甲苯标准曲线怎么绘制

标准曲线应在坐标纸上绘制，横坐标轴距坐标纸底边1.5~2cm，标示出刻度和葡萄糖的毫克数；纵坐标轴距坐标纸左边1.5~2cm，标示刻度和光密度值；曲线为过原点的直线，测定点均匀分布在直线的两侧；标准曲线只能在测试条件完全相同的情况下，用于确定样品中的物质含量。对于重复的测定，应取吸光度的平均值查标准曲线；测定数据不应记在标准曲线上。

注意的问题：

1、移取液体体积要精确，为减小认为误差，同一种液体要一个人操作。

2、保证标准品的纯度。

3、容器要保证洁净。

4、根据标准品理化性质注意加样的先后顺序。

5、如果要测OD值，应保证测前各管液体充分混匀。

6、若还是有某个点误差较大，应舍弃。

标准曲线是标准物质的物理／化学属性跟仪器响应之间的函数关系。建立标准曲线可以推导待测物质的理化属性。

标准曲线的横坐标（X）表示可以准确测量的变量（如标准溶液的浓度），称为公共变量；纵坐标（Y）表示仪器的响应值（也称被测值，如吸光度、电极电位等），称为随机变量。当X＝X1X2…当Xn时，仪器测得的Y值分别为Y1，Y2．．．Yn。

将这些测量点X、Y在坐标系中描绘出来，用标尺画出X、Y之间的直线线性关系。这是常用的标准曲线法。绘制标准曲线所用的标准品的含量范围应包括试验中待测物质的含量。标准曲线不能任意延伸。

扩展资料：

重要的是标准曲线所发现的样品理化性质的不确定度。一个好的测量应该是不确定度小的测量，这对于判断样品的结果是否超标或满足限是至关重要的。

现有的方法倾向于将标准曲线应用于大范围的样品浓度。在浓度跨度大、标准点有限的情况下，均匀分布的浓度点是最佳选择，这样标准曲线所涵盖的浓度范围内的所有浓度所提供的信息都是相同的。

奇点的设置来源于已知信息。先确定浓度范围，在浓度范围内确定中间点，然后在中间点周围分布对称的标准曲线点，所以总是出现奇数点。

参考资料来源：百度百科——标准曲线

1、打开电脑，单击并打开软件 execl.

2、进入execel后，就可以输入标准曲线的数据了。

3、在软件右上角单击选择插入，选择图中的散点图，如图；

4、接下来就会出现图表框，在团表框中右键点击菜单，在单击选择 选择数据 选项。

5、再一次会出现对话框，用鼠标选择图中的两行数，选择好了就可以点击确认。

6、现在就需要在图上移到有点的地方，并用鼠标右键选择。然后再去菜单中添加趋势线。

7、一系列步骤后，就需要设置趋势线的格式等等了，这个可以根据自己的需要设置，如图，曲线就可以绘制完成了。

2、用excel绘制标准曲线的依据是用最小二乘法，求标准曲线的回归方程。

3、用excel绘制标准曲线的方法是打开excel的 Y = aX+b 程序，按照实验测定的微克数为X,吸光度A为Y，对应输入数据，确定（结束）。即可求得 Y = aX+b 中的 ab值。

4、实例操作方法，可以参见”室内空气质量检测实用技术“一书的第五章，有详细介绍。

标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系，建立标准曲线可以推导待测物质的理化属性。

在分析化学实验中，常用标准曲线法进行定量分析，通常情况下的标准工作曲线是一条直线。

标准曲线的横坐标(X)表示可以精确测量的变量(如标准溶液的浓度)，称为普通变量，纵坐标(Y)表示仪器的响应值(也称测量值，如吸光度、电极电位等)，称为随机变量。当X取值为X1， X2…… Xn时，仪器测得的Y值分别为Y1， Y2 …… Yn。

分光光度法中标准曲线的影响因素

1） 分析法自身的精密度：

如显色反应灵敏度不高时，被测物质低于某一浓度就不能显色，当显色溶液中的掩蔽剂或缓冲液能够络和少量被测离子，就会使标准曲线线性关系不好。如用铬酸钡分光光度法测定水中硫酸盐、用双硫腙分光光度法测水中锌时，在标准曲线的低浓度区间就有可能有此现象。

2） 测定用仪器（包括量具）的精密度：

在分光光度法中要求在最大吸收峰处测定吸光度，分光光度计有效谱带宽度越窄越好，有利于获得纯度高的单色光，当单色光的纯度不够时，测定的吸光度就会偏低。

3）易挥发溶剂所引起的测定溶液浓度改变：

如用亚甲蓝分光光度法测定阴离子合成洗涤剂时用四氯化碳、氯仿溶剂，因溶剂挥发性及实验时间的延长，会使测定的溶液浓度增大，导致吸光度重现性较差。

4） 污染：

制作标准曲线的操作步骤中，当存在损失或沾污时，会造成相关系数达不到实验要求。

5） 空白值：

空白值影响测定方法的检出限，也影响测定结果重现性，特别是对低浓度样品的测定，因此应引起足够重视，影响空白值主要因素有：纯水的纯度、操作过程中的沾污、实验条件的异常变化等，这些因素对测定的影响程度经常变化，并非是一恒定的数值，但在同一组数据中，这些因素对每一测定结果的影响基本一致，因此在每一组测定中进行空白实验是十分必要的。

