如何用紫外分光光度计，测量水中二甲苯的浓度（步骤）？
分光光度计要测量的样品必须是均一的溶液，不能有沉淀，如果有沉淀的话就要摇匀。之于为什么这样做和可以做哪些测量、如何测量，下面详述:
分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
而分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为：(1)200～400nm的紫外光区,(2)400～760nm的可见光区,(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式： 1 A=log — =ECL T 式中 A 为吸收度； T 为透光率； E 为吸收系数，采用的表示方法是(E1％ 1cm),即吸收度换算成溶液浓度为1％(g/ml)，液层厚度为1cm的数值； C 为100ml溶液中所含被测物质的重量，g(按干燥品或无水物计算）； L 为液层厚度 ，cm。 物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。
分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
分光光度计的简单原理
分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
核酸的定量
核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。
事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1-1.5A。在此范围内，颗粒的干扰相对较小，结果稳定。从而意味着样品的浓度不能过低，或者过高（超过光度计的测试范围）。最后是操作因素，如混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；混合液不能存在气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大；换算系数和样品浓度单位选择一致；不能采用窗口磨损的比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项。
除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品，A320一般是0。
蛋白质的直接定量（UV法）
这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。选择Warburg 公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质，一般要消除320nm 的“背景”信息，设定此功能“开”。与测试核酸类似，要求A280的吸光值至少大于0.1A，最佳的线性范围在1.0-1.5 之间。实验中选择Warburg 公式显示样品浓度时，发现读数“漂移”。这是一个正常的现象。事实上，只要观察A280的吸光值的变化范围不超过1%，表明结果非常稳定。漂移的原因是因为Warburg 公式吸光值换算成浓度，乘以一定的系数，只要吸光值有少许改变，浓度就会被放大，从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说，速度快，操作简单；但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；另外敏感度低，要求蛋白的浓度较高。
比色法蛋白质定量
蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分：氨基酸（如酪氨酸，丝氨酸）与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。
比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。
Lowry 法：以最早期的Biuret 反应为基础，并有所改进。蛋白质与Cu2 反应，产生蓝色的反应物。但是与Biuret 相比，Lowry 法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂；反应需要的时间较长；容易受到非蛋白物质的影响；含EDTA，Triton x-100，ammonia sulfate 等物质的蛋白不适合此种方法。
BCA（Bicinchoninine acid assay）法：这是一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2 反应产生Cu ，后者与BCA形成螯合物，形成紫色化合物，吸收峰在562nm波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系极强，反应后形成的化合物非常稳定。相对于Lowry法，操作简单，敏感度高。但是与Lowry法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。
