生物样品中蛋白质的处理方法有哪些
一。蛋白质沉淀方法
1.中性盐盐析法
⑴在一定的
ph值及温度条件下,改变盐的浓度(即离子强度)达到沉淀的目的,称为“ks”分级盐析法。
(ks盐析:固定ph,
温度,改变盐浓度)
⑵在一定的离子强度下,改变溶液的ph值及温度,达到沉淀的目的,称为“β”分级盐析法。
(β盐析:固定离子强度,改变ph及温度。)
2.等电点沉淀法
蛋白质等电点沉淀法是基于不同蛋白质离子具有不同等电点这一特性,依次改变溶液ph值的办法,将杂蛋白沉淀除去,最后获得目标产物。
3.有机溶剂沉淀法
许多能与水互溶的有机溶剂如乙醇、丙酮、甲醇和乙腈,常用于低盐浓度下沉淀蛋白质。
4.非离子型聚合物沉淀法
20世纪60年代非离子型聚合物开始用于分离血纤维蛋白原和免疫球蛋白,从此高相对分子质量非离子聚合物沉淀蛋白质的方法被广泛使用,如:聚乙二醇(peg)、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、葡聚糖等。
5.金属沉淀法
能与羧基、胺基等含氮化合物以及含氮杂环化合物强烈结合的金属离子,如:mn2+、fe2+、co2+、ni2+、cu2+、zn2+、cd2+;
能与羧酸结合而不与含氮化合物结合的金属离子,如:ca2+、ba2+、mg2+、pb2+;
与巯基化合物强烈结合的金属离子,如:hg2+、ag+、pb2+。
实际使用时,金属离子的浓度常为0.02
mol/l。
6.亲和沉淀
初始阶段:将一个目标蛋白质与键合在可溶性载体上的亲和配体络合成沉淀;
所得沉淀物用一生中适当的缓冲溶液进行洗涤,洗去可能存在的杂质;
用一种适当的试剂将目标蛋白质从配体中离解出来。
7.选择性变性沉淀法
(1)例如对于α-淀粉酶等热稳定性好的酶,可以通过加热进行热处理,使大多数杂蛋白受热变性沉淀而被除去。
(2)根据欲分离物质所含杂质的特性,通过改变ph值或加进某些金属离子等使杂蛋白变性沉淀而被除去。
8.反胶束萃取蛋白质
菌体细胞提取
固液分离是生物产品生产中的重要单元操作。培养基、发酵液、某些中间产品和半成品等都需进行固液分离。发酵液由于种类多、粘度大及成分复杂,其固液分离最为困难。
固液分离的方法很多,生物工业中常规的方法有分离筛、重力沉降、浮选分离、离心分离和过滤等,其中用于发酵液固液分离的方法主要是离心分离和过滤。
二。超滤膜滤去。
木质纤维素和纤维素的区别
木质纤维素和纤维素的区别,在生活中,饮食是获取人体需求的主要途径之一。一日三餐等饮食模式不但利于补充体能,也能提高身体免疫力。但食物类型不同,包含的营养物质也有些不同。下面看看木质纤维素和纤维素的区别。
木质纤维素和纤维素的区别1纤维素
1.纤维素的结构:
1.1化学结构:
化学结构式:(C6H10O5)n
葡萄糖单元:β-D-吡喃葡萄糖
葡萄糖基的键合:β-1-4糖苷键的连接
纤维素中的羟基:含有三个醇羟基,其中C6的羟基为伯羟基,C2和C3上的羟基为仲羟基。
纤维素的平均聚合度在8000-10000之间。
1.2物理结构:
纤维素的相结构
纤维素的聚集态结构是由结晶相和无定形相共存的状态。其中晶体结构包含了大概五种类型。
(1)纤维素ⅠⅤ晶:天然存在的纤维素形式。平行分子链有规则排列组成的,属于单斜晶系。
(2)纤维素Ⅱ晶:经由溶液中再生或经丝光处理得到的结晶变体。是工业上使用最多的纤维素形式。得到此种纤维素晶体的方法有:①通常由浓碱作用下生成碱纤维素,再水洗得到纤维素,称为丝光化纤维素;②溶解后从溶液中沉淀出来;③酯化后再皂化成纤维素;④磨碎后并以热水处理。
纤维素Ⅱ晶较Ⅰ晶结构氢键网络更加复杂。两条分子链反平行堆砌,致使致密度更大,氢键的长度下降,晶体的热稳定性增加。
(3)纤维素Ⅲ晶:将纤维素用液氨或者有机胺类润胀生成氨纤维素,蒸发溶剂使其分解后形成的一种低温变体。特征是Ⅲ晶的形成有一定的消晶作用,当胺或氨除去后,结晶度和分子排列的有序都会下降。这种方法用于处理棉织物,来提高其机械性能、染色性和尺寸稳定性。
晶体结构有两种:一种是和Ⅰ晶一样的平行链结构Ⅲ1、一种是和Ⅱ晶一样的反平行链结构Ⅲ2。
(4)纤维素Ⅳ晶:由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ晶在极性溶液中加以高温处理而成,固有“高温纤维素”之称。晶体结构也包含两种:平行链和反平行链。
(5)下图是各晶体之间的转化关系:
纤维素的液晶态结构:由于纤维素分子中含有大量的氢键而阻碍了苷键的自由旋转、限制了它的构想转变,所以通常为伸直的螺旋结构。所以纤维素及其衍生物都是半刚性的分子,它们在适当的条件下均可形成液晶,通常是胆甾型液晶态。胆甾型液晶是一种具有旋光性,
能够呈现色彩及双折射显现的液晶体系。纤维素分子分层分布,每层中的纤维素分子彼此倾向于某个方向排列,这个方向成为指向矢。层与层之间互相平行,相邻的层内分子的指向矢有一定扭转,这些不同层分子的扭转赋予纤维素液晶可散射的白光,并使透射光发生偏转。
纤维素液晶的形成与溶剂、温度、纤维素的尺寸、分子量及其分布、纤维素的衍生化都有关系,调控这些之变是比较困难的。而且纤维素分子在运动过程中更易形成结晶和凝胶的聚集状态,因此制备纤维素液晶是有待进一步研究的。目前报道的纤维素液晶材料包含热致型液晶、溶致型液晶。
