有人有western blot的Tris-乙酸胶的配方吗

一、SDS-PAGE电泳所用溶液：

　    1）30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL)

丙烯酰胺 (Arc)                            29 g

N,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis)                  1 g

用双蒸水定容至100mL，过滤备用，4℃存放

丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。

　    2）5×Tris-甘氨酸缓冲液 (1 L)

Tris碱                                 15.1 g

甘氨酸(电泳级)                          94 g

10 %SDS                               50 mL

使用时稀释5倍使用

3）2×SDS凝胶加样缓冲液(10mL)

0.5 mol/L Tris-Cl  (pH 6.8)         2 mL

10％(W/V)SDS                  4 mL

甘油                           2 mL

β-巯基乙醇                    1.0 mL

(DTT（二硫苏糖醇）            0.31g)

溴酚兰                        0.02g

双蒸水                       0.5 mL

室温存放备用

4）考马斯亮蓝染色液

考马斯亮蓝R-250 （G-250）             1.0 g

甲醇                                 450 mL

冰醋酸                               100 mL

ddH2O                               450 mL

0.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95％乙醇+20mL冰醋酸，定容至200mL，过滤备用

5）考马斯亮蓝脱色液（甲醇脱色液效果好，但有毒性）

甲醇                                 100 mL

冰醋酸                               100 mL

ddH2O                                800 mL

医用酒精：冰醋酸：水=4.5：0.5：5(V：V：V)

二、SDS-PAGE所需溶液:

A液——30％丙稀酰胺（W/V）：丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。B液——1.5mol/L Tris·HCl，pH8.8：18.17g（9.09g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约3mL(1.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至8.8，定容至100mL（50mL）。C液——1.5mol/L Tris·HCl，pH6.8：12.1g（6.05g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约7mL(3.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至6.8，定容至100mL（50mL）。D液——10％SDS：10g (2g)SDS溶于去离子水中，定容至100mL(20mL)，加热至68℃助溶。E液——10％过硫酸铵：5g(0.5g)过硫酸铵，溶于50mL(5mL)去离子水中；现配现用或分装至0.5mL离心管中冷冻备用。

F液——TEMED(N-N-N`-N`－四甲基乙二胺)原液，室温保存。

三、配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液