Bradford 法：这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应，产生的有色化合物吸收峰595nm。其最大的特点是，敏感度好，是Lowry 和BCA 两种测试方法的2 倍；操作更简单，速度更快；只需要一种反应试剂；化合物可以稳定1小时，方便结果；而且与一系列干扰Lowry，BCA 反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的。最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。
某些初次接触比色法测定的研究者可能为各种比色法测出的结果并不一致，感到迷惑，究竟该相信哪种方法？由于各种方法反应的基团以及显色基团不一，所以同时使用几种方法对同一样品得出的样品浓度无可比性。例如：Keller等测试人奶中的蛋白，结果Lowry，BCA 测出的浓度明显高于Bradford，差异显著。即使是测定同一样品，同一种比色法选择的标准样品不一致，测试后的浓度也不一致。如用Lowry测试细胞匀浆中的蛋白质，以BSA作标准品，浓度1.34mg/ml，以a球蛋白作标准品，浓度2.64mg/ml。因此，在选择比色法之前，最好是参照要测试的样本的化学构成，寻找化学构成类似的标准蛋白作标准品。另外，比色法定量蛋白质，经常出现的问题是样品的吸光值太低，导致测出的样品浓度与实际的浓度差距较大。关键问题是，反应后1011分光光度计的重要配件—— 比色杯的颜色是有一定的半衰期，所以每种比色法都列出了反应测试时间，所有的样品（包括标准样品），都必须在此时间内测试。时间过长，得到的吸光值变小，换算的浓度值降低。除此，反应温度、溶液PH值等都是影响实验的重要原因。此外，非常重要的是，最好是用塑料的比色法。避免使用石英或者玻璃材质的比色杯，因为反应后的颜色会让石英或者玻璃着色，导致样品吸光值不准确。
细菌细胞密度（OD 600）
实验室确定细菌生长密度和生长期，多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验，需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液，之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作，必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数，做出校正曲线。实验中偶尔会出现菌液的OD值出现负值，原因是采用了显色的培养基，即细菌培养一段时间后，与培养基反应，发生变色反应。另外，需要注意的是，测试的样品不能离心，保持细菌悬浮状态。
分光光度计的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积，有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白，均采用石英杯或者玻璃杯，但是不适合比色法测定。因为反应中的染料（如考马斯亮兰）能让石英和玻璃着色，所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。
由于另外测试的样品量不同，所以一般分光光度计厂家提供不同容积的比色杯以满足用户不同的需求。目前市场已经存在一种既可用于核酸、紫外蛋白质定量，亦可用于蛋白比色法测定的塑料杯，样品用量仅需50μl，比色杯单个无菌包装，可以回收样品。如Eppendorf UVette塑料比色杯，是目前比色杯市场上一个革新。随着生命科学以及相关学科发展，对此类科学的实验研究提出更高的要求，分光光度计将是分子生物学实验室不可缺少的仪器，也成为微生物、食品、制药等相关实验室的必备设备之一。
随着科技的发展，现在比色杯已经不是使用分光光度计时的必备物品。目前国外Nanodrop公司（现已被Thermo Fisher公司收购）生产的ND1000分光光度计与旧式分光光度计相比，已经可以做到无需稀释样品，无需使用比色杯，每次测量仅需1-2μl样品即可完成测量。
1 物理性 温度 ℃ 22～28 夏季空调 BY2003HT型温湿度计
国标法 2800.00
16～24 冬季采暖
2 相对温度 ％ 40～80 夏季空调
30～60 冬季采暖
3 空气流速 m/s 0.3 夏季空调 数字微风速仪BYWF-2001型 2600.00
0.2 冬季采暖
4 新风量 m3/（h.人） 30a TELAIRE7001型新风量，二氧化碳检测仪
TELAIRE7001P型新风量，二氧化碳检测仪 7800.00
9600.00
5 化学性 二氧化硫SO2 mg/m3 0.50 1h均值 DR2400便携式分光光度计