例如Justin O.Zoppe等人制备了新型的溶致型微晶纤维素液晶,是用棉纤维为原料,制备了纤维素纳米晶体,通过透析膜进行分离纯化,添加环氧单体及固化剂,通过挥发溶剂成膜制备了含50-72wt%纤维素纳米晶体的纤维素液晶膜。
2.纤维素的理化性质:
一般而言,纤维素的结晶度大木材的抗拉强度、抗弯强度、尺寸稳定性就高。
2.1纤维素分子链柔顺性很差,通常为半刚性的,因为:
(1)纤维素分子有极性,分子链之间相互作用力很强;
(2)纤维素中的六元吡喃环结构致使内旋转困难;
(3)纤维素分子内和分子间都能形成氢键特别是分子内氢键致使糖苷键不能旋转从而使其刚性大大增加。
2.2纤维素的溶解
纤维素的溶解度很小。水可使纤维素发生有限溶胀,某些酸、碱和盐的水溶液可渗入纤维结晶区,产生无限溶胀,使纤维素溶解。纤维素加热到约150℃时不发生显著变化 ,超过这温度会由于脱水而逐渐焦化。纤维素与较浓的无机酸起水解作用生成葡萄糖等,与较浓的苛性碱溶液作用生成碱纤维素,与强氧化剂作用生成氧化纤维素。
2.3纤维素的酯化、醚化、接枝共聚、亲核取代改性。纤维素聚合度高、分子取向度好、化学稳定性强。利用葡萄糖基环上的三个醇羟基特性,使纤维素可以发生酯化、醚化和接枝共聚等多种反应。
2.3.1酯化反应,纤维素分子链上的羟基可以与酸、酸酐、酰卤等发生反应生成酯,与烷基化试剂反应生成醚。例如:醋酸纤维。这种过程称为乙酰化或醋化,对木材进行乙酰化处理,可使木材低酯化,改善尺寸稳定性。纤维素酯中以纤维素硝酸酯、纤维素醋酸酯、纤维素黄原酸酯最为普遍。醚化反应,通常使用的是羧甲基纤维素的钠盐(CMC)、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基纤维素(HPC)。
2.3.2接枝共聚,所选用单体多为乙烯基化合物,如氯乙烯、丙烯腈、丙烯酰胺、甲基丙烯酸甲酯等。
2.3.3亲核取代:糖类化学中羟基的亲核取代主要为SN2取代、可得到脱氧纤维素卤代物和脱氧氨基纤维素。二者都可作为吸附净化类材料的原料。
纤维素的应用前景拓展:
根据以上对于纤维素本身的研究可知它有以下几个特点。
(1)纤维素大分子链上有很多羟基,具有转化的反应性能和反应可设计性,因此,各种材料加工工艺相对比较简单、成本低、加工过程无污染。
(2)纤维素类材料可以被微生物完全降解,这与利用生物质材料与聚烯烃共混所制得的生物降解材料不同,因为对于后者,生物质材料可以被生物降解,但聚烯烃却不能或很难被生物降解。
(3)纤维素材料本身无毒。因此,以纤维素为基质的材料使用范围非常广泛。
再生纤维素分离膜是一类重要的膜材料,它具有力学性能良好、亲水、对蛋白质和血球吸附少、耐γ射线、耐热、稳定、生物相容和安全等优点,且大量的羟基使其易于修饰、改性,废弃后还可以在微生物的作用下完全分解成CO2和水,不会造成环境污染。因此,再生纤维素分离膜是非常有应用前景的高分子膜材料,主要用于透析、超滤、微滤、纳滤等一些分离领域。
纤维素气凝胶。是世界上已知的密度最低的固体具有高通透性的纳米孔三维网络结构、极高的孔隙率、极低的密度、高比表面积等特点,其结构性能明显不同于微米和毫米量级孔洞结构的多孔材料,
在分离、吸附、催化、光电、传感器、生物 医药等方面具有广阔的应用前景。虽然目前纤维素基气凝胶存在制备方法比较复杂、成本较高、难以实现工业化生产等问题,但在未来纤维素气凝胶一定能给材料领域带来突破。
纤维素类水凝胶。它的耐盐性比用淀粉合成的好,并且是一种环境友好的绿色材料。由于其优异的吸水性、保水性和“智能”性,水凝胶在药物传输系统、农林园艺、废水处理、组织工程和再生医学等领域展现出非常广阔的应用前景。纤维素基水凝胶具有生物相容性,可参与人体新陈代谢,对人体无刺激性、无副反应。采用冷冻-解冻技术制备的聚乙烯醇/纤维素纳米晶须复合水凝胶,具有良 好的力学、阻隔和抗菌性能,被当作伤口敷料的最佳材料。
半纤维素
1.半纤维素:是植物组织中聚合度较低的非纤维素聚糖类,是构成植物细胞壁的主要组分。一般由两种或两种以上的糖基组成,大多数带有短支链的线状结构。常见的糖基如下:
半纤维素的结构:半纤维素在天然状态下聚合度低,可反应官能团多,化学活性强,反应速度快。半纤维素的平均聚合度在200左右,一般分布在100~300,比纤维素的小得多,并且半纤维素有支链,这是半纤维素和纤维素的主要区别。
绝大部分为无定形结构(侧链、支链阻止了氢键的形成)有一到两种高聚糖有结晶状态(插入纤维素进入结晶区)。半纤维素–纤维素之间,仅物理连接(氢键),无化学连接;半纤维素–木质素之间,既存在物理连接(氢键),同时存在化学连接(酯键、醚键、苷键、缩醛)
2. 半纤维素的性质:
2.1溶解。半纤维素中有一小部分易溶于水,大部分不溶于水。如聚阿拉伯糖一分解乳糖易溶于水,一般聚合度愈低,分枝度越大的越易溶于水。通过分离得到的半纤维素要比天然的半纤维素的溶解度高。某些半纤维易溶于碱液中,而某些则易溶于酸液中。