由于空白值与诸多因素有关，且是影响测定结果准确度的重要指标，应对其严格控制，并可作为实验室自我评价的重要依据，在测定工作中应设法降低空白值，当空白值过高时，应根据其主要影响因素，全面进行检验。

邻二氮菲吸光光度法测定水样中铁

在6个50mL比色管中，用吸量管准确分别加入0.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0 mL、8.0 mL、10.0 mL铁标准工作溶液（10μg/mL），各加入1mL盐酸羟胺溶液，摇匀。再加入2mL邻二氮菲，5mLNaAc溶液，用水稀至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在所选择的波长下测定各溶液的吸光度。以铁的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标（可手绘、计算机绘和计算）制作标准曲线。

校准曲线包括标准曲线和工作曲线，前者用标准溶液系列直接测量，没有经过预处理过程，这对于样品往往造成较大误差而后者所使用的标准溶液经过了与样品相同的消解、净化、测量等全过程。

凡应用校准曲线的分析方法，都是在样品测得信号值后，从校准曲线上查得其含量(或浓度)。因此，绘制准确的校准曲线，直接影响到样品分析结果的准确与否。此外，校准曲线也确定了方法的测定范围。

1.校准曲线的绘制

用一系列被测物标准溶液，按照标准方法规定的步骤，将被测物转变为有色溶液。制备好的标准系列和空白，在方法选定的波长下，测定吸光度。已被测物浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制校准曲线。

1)对标准系列，溶液以纯溶剂为参比进行测量后，应先作空白校正，然后绘制标准曲线

2)标准溶液一般可直接测定，但如试样的预处理较复杂致使污染或损失不可忽略时，应和试样同样处理后再测定。

3)校准曲线的斜率常随环境温度、试剂批号和贮存时间等实验条件的改变而变动。因此，在测定试样的同时，绘制校准曲线最为理想，否则应在测定试样的同时，平行测定零浓度和中等浓度标准溶液各两份，取均值相减后与原校准曲线上的相应点核对，其相对差值根据方法精密度不得大于5%～10%，否则应重新绘制校准曲线。

2. 校准曲线的检验

1)线性检验: 即检验校准曲线的精密度。对于以4～6个浓度单位所获得的测量信号值绘制的校准曲线，分光光度法一般要求其相关系数 | r | ≥0.9990，否则应找出原因并加以纠正，重新绘制合格的校准曲线。

2)截距检验：即检验校准曲线的准确度，在线性检验合格的基础上，对其进行线性回归，得出回归方程 y= a+bx ，然后将所得截距a与0作t检验，当取95%置信水平，经检验无显著性差异时，a可做0处理，方程简化为y= bx，移项得x=y/b。在线性范围内，可代替查阅校准曲线，直接将样品测量信号值经空白校正后，计算出试样浓度。

当a与0有显著性差异时，表示校准曲线的回归方程计算结果准确度不高，应找出原因予以校正后，重新绘制校准曲线并经线性检验合格。在计算回归方程，经截距检验合格后投入使用。

回归方程如不经上述检验和处理，就直接投入使用，必将给测定结果引入差值相当于解决a的系统误差。

3) 斜率检验: 即检验分析方法的灵敏度，方法灵敏度是随实验条件的变化而改变的。在完全相同的分析条件下，仅由于操作中的随机误差导致的斜率变化不应超出一定的允许范围，此范围因分析方法的精度不同而异。例如，一般而言，分子吸收分光光度法要求其相对差值小于5%，而原子吸收分光光度法则要求其相对差值小于10%等等。

3. 校准曲线的控制

被测物转变为有色溶液的反应称为显色反应或发色反应。显色反应的介质PH条件、显色剂用量、显色反应的时间和温度、为消除共存物干扰而加入的掩蔽剂、甚至加试剂的顺序，都要按照方法步骤的要求执行。有时，标准系列虽然不像实际试样那样组成复杂，但仍要求与试样进行同样的处理步骤，以便控制校准曲线上的数据点的空白、回收率等因素。

建立校准曲线时，测量吸光度的参比有两种选择。

第一种方法用纯溶剂作参比，两个比色皿都放溶剂时，“样品比色皿” 的吸光度测定值为比色皿成对性校正值，此后所有样品吸光度测定值都须扣除此值，进行校正。然后，以纯溶剂为参比，测定空白及标准系列的吸光度，绘制校准曲线。

第二种方法直接用空白为参比。当两个比色皿都放空白时，测定比色皿成对性校正值，然后测定标准系列的吸光度，绘制校准曲线。两种方法得到的两条校准曲线互相平行，但第一种方法可测定空白的水平，后一种方法不能测定空白，理论上校准曲线通过原点。若空白为零，两条校准曲线重合。无论用什么作参比，实样测定时应该使用与建立校准曲线相同的比色皿和同样的参比。

比色皿的成对性校正对于使用已久的比色皿是必要的，尤其是测量吸光度很小的样品时，校正可保证测量值的可靠性和重复性。

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