4160-2型甲醛分析仪 39800.00
26000.00
6 二氧化氮NO2 mg/m3 0.24 1h均值
7 氨NH3 mg/m3 0.20 1h均值
8 甲醛HCHO mg/m3 0.10 1h均值
9 一氧化碳CO mg/m3 10 1h均值 3011A型CO分析仪 19800.00
10 二氧化碳CO2 % 0.10 日平均值 PCO2国标法 16800.00
11 臭氧O3 mg/m3 0.16 1h均值 Z-1200XP 18600.00
12 苯C6H6 mg/m3 0.11 1h均值 PGM7200型苯检测仪 69000.00
13 甲苯C7H8 mg/m3 0.20 1h均值 气相色谱仪
含氢火焰检测器 64000.00
14 二甲苯C8H10 mg/m3 0.20 1h均值
15 苯并(a)芘B(a)P ng/m3 1.0 日平均值 液相色谱仪
16 可吸入颗粒PM10 mg/m3 0.15 日平均值 DUSTMATE 56800.00
17 总挥发性有机物TVOC mg/m3 0.60 8h均值 PGM-5210 65500.00
18 生物性 菌落总数 Cfu/m3 2500 依据仪器定b Quick Take(国标法) 35900.00
19 放射性 氡222Rn Bq/m3 400 年平均值 测氡仪1027型 9000.00
1．新风量检测仪
序号 仪器名称 型号 产地 技术指标 价格
20 新风量，
二氧化碳检测仪 TELAIRE
7001PD 美国 新风量：0～45 m3/人小时
二氧化碳：0－10000ppm
温度：0～50℃
湿度：0～100%RH
有内置泵，采样速度快
有数据存储功能
可以设定采样开始时间和采样间隔，到设定时间自动测量和记录
可以通过PC机，调用和浏览CO2，温度，湿度测量数据和变化曲线 11600.00
21 新风量，
二氧化碳检测仪 TELAIRE
7001P 美国 新风量：0～45 m3/人小时
二氧化碳：0－10000ppm
温度：0～50℃
湿度：0～100%RH
有内置泵，采样速度快 9800.00
22 TELAIRE
7001D 美国 新风量：0～45 m3/人小时
二氧化碳：0－10000ppm
温度：0～50℃
湿度：0～100%RH
有数据存储功能
可以设定采样开始时间和采样间隔，到设定时间自动测量和记录
可以通过PC机，调用和浏览CO2，温度，湿度测量数据和变化曲线 9600.00
23 TELAIRE
7001 美国 新风量：0～45 m3/人小时
二氧化碳：0－10000ppm
温度：0～50℃ 7800.00
2．连续测氡仪
24 连续测氡仪 1027 美国 便携式：量程：0.1～999pCi/L，（含仪器箱AC/DC变换器/软件） 9000.00
25 连续测氡仪 1027 美国 含打印机，其余同上 9800.00
26 连续测氡仪 RAD7 美国 量程：0.1～20000pCi/L，
最小检出：0.1pCi/L，空气，水中，土中氡浓度。内置打印机，电池可连续工作3天，测量时间：2分～24小时 56000.00
27 RAD7土壤中氡探头 附件 国产 配合RAD7，测量土壤中氡浓度 800.00
28 环境测氡仪 HDC-8 国产 测量空气氡，时间为15分钟，测量土壤氡时间为5分钟，含空气氡和土壤氡检测全部附件 32000.00
29 氡连续监测仪 KDR-1 1－9999BQ/L～9999BQ/m3 15800.00
30 氡检测仪 PRM-2000 美国 检测仪将气体样品渗透，通过一改革过滤膜截取灰尘和氡子体。
量程：0～10000μSV氡的放射性剂量
10～4000000 BQ/m3 氡浓度
体积：11.5cm×6.0cm×3.5cm, 重量：250克
连续工作300小时9V标准电池。 27000.00
31 氡检测仪 PRM-2100 美国 RadonRAE Pro 含内置泵，检测仪将气体样品吸入，通过一次改革过滤膜截取灰尘和氡子体。
量程：0～10000μSV氡的放射性剂量
10～4000000 BQ/m3 氡浓度
体积：137cm×60cm×35cm, 重量：300克
连续工作50小时 35000.00
3．快速甲醛检测仪
29 甲醛分析仪 HE－102 香港 0～19.99ppm,，分辨率:0.01ppm，泵吸式 18800.00
30 甲醛分析仪 ES300 美国 0.01～30ppm，分辨率：0.01ppm 15800.00
31 甲醛分析仪 PPM400S 英国 0～10ppm,分辨率:0.01～30ppm,泵吸式 22000.00
4．快速氨气检测仪
32 氨气分析仪 Z-800 美国 0.1～50ppm 9600.00
33 氨气分析仪 Z-800XP 美国 0.1～50ppm，泵吸式 14800.00
34 氨气分析仪 BY-610 北京 0.1~199.9ppm 7800.00
56 氨气分析仪（NH3） TG2400KBP 日本 泵吸式，0.1－100.0ppm 11000.00