2.2水解。糖苷键在酸性介质中被裂开而使半纤维素发生降解;在碱性介质中,半纤维素也可发生剥皮反应和碱性水解。
2.3酯化、醚化、接枝共聚均可形成衍生物。通过羧甲基化反应,可制备羧甲基变性半纤维素,在制药行业拥有广泛的用途。碱性条件下,木聚糖与羧基甲基苯溴、苯甲基溴等发生醚化反应可制备出作为热塑性原料的衍生物用于工业生产。半纤维素的羟基醚化可以增加半纤维素的水溶性、疏水性、表面活性等,可用于制药、污水处理、热塑性材料、食品添加剂方面。
3. 半纤维素的改性材料:
由以上了解到的`半纤维素的性质可知,它含有半纤维素羟基、乙酰基及羧基等官 能团,可通过交联或进一步改性形成具有不同功能的半纤维素基水凝胶,拓展半纤维素在生物、医药、伤口、敷料、废水处理和3D打印等领域的应用。
复合水凝胶:单一的半纤维素基水凝胶强度较低,且不能满足某一特定用途,如废液中污染物的选择性吸附和生物、医药中抗菌、抗氧化等。而将半纤维素与另一种或多种功能性天然有机或无机聚合物复合,
可以获得具有多种组分优点的新型智能半纤维素基复合水凝胶。其中,纳米纤维素和壳聚糖与半纤维素形成 复合水凝胶最为常见。实验发现,随着纳米纤维素含量的增加,半纤维素复合水凝胶在韧性、黏弹性、自恢复性能方面都得到增强。
半纤维素基智能水凝胶有大的 比表面积和良好的生物相容性,并且能对pH、温度、光、磁场、盐和有机溶剂等外部条件变化产生智能响应,可作为药物载体,控制药物的吸收输送速率,实现药物控制释放的目的。
吸附材料:半纤维素基水凝胶有大量的孔结构,吸水性强,研究发现对重金属离子和有机染料等污染物有很好的吸附效果。例如利用半纤维素与丙烯酸交联,引入电负性的羧基基团,通过静电作用实现对重金属离子的吸附。
木质素
1.木质素的结构
在植物细胞壁内,木质素是一种以苯丙烷单体(对羟基苯基、愈创木基和紫丁香基)通过β-O-4、β-β、β-5、5-5等共价键连接形成的网状结构高分子聚合物,用于强化植物组织。甲氧基是木质素结构中特征官能团之一,并且比较稳定。结构单元之间的连接主要是醚键和碳碳键。
2.木质素的物化性质:
2.1木质素作为一种填充和粘结物质,在木材细胞壁中能以物理或化学的方式是纤维素纤维之间粘结和加固,增加木材的机械强度和抵抗微生物侵蚀的能力,使木化植物直立挺拔和不易腐蚀。在木本植物中,木质素占25%,是世界上第二位最丰富的有机物(纤维素是第一位)。由于自然界中木质素与纤维素、
半纤维素等往往相互连接,形成木质素-碳水化合物复合体,由于结构中的极性基团和较多的羟基,造成了很强的分子内和分子间氢键,因此原木木质素是不容于任何溶剂的。故目前没有办法分离得到结构完全不受破坏的原本木质素。
2.2木质素的分子量和多分散性.任何一种分离方法都有可能引起木质素的局部降解和变化。因此,原本木质素的分子量是无法确知的。
2.3木质素的溶解性。木质素中存在羟基等多种极性基团,造成了很强的分子间作用力,因此原木木质素是很难溶解的。
2.4木质素的热性质。木质素为无定形的热塑性高聚物。在低温下略显脆性,在溶液中不成膜。具有玻璃态转化性质,在玻璃化温度以上,分子链发生运动,木质素软化变黏,并具有粘胶力。
2.5木质素分子结构中存在着芳香基、酚羟基、醇羟基、羰基、甲氧基、羧基、共轭双键等活性基团,可以进行氧化、还原、水解、醇解、光解、酰化、磺化、烷基化、缩合和接枝共聚等化学反应。还原反应可生产苯酚或环己烷等化工产品。木质素的催化氢化也有许多分解产物。
2.6接枝共聚:木质素的酚羟基能与环氧烷烃或氯乙醇反应,产物具有较高的胶合强度和优良的耐水煮沸性能。木质素或木质素磺酸盐与丙烯酰胺、丙烯酸、苯乙烯、甲基丙烯酸甲酯、丙烯腈等发生接枝共聚。
3.目前在木质素改性方面得到的新材料有:
3.1木质素酚醛树脂通过调节酸、碱性来控制木质素与苯酚或者甲醛的反应次序制备酚醛树脂。将木质素引入酚醛树脂在保持力学性能和热稳定性的同时,明显地提高了绝缘性和高温下的模量。
3.2木质素基聚氨酯:木质素的活性羟基与异氰酸酯的反应可制备聚氨酯材料。
3.3木质素衍生物与环氧树脂共混、环氧化改性木质素等。
3.4木质素的胶体性质可制备水凝胶。可得到吸附性能很强的木质素基吸附材料。
3.5木质素填充橡胶。木质素的刚性网络和柔顺侧链结构的众多活性基团,呈较大比表面积的为细颗粒状。只需对木质素进行化学修饰提高木质素与橡胶的相容性,然后作为橡胶补强剂有着比重小、光泽度好、耐磨耐曲挠的优点。
4. 木质素的最新研究进展:
木质素因为自身的三维网状结构、适宜的碳氢比以及可提供大量活性的酚羟基、刚性的苯环、羰基结构,故而是一种同时具备吸附、抗热老化、抗氧化、抗高温变形和生物兼容等多种作用理想材料。当下对木质素的应用研究主要集中在作为水中重离子、有机染料吸附剂,制备准液体燃料,制备耐高温或耐氧化改性树脂,制备改性沥青以及制备生物兼容性水凝胶等方面。
吸附材料:由于木质素含有大量活跃的酚羟基、甲氧基结构,在酸性条件下极易与具有强氧化性的离子进行反应,将之吸附,故而木质素有很好的离子吸附作用。
生物质燃烧材料:由于木质素的碳氢组成比(12:1)和天然石油(8:1)近似,且有较多的氧元素,故而木质素是一种高能物质,有良好的生物质燃烧作用
