。
它们的化学式不同:甲醇的化学式是(CH3OH),乙醇的化学式是(CH3CH2OH) ,异丙醇的化学式是(C3H8O)
甲醇沸点65℃,是无色可燃的液体,有类似酒精的气味,跟水能以任意比率混溶。甲醇有毒,饮用10mL,就能使眼睛失明,再多可使人中毒致死甲醇是优良的有机溶剂,还是制造甲醛等的原料。
乙醇是一种透明、无色、具有特殊香味的液体(易挥发),密度比水小,能跟水以任意比互溶(一般不能做萃取剂)。是一种重要的溶剂,能溶解多种有机物和无机物。
异丙醇是无色透明液体,俗称IPA,有似乙醇和丙酮混合物的气味。
甲醇是工业酒精的主要成分,乙醇是酒精的主要成分。两者都是极性较强的有机溶剂。
用途不同:甲醇并非是工业酒精的主要成分而是其中的杂质,俗名叫做“木精”,是高效液相色谱比较常用的流动相,还是有名的脱脂剂之一。最普遍的应用在有机合成方面,例如制作格氏试剂什么的。
乙醇是“酒”的主要成分,而不是酒精的主要成分,因为它的俗名就叫做“酒精”。
异丙醇是重要的化工产品和原料。主要用于制药、化妆品、塑料、香料、涂料及电子工业上用作脱水剂及清洗剂。
(2)甲醇:0.1%乙酸水=30:70