57 氨气检测仪（NH3） IQ-350 美国 量程：0-10,20,50,100,200,500,1000ppm
分辨率0.1ppm 14800.00
35 国标法氨气检测仪
分光光度计 723G 上海 按国标法，先采样，回到实验室再进行分析 6300.00
5．快速总有机挥发性气体TVOC检测仪
34 总挥发性有机气体检测仪 PC5000Ex 英国 1ppb～10000ppm 82500.00
35 ppb级总挥发性有机气体检测仪 PGM-5210 美国 VOC(PID),0-1000ppm,最小检出10ppb 51100.00
含CO/CO2/VOC(PID)/温湿度四项 56200.00
6．快速苯蒸汽检测仪
36 苯蒸汽TVOC多功能检测仪 PGM7200 美国 0.1～200ppm，检测苯和TVOC两个项目 69000.00
37 苯蒸汽TVOC多功能检测仪 PGM7200K 美国 含标定装置，其余同上 79000.00
7．现场采样用仪器
38 数字大气压力表 BY-2003P 国产 数字显示大气压力，量程：80～120.0Kpa，分辨率：0.1KP，精度：0.5%FS 1680.00
39 手持式数字温湿度计 BY-2003HT 国产 量程：温度：-25~85℃,湿度：0～100%RH，分辨率：温度：0.1℃，湿度：0.1%RH 2800.00
40 微风速仪 BYWF-2001 国产 高强度探头/手持式/0.01～5m/s 2600.00
41 手持式风速仪 6004 日本 量程：0.01～20.0m/s，分辨率：0.01m/s 2200.00
42 袖珍大气采样器 QCD-1000 银河 量程:0.1～1.0L/min,电脑定时,液晶显示 1050.00
43 袖珍大气采样器 QCD-1500 银河 量程:0.1～1.5L/min,电脑定时,液晶显示 1050.00
44 袖珍大气采样器 QCD-3000 银河 量程:0.1～3.0L/min,电脑定时,液晶显示 1050.00
45 防爆大气采样器 QC-4 国产 量程：0.1～1.5L/min 定时：0～99min 2480.00
46 双气路大气采样器 QCS-3000 银河 量程：0.1～1.5L/min双路,微电脑定时 2300.00
47 双气路大气采样器 TDP-1000B 国产 量程：0.1～1.5L/min 2280.00
48 低流量空气采样器 TWA-300H 银河 量程：20～500ml/min 1050.00
49 热解吸器 YH0821 银河 电脑定时 4800.00
8．测尘滤膜，采样管及配件
48 GH-1型活性炭采样管 100支/包 国产 CS2解析 200/包
49 GH-1型活性炭采样管 50支/包 国产 热解析 100/包
50 硅胶采样管 100支/包 国产 CS2解析 200/包
51 硅胶采样管 50支/包 国产 热解析 100/包
52 TENAX吸附管 支 国产 直型玻璃管 80.00
53 TENAX吸附管 支 国产 直型不锈钢管 120.00
54 TENAX吸附管 支 国产 U型玻璃管 90.00
55 TENAX吸附管 支 国产 U型不锈钢管 130.00
52 手动采样器 国产 278.00
电动采样泵 国产 980.00
53 皂膜流量计 国产 100ml，校准大气采样器 240.00
皂膜流量计 国产 500ml，校准粉尘采样器 360.00
电子皂膜流量计 国产 1900.00
54 丙纶测尘滤膜 Φ40mm 国产 一盒 18.00
55 丙纶测尘滤膜 Φ75mm 国产 一盒 26.00
56 玻璃纤维滤膜 Φ40mm 国产 一盒 36.00
57 玻璃纤维滤膜 Φ75mm 国产 一盒 52.00
58 微孔滤膜 Φ25mm 国产 一盒 18.00
59 微孔滤膜 Φ40mm 国产 一盒 18.00
60 混合纤维滤膜 Φ25mm 国产 一盒 18.00
61 混合纤维滤膜 Φ40mm 国产 一盒 18.00
62 直流低耗能微型泵 YH型 国产 直流6V、9V 流量0.1～2L/min 120.00
63 直流低耗能微型泵 YH型 国产 直流6V、9V 流量0.1～3L/min 140.00
64 直流金属刮板泵 YH型 国产 直流9V 流量0～20L/min 580.00
65 FC-3B捕捉器 35B型 国产 分级采样 560.00
66 FC-3D采样头 φ40mm 国产 总尘采样 25.00
67 滤膜盒 φ40mm 国产 10.00
68 冲击板盒 φ25mm 国产 8.00
69 冲击板 φ25mm 国产 5.00
70 三角架 YH－30 国产 高度140cm可调 200.00
71 三角架 Yh－3000 国产 高度140cm可调 200.00
72 三角架 YH－1500 国产 高度140cm可调 150.00
73 U型多空玻板吸收管 （白色） 国产 采气专用 18.00