抗老化材料:由于木质素中含有大量羟基结构高温下可与多种功能性有机高分子材料发生醚化作用,增强高温下材料的强度,故而木质素有很好的抗热老化作用。
抗氧化材料:由于木质素中有大量活性羟基结构,可用于和有机高分子间形成氢键,并能捕捉氧化过程中的自由基,故而木质素有极佳的抗氧化性作用。例如在聚氨酯中掺杂木质素来改进其易老化的问题。
生物材料:由于木质素来源为植物木质部,作为天然的高分子化合物,分离之后的木质素对生物细胞有较好的兼容性,基于其制成的新型材料也多具有较好的生物兼容性。例如,利用木质素中苯氧化物基团与壳聚糖主链上的铵基之间的静电相互作用,使壳聚糖酸性水溶液与木质素形成离子型交联,从而制得壳聚糖-木质素生物相容性水凝胶。这种水凝胶可用于伤口愈合。
木质纤维素和纤维素的区别2纤维素,说白了就是一种大分子多糖,是自然界中分布最广、含量最多的的一种多糖,占植物界含碳量的50%以上,不溶于水及一般的有机溶剂。纤维素是地球上最丰富、最古老的的天然高分子,同时更是人类取之不尽用之不竭的最宝贵的天然可再生资源。
纤维素具有溶解性、纤维素水解、纤维素氧化以及柔顺性:
纤维素虽然不溶于水以及有一般机溶剂,但是可以铜氨溶液和铜乙二胺溶液等;在一定条件下,纤维素会与水发生反应,变成葡萄糖,这就是纤维素的水解性能;纤维素可以与氧化剂发生化学反应,生成一系列与原来结构不同的物质,这一反应过程被称为纤维素的氧化;纤维素是刚性的的,柔顺性很差。
下面我再来说说与纤维素名称只有两字之差的“木质纤维素”。
木质纤维素是天然可再生木材经过机械加工、化学处理得到的絮状纤维物质,无味、无毒、无污染和放射性,广泛应用于混凝土砂浆、木浆海棉等领域,能够很好打防止涂层断裂、提高施工强度等。
木质纤维素不溶于水、弱酸和弱碱,具有很好的保温、隔热、透气性能;木质纤维素的柔韧性和分散性良好,形成的三位网状结构能够增强系统的耐久性和支撑力,其结构粘性使施工精度大大提高;同时,木质纤维素具有很强的防冻、防热能力。
链科技成果库项目:木质纤维素整合生物加工糖化技术。
技术优势:整合生物加工(CBP)在一个反应器中完成从纤维素降解到能源产品合成的全过程,从而降低成本、简化过程,是最有希望实现木质纤维素工业化应用的技术之一。
性能指标:通过菌株工程改造及工艺优化,获得热纤梭菌的CBP高效糖化全菌催化剂,糖化效率比野生菌种高5倍以上,并最终建立木质纤维素产糖的一体化CBP工艺吨级示范,可发酵糖含量>80g/L。市场分析:我国每年的农林废弃物总量约15亿吨,若30%用来生产燃料乙醇,以6吨产1吨乙醇估算,则可形成7500万吨燃料乙醇生产能力,与目前国内成品汽油消耗总量相当。本项目开发基于CBP技术的木质纤维素的高效利用工艺能极大降低下游产品的生产成本,简化生产流程,具有广泛的市场前景和可观的经济效益。
链科技ChainTech 中国技术信息大数据库,专家在线实时咨询平台。专注于技术难题解决、技术成果引进,实现成果转化和技术转移。平台提供技术评估、技术创新、专家咨询、技术推广等系列服务。
木质纤维素和纤维素的区别3纤维素是什么主要成分
首先,纤维素的溶解性是在常温下不溶于水的,与其他的有机溶剂还是有着本质上的差别,这样的纤维素成分上是比较稳定的。不过在水解化学反应中,能够产生大量的葡萄糖,这是对我们人体营养较为丰富的一种。所以说,这样的成分也是不可忽视的一部分,一定要合理的去了解到纤维素的化学特点和分子式,那就会在运用的过程中知道了其中的作用越来越显著的。
总之,分析纤维素是什么的主要成分时,还是要合理的去对比其纤维素的功效和作用,然后在很多的保健品、食品、护肤品等等成分中还是会具备的,都觉得在各方面的效果也是很神奇的,应该充分的去利用这样的成分优点,带来了不一样的功效。在方方面面都可以看出来纤维素的特点是与众不同的。
首先纤维食物一定是植物性的食物,纤维素或者说膳食纤维在动物性的食物中是没有的。野生的蔬菜里面纤维素比种植的蔬菜里面多,深颜色的蔬菜比浅颜色的蔬菜纤维多。
哪些食物属于纤维食物:纤维食物存在于地里生长的食物,五谷杂粮,蔬菜水果类的,菌藻类的,菇类的,坚果类的都是纤维食物。果实类的蔬菜比如坚果,番茄,黄瓜,冬瓜等纤维含量也很高。
1, 痛苦是性格的 催化 剂,它使强者更强,弱者更弱,仁者更仁,暴者更暴,智者更智,愚者更愚。周国平
2, 压力、挑战,这一切消极的东西都是我能够取得成功的 催化 剂。
3, 牢骚是改变不合理现状的 催化 剂。2、牢骚虽不总是正确的,但认真对待牢骚却总是正确的。
4, 冬天的阳光,那暖融融的闲静最能 催化 一个人的情思,让身心和思绪如解冻的溪水自在地流淌,阳光不刺眼,温度也不高,周围环境不像春天的喧闹嘈杂,更不像秋天的萧条肃杀。一派静穆和谐的氛围。
5, 梦想是点燃生命之火的 催化 剂。
6, 自信是成功的前提,勤奋是成功的 催化 剂。
7, 苦难是动力的 催化 剂。苦难是一本启智的经书。苦难又是一位深沉的哲人。苦难是人生一道永远开放着绚丽花朵的风景。
8, 责任是让一个男孩成长为男人的最好的 催化 剂。
9, 爱是剧烈的化学反应,时间是 催化 剂,会产生两种衍生物:因爱而爱,因爱而恨。当爱演变成习惯和责任,你将收获一辈子的幸福!