74 U型多空玻板吸收管 （棕色） 国产 采气专用 18.00
75 包氏吸收管 大型 国产 采气专用 18.00
76 包氏吸收管 小型 国产 采气专用 16.00
77 撞击式吸收管 标口 国产 采气专用 18.00
78 喷泡式吸收管 标口 国产 采气专用 18.00
79 皂沫流量计 500ml 国产 校对流量用 250.00
80 皂沫流量计 1000ml 国产 校对流量用 350.00
81 大型采样瓶 150ml 国产 24小时采样专用 24.00
82 烟道吸收瓶 125ml 国产 测烟尘气用 37.00
83 砷化氢测定器 (仿日式) 150ml 国产 测砷专用 31.00
84 氧化管（双联球） 白、棕 国产 氮氧化物采样专用 2.00
85 溶解氧瓶 (白)250ml 国产 采集污水标本样用 14.00
86 溶解氧瓶 (棕)250ml 国产 采集污水标本样用 15.00
87 回流装置 250ml/25口 国产 水质提取化验用 34.00
88 回流装置 500ml/24、29口 国产 水质提取化验用 47.00
89 具塞比色管（61组） 25ml 国产 水质比色化验用 24.00
3．室内空气常用气体分析仪
二氧化碳检测仪，新风量检测仪
58 二氧化碳检测仪 PCO2/10/S 英国 0～9.9％，泵吸式 17800.00
59 二氧化碳检测仪 PCO2/10 0～9.9％，泵吸式，有平均值显示 22600.00
60 二氧化碳检测仪 PCO2/100 0～99.9％，泵吸式 28800.00
61 二氧化碳一氧化碳
二合一气体检测仪 PCO2PLUS/1 英国 0.0～10000ppm，泵吸式 23800.00
PCO2PLUS/10 0.00～9.99％，泵吸式 25800.00
PCO2PLUS/100 0.00～99.9％，泵吸式 32800.00
62 二氧化碳，氧气二合一气体分析仪 PCO2/Safety CO2:0.00~9.9%O2:0~25%,泵吸式 25800.00
63 二氧化碳检测仪 8732 美国 二氧化碳：0～5000ppm，红外线检测原理 7100.00
64 CO2 ，温湿度露点仪 8760 美国 二氧化碳：0～5000ppm
温度：0～60℃
湿度：5～95％
露点：0～100％
储存：140000个样品 25500.00
65 CO2 ，CO，温湿度露点仪 8762 美国 一氧化碳：0～500ppm，其余同8760 28500.00
一氧化碳分析仪
62 一氧化碳分析仪 Z-500XP 美国 0.0～100.0ppm，泵吸式，电化学 14800.00
63 一氧化碳分析仪 Z-500 英国 0.0～100.0ppm，电化学 9600.00
42 一氧化碳分析仪 GXH-3011A 国产 量程0－50ppm 分辨率0.1 19800.00
43 一氧/二氧化碳分析仪 GXH-3010/3011 国产 一机两用性能同GXH-3010 GXH-3011 33500.00
44 一氧化碳分析仪 CO-500 英国 量程0－50ppm 分辨率1ppm；泵吸式 9600.00
45 一氧化碳分析仪 T40 美国 0－999ppm，1ppm；电化学传感器一节AA碱性电池运行1000小时 8500.00
66 一氧化碳分析仪 BY-610 北京 0.0～199.9ppm，渗透式，电化学原理 7800.00
67 一氧化碳分析仪 HE-101 香港 便携泵吸式：0.0～199.9ppm，电化学 17800.00
臭氧气体分析仪
68 臭氧检测仪 Z-1200 美国 0.01～10.00ppm 9600.00
69 臭氧检测仪 Z-1200XP 美国 0.01～10.00ppm，泵吸式 14800.00
本标准适用于工业废水及地表水中苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、苯乙烯8种苯系物的测定.
本方法选用3％有机皂土／101担体＋2.5％邻苯二甲酸二壬酯／101担体,混合重量比为35:65的串联色谱拄,能同时检出样品中上述8种苯系物.采用液上气相色谱法,最低检出浓度为0.005mg／L.测定范围为0.005～0.1mg／L；二硫化碳萃取的气相色谱法,最低检出浓度为0.05mg／L,测定范围为0.05～12mg／L.
2 试剂和材料
2.1 载气和辅助气体
2.1.1 载气：氮气,纯度99.9％,通过一个装有5A分子筛、活性炭、硅胶的净化管净化.
2.1.2 燃气：氢气,与氮气的净化方法相同.
2.1.3 助燃气：空气,与氮气的净化方法相同.
2.2 配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料
2.2.1 苯系物：苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、苯乙烯均采用色谱纯标准试剂.
2.2.2 无水硫酸钠(Na2SO4),分析纯.
2.2.3 氯化钠(NaCl),分析纯.
2.2.4 氮气,用活性炭加以净化的普氮(99.9％).
2.2.5 蒸馏水.
2.2.6 二硫化碳(CS2),分析纯.在色谱上不应有苯系物各组分检出.如若检出应做提纯处理.
2.2.7 苯系物贮备溶液：各取10.0?L苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、异丙苯、苯乙烯色谱纯标准试剂(2.2.1),分别配成1000mL的水溶液作为贮备液.可在冰箱中保存一周.
2.2.8 气相色谱用标准工作溶液：根据检测器的灵敏度及线性要求,取适量苯系物贮备溶液(2.2.7)用蒸馏水(2.2.5)配制几种浓度的苯系物混合标准溶液.
2.3 制备色谱柱时使用的试剂和材料
2.3.1 色谱柱和填充物：见3.4条“色谱柱”中有关内容.
2.3.2 涂渍固定液所用溶剂：苯、丙酮.
3 仪器
3.1 仪器的型号
带氢焰离子化检测器的气相色谱仪.
3.2 进样器
5mL医用全玻璃注射器,10?L微量注射器.3.3 记录器 与仪器相匹配的记录仪.3.4 色谱柱3.4.1 色谱柱类型：填充柱.3.4.2 色谱柱数量,1支.3.4.3 色谱柱的特性：3.4.3.1 材料：不锈钢或硬质玻璃管.3.4.3.2 长度：3m.3.4.3.3 内径：4mm.3.4.4 填充物：3.4.4.1 载体： a.名称：101白色担体. b.粒度：60～80目.3.4.4.2 固定液：
a.名称及其化学性质：有机皂土(Bentone),最高使用温度100℃,邻苯二甲酸二壬酯(DNP),最高使用温度150℃.
b.液相载荷量：有机皂土为3％；DNP为2.5％.
c.涂渍固定液的方法：静态法.根据担体的重量称取一定量的有机皂土,溶解在苯(2.3.2)中,待完全溶解后倒入担体,使担体全部浸没在溶液中,轻轻摇动容器,让溶剂慢慢均匀挥发,待溶剂全部挥发后即涂渍完毕.DNP用丙酮溶解后,涂渍步骤同有机皂土.
3.4.5 色谱柱的填充方法：不锈钢管柱的一端用玻璃棉和铜网塞住,接真空泵(泵前装有干燥塔),柱的另一端通过软管接漏斗,将固定相慢慢通过漏斗装入色谱柱内.在装填固定相的同时开动真空泵抽气.固定相在色谱柱内应均匀紧密填充.先将3％有机皂土／101按总重量的35％装入色谱柱,然后将2.5％DNP／101按总重量的65％装入柱内,装填完毕后用玻璃棉和铜网塞住色谱柱的另一端.
3.4.6 色谱柱的老化：将装好的色谱柱DNP一端接在进样口上,另一端不要联接检测器,用较低的载气流速通入氯气,慢慢地(在1h内)将柱箱温度提高至90℃,在此温度老化8h,在老化过程中注入较浓的混合标准溶液.
3.4.7 柱效能和分离度：在给定的条件下,色谱柱总的分离度大于0.7.
3.5 检测器
3.5.1 类型：氢焰离子化检测器.
3.5.2 检测器极化电压＋250V,使用单焰工作.
3.6 试样预处理时使用的仪器
3.6.1 超级恒温水浴.
3.6.2 康氏电动振荡机,振荡次数不小于200次.需在机上自配水槽一个(有进、出水口,并有100mL注射器固定夹).
3.6.3 100mL医用全玻璃注射器.
3.6.4 封诸100mL注射器(3.6.3)用胶帽若干.
4 样品
4.1 样品的性质
4.1.1 样品名称：工业废水、地表水.
4.1.2 样品状态：液体.
4.1.3 样品的稳定性：水中苯系物易挥发.
4.2 水样采集和贮存方法
4.2.1 水样采集：用玻璃瓶采集样品,样品应充满瓶子,并加盖瓶塞.
4.2.2 水样保存：采集水样后应尽快分析.如不能及时分析,可在4℃冰箱中保存,不得多于14天.