10, 腿懒、手懒、脑懒是衰老的 催化 剂,腿勤、手勤、脑勤是长寿的发动机,安逸和平庸的鸿沟只能用药物去填充,健康和多彩的生活必须用运动来打造!
11, 教师应不厌其详的示范学习方法,适时的 催化 学习进程,积极的助构所欲学的知识或技能,让学生有所依循。
12, 你在这儿我有化学反应,你就是" 催化 剂",价值可大了,你的人生也就有很大意义。
13, 挑战,这一切消极的东西都是我能够取得成功的 催化 剂。
14, 若将管理辅导活动以化学反应为比喻,使用得当是 催化 剂,使用不当是抑制剂,虽然其并未直接参与反应,但运用之妙存乎一心,绝对可加速企业之发展。
15, 目的研究钠米光 催化 空气净化器的降解效率,为钠米光催化空气净化器的卫生学评价提供科学依据。
16, 以混合二异丙苯为原料经择形 催化 裂解和减压蒸馏,制备了高含量的间二异丙苯。
17, 在电 催化 电极的作用下,电化学反庆和化学催化作用结合,导致有机分子的电催化降解。
18, 利用组态和编程软件实现 催化 主风机防喘振控制,机组自保联锁和机组停机联锁.
19, 我感觉到了竞争给万事万物、各行各业带来的活力,我体会到了人情对竞争的 催化 作用,我看到了竞争与人情的完美统一创造的美好的世界。
20, 独立是夜幕中的一丝微光,虽然很淡,但也能冲破黑暗。独立是大海里的一块木板,虽然很小,但也能拯救生命。独立是烧杯内的一种 催化 剂,虽然很少,但也能改变速率。
21, 这夜,这星空,忽然之间就是一次偶遇,而这种偶遇总是会季节性地出现。秋的萧瑟,秋的浅殇,总是无意间给生命增添了一种 催化 剂。我想:我等待在青春,却错过了彼此,但我永远记得,那年……最灿烂,最寂寞的星空。
22, 希望是什么?是引爆生命潜能的导火线,是激发生命激情的 催化 剂。每天给自己一个希望,我们将活得生机勃勃,激情澎湃,哪还有时间去叹息,去悲哀,将生命浪费在一些无聊的小事上。
23, 对情感方式的质疑,对表达“爱”的腐朽语言的不信任和拒绝,既成了诗人表达情感的一个重大障碍,但也是增加诗人情感强度的 催化 剂,或者说还是对诗人如何表达自己最珍惜的情感的挑战。尤其是在涉及母爱这种类型的情感时,这一点表现得尤其清晰。
24, 坦率和忠诚是家庭幸福的稳定剂,大度和包容是家庭幸福的 催化 剂,责任和义务是家庭幸福的防腐剂,幽默和开朗是家庭幸福的润滑剂。
25, 虽然建筑的形态、空间及外观要符合必要的逻辑性,但建筑还应该蕴涵直指人心的力量。这一时代所谓的创造力就是将科技与人性完美结合。而传统元素在建筑设计中担任的角色应该像化学反应中的 催化 剂,它能加速反应,却在最终的结果里不见踪影。
26, 诚信不意味着傻气,它意味着我们愿意用一颗真诚的心来对待生活。让我们用自己的手,将人生这部大书写好,让我们以诚信作 催化 剂、作五线谱、做调色板,使我们生活的酒更醇,歌更好,画更美。
27, 岁月淡了,是缺少乐趣;感情淡了,是缺少联系。时光漫漫,我们总会不小心走散了,我愿用短信做粘剂,用问候做调剂,用祝福做 催化 剂,把失散的缘分重新粘合,愿我们生活更好,友谊更铁,更加幸福快乐。
28, 感情的知觉同样存在。只是它们未必如同活跃的化学分子那样容易产生变化,更需要 催化 剂的帮助来予以证实。
29, 做好笔记是快速提升语文成绩的终南捷径,是语文最后厚积薄发的 催化 剂。
30, 笑脸就像香水,芳香四溢;健康就像发动机,动力十足;快乐就像 催化 剂,美化生活。朋友,愿你笑口常在,健康快乐!
31, 利用微型反应釜,考察了正己基苯在硝酸镍甲醇溶液、硝酸铜甲醇溶液、硝酸镍水溶液、硝酸铜水溶液、硝酸和水 催化 下的悬浮床加氢裂化反应.
32, 考察了一元铂与二元铂铑两种贵金属 催化 剂对氰化氢的催化燃烧效果,探讨了温度、氰化氢浓度、空气含量及气体空速等因素对脱除氰化氢的影响。
33, 用环已醇和盐酸在氯化锌 催化 下合成了有机锡农药的重要中间体氯代环已烷。探索了催化剂重复使用的条件,降低了生产成本。
34, H2O作 催化 剂,对蓖麻酸与正丁醇酯化反应进行了研究.
35, 胍丁胺是左旋精氨酸在左旋精氨酸脱羧酶 催化 下脱羧基的产物,是咪唑啉受体的内源性配体。
36, 分析了不同 催化 剂的优缺点及催化机理,讨论了催化剂的组成、结构以及催化裂解条件对催化效果的影响,展望了未来焦油催化裂解的研究重点。
37, 本课题是关于三元 催化 器故障系统可行性和诊断方法的研究。
38, 论文旨在液相条件下,以分子氧为氧化剂,使用固体 催化 剂对甲苯氧化反应进行研究。
39, 这种V6发动机还具有排气再循环,一氧化 催化 转换器和一个维修免维护柴油机微粒过滤器。
40, 简述了纳米银在抗菌材料和 催化 剂等方面的应用,指出了纳米银的制备过程中存在的问题和发展方向。
41, 研究了以无水碳酸钠为 催化 剂,红霉素肟与甲氧基乙氧基氯甲醚为原料,一步合成罗红霉素的实验过程。
42, 试验证明:碱金属碳酸盐,碱金属氢氧化物和碳酸钠同四氧化三铁的复合剂,都表现出相接近的 催化 活性。
43, 研究了丁腈橡胶加氢用醋酸钯 催化 剂的制备.
44, 首次用路易斯酸作为 催化 剂,以水杨酸和乙酸酐为原料合成乙酰水杨酸。
45, 研究了饮用水臭氧 催化 氧化过程中溴酸盐的生成特点与控制效能。
46, 大多数含茂金属的双组分或多组分 催化 体系用于制备宽分子量分布聚烯烃,尤其是宽分布聚乙烯,少数用于制备支化或嵌段聚合物。
47, 该技术应用后,对顺丁橡胶质量无影响,聚合更加平稳, 催化 剂用量下降。
48, 在富站区, 催化 活性主要取决于金属钻离子的状态,富锰区主要与锰离子和催化剂的缺陷结构有关。
49, 活性炭基 催化 剂是低温烟气脱氮的优良催化剂.
50, 本发明公开了一种氯苯废气 催化 净化方法.
51, 制备了常压下丙酮与氢气合成甲基异丁基酮的双金属碱性 催化 剂,并测定了其反应活性.
52, 这一过程是由一系列酶和辅因子 催化 的,这些酶和相关的辅因子统称为凝血因子。
53, 采用磷脂酶A1 催化 酸解大豆磷脂获得溶血磷脂。
54, 摘要研究了碳酸铯 催化 酚与卤代烃反应制备烷基芳醚.
55, 对以胰蛋白酶为 催化 剂,琥珀明胶为底物的酶解反应体系进行了考察.
56, 原来爱就是一种 催化 剂,它复杂了一切成分,能把黑混成红,白化成绿。消失宾妮
57, 以合成的纳米四氧化三铁为 催化 剂,过氧化氢为氧化剂,催化氧化含邻苯二酚的模拟废水和含邻甲苯酚的工业废水。
58, 并对光 催化 与光电催化过程作了动力学研究。
59, 以铁钾矾为 催化 剂,通过葵酸与乙醇反应合成了癸酸乙酯。
60, 对花生油、大豆油有一定的 催化 氧化作用.
61, 本文主要研究一类扩散系数不同的高次自 催化 反应.
62, 硫酸氢钠能够代替硫酸作为酯化 催化 剂.
63, 本文综述了多相不对称 催化 氢化反应的最新研究进展。
64, 研究方向是分离与 催化 反应工程.
65, 乙酰乙酸甲酯的工业化生产方法是双乙烯酮与甲醇在 催化 剂存在下进行酯化反应,再经粗分馏、精馏得成品。
66, 用相转移 催化 聚环氧氯丙烷与亚硫酸盐反应合成磺酸聚醚.
67, 聚酯树脂是交联的不饱和聚合物,用过氧化物类 催化 剂可制成热固性树脂。
68, 催化 剂由冷气体动力喷涂方法制取,它为一层致密的薄膜,能有效克服内扩散从而减小传输阻力,重整反应便发生在其表面之上。
69, 指出制约 催化 重整装置发展的主要因素是原料短缺的问题。
70, 在乙烯氧化制取环氧乙烷生产工艺中,银 催化 剂的性能是很关键的。
71, 对酒石酸及金鸡纳碱修饰型金属 催化 剂的反应机理也进行了探讨.
72, 研究了从双氧水氢化废镍 催化 剂中以硫酸镍形式回收镍的工艺方法。
73, 很多重要的化学工业过程就是使用多相 催化 剂的.
74, 辛烯在分子筛 催化 作用下除了发生裂解反应,还发生氢转移、环化等副反应。
75, 莰烯在阳离子交换树脂固定床 催化 下与乙醇反应生成异菠基乙醚。
76, 作为现阶段制备手性化合物最直接、最经济的方法, 催化 的不对称合成是近几十年立体化学中最活跃、发展最快的部分。
77, VTT也利用漆酶 催化 促酶反应形成有色产物,研究渗漏指示剂的构成.
78, 虽然未经历过严酷的社会竞争,但不良的家庭、学校教育环境同样在对其强迫性人格的形成起着 催化 作用。
79, 路易斯酸 催化 的反应在有机合成中占有重要的比重,但这些反应通常需要在严格的无水条件下进行。
80, 通过几年来 催化 装置多次开停气压机中经常发现的一些问题,总结出了安全开好气压机的一些要素和经验。
81, 通过对比,改造后能耗物耗下降,国产 催化 剂完全能替代进口催化剂。
82, 结果表明,研制的 催化 剂能有效脱除尾气中不饱和烃,加氢活性好和稳定性高。
83, 本文研究用氯化亚锡和稀土氯化物复合 催化 剂代替氯化汞合成氯乙烯单体,旨在探索其催化活性。
84, 这一新 催化 剂是IBM十年来研究的成果,寻找更好的方法来制胜用于计算机芯片绝缘层的聚合物。
85, 当使用磁铁矿悬浮液作为 催化 剂时,得到结晶性良好之竹节状奈米碳管.
86, 采用相转移 催化 法以四丁基氯化铵为催化剂合成了端基含磺胺嘧啶的聚乳酸,将肿瘤导向基团引入了可生物降解药物载体。
87, 以硫酸铈铵为 催化 剂,乙酸和异戊醇为原料,合成乙酸异戊酯.