4.3 试样的预处理
4.3.1 液上气相色谱法的预处理方法：称取20.0g氯化钠(2.2.3),放入100mL注射器(3.6.3)中,加入40mL水样,排出针简内空气,再吸入40mL氮气(2.2.4)然后将注射器用胶帽(3.6.4)封好,置于康氏振荡器水槽(3.6.2)中固定,在35℃恒温下振荡5min,抽取液上空中的气体5mL做色谱分析.当废水中苯系物浓度较高时,可减少进样量.
4.3.2 二硫化碳萃取的富集方法：取调至酸性(pH＜2)的水样放入250mL分液漏斗中,加5mL二硫化碳(2.2.7),振摇2min,静置分层后,分离出有机相,在规定的色谱条件下,取5?L萃取液做色谱分析.
注意：如用二硫化碳萃取时发生乳化现象,则可在分液漏斗中加入适量无水硫酸钠(2.2.2)破乳,收集萃取液时,在分液漏斗的颈下部塞一块玻璃棉,使萃取液过滤.弃去最初几滴,收集余下的二硫化碳溶液,以备测定.
5 操作步骤
5.1 调整仪器
5.1.1 汽化室温度：200℃.
5.1.2 柱箱温度：恒温,65℃.
5.1.3 裁气流速：流速34mL／min.根据色谱柱的阻力调节柱前压.
5.1.4 检测器：
5.1.4.1 检测室温度：150℃.
5.1.4.2 放大器输入阻抗1010?.
5.1.4.3 辅助气体的调节：氢气流速：36mL／min；空气流速：384mL／min.
5.1.5 记录器：
5.1.5.1 衰减：根据样品中被测组分含量调节记录仪衰减.
5.1.5.2 纸速：300mm／h.
5.2 校准
5.2.1 外标法
5.2.2 标准样品：
5.2.2.1 标准样品的制备：在线性范围内配制一系列浓度的标准溶液.
5.2.2.2 气相色谱法中使用标准样品的条件；
a.标准样品进样体积与试样体积相同；
b.仪器的重复条件：一个样品连续注射进样2次(液上气相色谱法处理的样品需重新恒温振荡),其峰高相对偏差不大于7％,即认为仪器处于稳定状态.
5.2.5 校准数据的表示：
5.2.5.1 用曲线形式：
a.标度的选择：峰高值的标度为mm.苯系物各组分浓度的标度为mg／L.
b.曲线图的绘制方法：液上气相色谱法：取苯系物混合标准溶液(2.2.8)0.005、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.1mg／L浓度系列,按液上气相色谱法的预处理步骤(4.3.1)操作,并绘制浓度——峰高的校准曲线.
二硫化碳萃取的气相色谱分析方法：取苯系物的色谱标准试剂(2.2.1)用蒸馏水(2.2.5)配成1,2,4,6,8,10,12mg／L浓度系列,按二硫化碳萃取的气相色谱法的预处理步骤(4.3.2)操作,并绘制浓度——峰高的校准曲线.
5.2.5.2 对曲线的校准：在每个工作日,用一个或更多的标准样品对曲线进行校准.
5.3 试验
5.3.1 进样：
5.3.1.1 进样方式：注射器进样.
5.3.1.2 进样量：液上气相色谱法一次进样量为5.0mL,二硫化碳萃取的气相色谱法一次进样量为5.0?L.
5.3.1.3 操作：
a.液上气相色谱法：按预处理步骤(4.3.1)抽取液上空中的气样到已预热到稍高于35℃的5mL注射器(3.2)中,迅速注射至色谱仪中,立即拔出注射器.
b.二硫化碳萃取的气相色谱法：用待分析的萃取液润湿10?L微量注射器(3.2)的针筒及针头,抽取萃取液至针筒中,排出气泡及多余的萃取液,保留5.0?L体积,迅速注射至色谱仪中,立即拔出注射器.
5.4.2.3
检验可能存在的干扰：用另一根色谱柱进行分析,可确定样品色谱峰有无干扰.
5.4.3
定量：
a.
色谱峰的测量：以峰的起点和终点联线作为峰底.从峰高极大值对时间铀作垂线,对应的时即为保留时间.此线从峰顶至峰底间的线段即为峰高.
b.
计算：由色谱峰量出各组分的峰高,然后在各自的校准曲线上查出相应的待测物浓度.