88, 研究了以葵花籽油为原料,水为溶剂,氢氧化钠为 催化 剂合成共轭亚油酸的方法.
89, 报道了竹节状纳米碳管的连续合成,通过对生长因素的控制可以用浮动 催化 法连续合成竹节状纳米碳管。
90, 以对甲苯磺酸为 催化 剂,对二甲氨基苯甲酸和异丁醇为原料合成对二甲氨基苯甲酸异丁酯。
91, 上海石化股份公司重油 催化 裂化装置工艺技术分析.
92, 本文研究在氢氧化铯 催化 下,三甲硅基乙炔与二芳基二硒醚的反应。
93, 铜基土能直接吸附黄原酸根离子,同时对其氧化反应产生 催化 作用.
94, 本发明在单独以钒多酸盐为 催化 剂时,氧气为氧化剂,邻苯二酚类物质可以高选择性的转化成加氧开环产物。
95, 介绍了所用 催化 剂以及工艺流程的概况.
96, 用途:用于电子陶瓷、荧光涂料、含铋 催化 剂及医药品。
97, 论述了氨基树脂固化反应类型、反应速度、反应机理、涂层网络形成和计算,以及固化 催化 剂研究的进展。
98, 研究了在模拟太阳光和高压汞灯作用下,不同浓度的光 催化 剂和紫外光辐射强度对孔雀绿废液的光催化降解反应。
99, 发现,钛酸四丁酯或草酸亚锡作为缩聚 催化 剂时,在整个高真空阶段羧基含量并不是一直增加的。
100, 研究了以阳离子改性的丝光沸石为 催化 剂,以氨和甲醇为原料,在常压固定床上二甲胺选择性合成反应。
101, 采用固定床连续流动反应装置,对此 催化 剂用于气相苯加氢制环已烷的活性进行评价。
102, 介绍了BTCA整理条件的研究进展,包括无磷 催化 剂的研究、整理过程中添加剂三乙醇胺和柔软剂的作用。
103, 对采用高酸 催化 氧化浸出氰渣中的氧化铁,从浸铁渣中用常规氰化浸出金、银等贵金属进行了研究.
104, 这个脱羧作用是由谷氨酸脱羧酶 催化 的.
105, 以磷钨酸作为 催化 剂,合成了异丁酸丁酯。
106, 一种辛醇加氢精制 催化 剂,属于加氢精制催化材料领域。
107, 如延胡羧酸酶能 催化 苹果酸和反丁烯二酸的可逆反应.
108, 利用正交试验研究了酯交换法制备卤虾油脂肪酸乙酯的工艺,分析了 催化 剂用量、反应温度、反应时间、无水乙醇用量等对醇解率的影响。
109, 研究了以对羟基苯甲酸、乙醇为原料、对甲苯磺酸铜为 催化 剂、合成对羟基苯甲酸乙酯,并讨论了催化酯化的影响因素。
109, 造 句 网是一部在线造句词典,其宗旨是让大家更快地造出更优秀的句子.
110, 论文还探索性地研究了在该 催化 体系下取代二茂铁的重氮芳基化,对合成取代二茂铁类芳基化产物具有一定的指导作用。
111, 糠醛树脂化结焦是导致 催化 剂失活的主要原因.
112, 提出一种新的 催化 裂化主分馏塔建模方法.
113, 以自制三羟甲基己烷为原料,采用自制的负载磷钨酸 催化 剂催化合成一系列三羟甲基己烷脂肪酸酯。
114, 市场应该很好的,只要芽苗菜是天然的,没有经过什么化学物质 催化 。
115, 用制备的复合粉体对大红染料的稀释溶液进行脱色检验其光 催化 性能。并用XRD、TEM对粉体进行表征。
116, 本文对燕化研究院YS系列银 催化 剂的经营业务拓展进行了研究。
117, 结合吉化炼油厂的实际情况,科学、合理地设计了 催化 装置的“火炬”气回收系统的工艺流程。
118, 采用回流法制备了磷钨钼酸掺杂聚苯胺 催化 剂。
119, 该基因的编码部分由507个核苷酸组成,编码168个氨基酸残基的蛋白多肽,其中含有酪氨酸蛋白磷酸酶酯 催化 部位的“HC”基序。
120, 研究了电 催化 三氯化铁浸出硫化锌精矿工艺.