6
结果的表示
6.1
定性结果：根据标准谱图各组分的保留时间确定被测试样中出现的组分数目和组分名称.
6.2
定量结果
6.2.1
含量的表示方法：根据校准曲线查出组分的含量,以mg／L表示.
6.2.2
精密度：见表1.
表
1精密度数据表(8个实验室)
组 分 液上气相色谱法
CV(％) 二硫化碳萃取气相色谱法
cv(％)
0.1C1)
0.5C
0.9C
0.1C
0.5C
0.9C
苯
8.5
4.9
4.1
4.3
4.1
6.6
甲苯
9.3
6.2
5.2
5.1
5.1
7.9
乙苯
8.9
5.6
6.2
5.0
4.3
9.9
对二甲苯
9.4
5.8
6.4
5.9
7.9
7.4
间二甲苯
11.9
5.9
6.0
8.2
4.5
6.5
邻二甲苯
10.6
6.6
5.9
8.1
4.9
4.6
异丙苯
11.8
7.5
6.7
10.5
6.1
6.7
苯乙烯
10.1
6.7
5.2
6.8
6.6
3.5
注：
1)C为方法的浓度上限.液上气相色谱法C＝0.1mg／L,二硫化碳萃取气相色谱法C＝12mg／L.
6.2.3
准确度：见表2.
表
2 准确度数据表(8个实验室)
组 分 加标回收率
(％)
液上气相色谱法
二硫化碳萃取气相色谱法
苯
83.0
88.5
甲苯
89.5
88.6
乙苯
95.5
95.4
对二甲苯
94.2
96.4
间二甲苯
92.4
94.7
邻二甲苯
90.7
92.9
异丙苯
101.7
87.4
苯乙烯
95.8
100.4
6.2.4
最低检出浓度为全程序试剂空白信号值的5倍标准差所对应的浓度.
附录A 二硫化碳的提纯(脱芳烃)方法
(参考件)
在1000mL抽滤瓶中加入200mL欲提纯的二硫化碳,加入50mL浓硫酸.将一装有50mL浓硝酸的分液漏斗置于抽滤瓶上方,紧密连接.上述抽滤瓶置于加热电磁搅拌器上,打开电磁搅拌器,抽真空升温,使硝化温度控制在450±2℃,剧烈搅拌5min,搅拌时滴加硝酸到抽滤瓶中.静置5min,反复进行,共反应半小时.然后将溶液全部转移至500mL分液漏斗中,静置半小时左右,弃去酸层,水洗,加10％碳酸钾溶液中和至pH＝6～8,再水洗至中性,弃去水相,二硫化碳用无水硫酸钠干燥除水备用.
2 配置一系列标准二甲苯浓度梯度溶液5份（比如0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5mg/L视样品浓度度而定）在相同条件下测定吸光度,作标准曲线得线性方程.
3 测定未知样品吸光度,平行测定三次,带入线性方程,得浓度；按稀释关系换算后得样品浓度.
半导体不稳定、电化学目前只有炜盛有这个传感器，可靠性还不知道。
色谱仪比较贵，是非在线检测的。
所以通常都用PID光离子方法检测。
苯、二甲苯、甲苯这类气体用PID检测是非常不错的选择，因为他们都在10.6eV的PID光离子VOC检测仪的范围内。
但是你在选购这种VOC检测仪时一定要注意，这类仪器一定要支持CF校正系数功能，最好是内置了。推荐华瑞7340和湖南日科仪器的PV6001-VOC两款VOC检测仪，他们2个的准确性都很好，前者是老牌子，价格贵；后者有智能型的VOC检测仪，价格还不错，但是比其他的国产的又贵一点点，可能采用了智能机设计功能比较强的原因吧。
另外如果你的环境有苯气体和氨气，VOC检测仪也会把氨气算进来，因为氨气也是有机挥发物。不过你如果是这种情况，可以利用智能型手持气体检测仪消除这种干扰，具体方法呆会补充给你，那个网址不记得了。
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如果甲苯中含有微量的水可以用分水器，回流分水。
利用分水器可以将在反应的过程中生成的水除去,但必须是回流分水。当然还需要冷凝器。
如果反应生成的水较多，沸点可能降低，水慢慢的分出去了，沸点渐渐升高，达到甲苯沸点110度，再维持一段时间。
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