样品于测定前一般说来,放射免疫测定法由于具有较高的灵敏度和选择性,因此当初步除去主要干扰物质之后即可直接测定微量样品;而对灵敏度和专属性较差的紫外分光光度法,分离要求就要相应高一些;至于常用的高效液相色谱法,为防止蛋白质等杂质沉积在色谱柱上,上柱前需对生物样品进行去蛋白,有时对被测组分进行提取、制备衍生物等前处理。
样品处理步骤与分析方法的选择—(一)去除蛋白质
在测定血样时,首先应去除蛋白质。去除蛋白质可使结合型的药物均出来,以便测定药物的总浓度;去除蛋白质也可预防提取过程中蛋白质发泡,减少乳化的形成,以及可以保护仪器性能(如保护HPLC柱不被沾污),延长使用期限。去除蛋白法有以下几种。
1.加入与水相混溶的有机溶剂加入水溶性的有机溶剂;可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚,使与蛋白质结合的药物释放出来。
2.加入中性盐加入中性盐,使溶液的离子强度发生变化。中性盐能将与蛋白质水合的水置换出来,从而使蛋白质脱水而沉淀。
3.加入强酸当pH低于蛋白质的等电点时,蛋白质以阳离子形式存在。此时加入强酸,可与蛋白质阳离子形成不溶住盐而沉淀。
5.酶解法在测定一些酸不稳定及蛋白结合牢的药物时,常需用酶解法。最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。它不仅可使组织酶,并可使药物析出。
酶解法的优点是:可避兔某些药物在酸及高温下降解:对与蛋白质结合牢的药物(如保泰松、苯妥英纳),可显著改善回收率;可用有机溶剂直接提取酶解液而无乳化现象生成,当采用HPLC法检测时,无需再进行过多的净化操作。酶解法的主要问题是不适用于在碱性下易水解的药物。
(二)缀合物的水解
尿中药物多数呈缀合状态。由于缀合物较原型药物具有较大的极性,不易被有机溶剂提取。有些药物仅需较温和条件即可使药物游离,有些则需较剧烈的方法,常用酸水解或酶水解的方法。
(三)分离、纯化与浓集
对于大多数药物而言,生物样品的分析通常由两步组成:样品的前处理(分离、纯化、浓集)和对最终提取物的仪器分析。
提取法是应用最多的分离、纯化方法。提取的目的是为了从大量共存物中分离出所需要的微量组分----药物及其代谢物,并通过溶剂的蒸发使样品得到浓集。提取法包括液-液提取法和液-固提取法。
1.液-液提取法(liquid-liquidextraction,LLE)
多数药物是亲脂性的,在适当的溶剂中的溶解度大于水相中的溶解度,而血样或尿样中含有的大多数内源性杂质是强极性的水溶性物质。因而用有机溶剂提取一次即可除去大部分杂质,从大量的样品中提取药物经浓集后作为分析用样品。
2.液-固提取法(liquid-solidextration,LES)
液-固提取法是近十几年来在纯化生物样品时被广泛采用的方法。也可以认为是规模缩小的柱色谱法。这种方法是应用液相色谱法原理处理样品。将具有吸附、分配及离子交换性质的、表面积大的担体作为萃取剂填入小柱,以溶剂淋洗后,将生物样品通过,使其药物或杂质保留在担体上,用适当溶剂洗去杂质,再用适当溶剂将药物洗脱下来。
(四)化学衍生化
分离前将药物进行化学衍生化的目的是:(1)使药物变成具有能被分离的性质;(2)提高检测灵敏度;(3)增强药物的稳定性;(4)提高对光学异构体分离的能力等。
药物分子中含有活泼H者均可被化学衍生化,如含有-COOH、-OH、NH2、、-NH-、-SH等官能团的药物都可被衍生化。
化学衍生化对GC和HPLC尤为重要。
1.GC中化学衍生化法药物的化学衍生化前处理对GC十分必要,衍生化可使药物分子中的极性基团,如羟基、氨基、羧基等变成无极性的、易于挥发的药物,从而使GC的温度不必很高即可适合GC的分析要求。主要的衍生化反应有烷基化(alkylations)、酰化(acrylations)、硅烷化(silylations)等。其中已硅烷化用得最广泛。
常用的烷基化试剂有碘甲烷(CHI)、叠氮甲烷(CHN2)、氢氧化三甲基苯胺(TMAH)等;常用得酰化试剂有:乙酸酐、丙酸酐等;硅烷化试剂有:三甲基氯硅烷(TMCS)、双-三甲基硅烷乙酰胺(BSA)、双-三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)、三甲基硅烷咪唑(IMTS)等。
具有光学异构体的药物,由于R(-)与S(+)构型不同,使之具有不同的药效和药动学特性,因此,异构体的分离也是十分重要的。分离光学异构体的方法之一,就是采用不对称试剂,使其生成非对映异构体衍生物,然后用GC法或HPLC法进行分析测定。常用的称试剂有:(S)-N-三氟乙酰脯胺酰氯、(S)-N-五氟乙酰脯胺酰氯等。 #\?xJxT\?
2.HPLC中化学衍生化法当采用HPLC法时,其衍生化的目的是为了提高药物的检测灵敏度。一些在紫外、可见光区没有吸收或者摩尔吸收系数小的药物,可以使其与衍生成对可见-紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等具有高灵敏度的衍生物。
化学衍生化包括柱前衍生化和柱后衍生化两种方法。由于柱前衍生化法是在分离前使药物与衍生化试剂反应,故与药物具有相同官能团的杂质也会同样生成衍生,这样就有可能妨碍药物的检测。同时,如果杂质含量多时,药物与衍生化试剂的反应率降低,因此,应尽可能将药物进行精制后再衍生化。柱后衍生化是药物经色谱柱分离之后进行的,所以可形成对检测器具有高灵敏度的衍生物,从而提高了选择性。HPLC常用的衍生化试剂有邻苯二醛、丹酰氯、荧胺等。
在测定生物样品中药物及其代谢物时,样品的前处理是十分重要的。除了少数情况,将体液经简单处理后进行直接测定外,一般要在测定之前进行样品的前处理,即进行分离、纯化、浓集,必要时还需对待测组分进行化学衍生化,从而为测定创造良好的条件。生物样品进行前处理的目的在于:①药物进入体内后,经吸收、分布、代谢,然后排出体外。在体液、组织和排泄物中除了游离型(原型)药物之外,还有药物的代谢物、药物与蛋白质形成的结合物、以及药物或其代谢物与内源性物质,如葡萄糖醛酸、硫酸形成的葡萄糖醛酸甙(gl uronides)、硫酸酯(sulphates)缀合物等多种形式存在,需要分离后测定药物及代谢物;②生物样品的介质组成比较复杂。如在血清中既含有高分子的蛋白质和低分子的糖、脂肪、尿素等有机化合物,也含有Na+、K+、X-等无机化合物]。其中影响最大的是蛋白质,若用HPLC法测定药物浓度时,蛋白质会沉积在色谱柱上发生堵塞,严重影响分离效果。因此,为了保护仪器,提高测定的灵敏度,必须进行除蛋白等前处理。
一、常用样品的种类、采集和贮藏
生物样品包括各种体液和组织,但实际上最常用的是比较容易得到的血液(血浆、血清、金血)、尿液、唾液。在一些特定的情况下选用乳汁、脊髓液、精液等。下面仅介绍常用的血样、尿样及唾液。
(一)血样 G\(9M^6@y!
血浆(plasma)和血清(serum)是最常用的生物样品。测定血中药物浓度通常是指测定血浆或血清中的药物浓度,而不是指含有血细胞的全血中的药物浓度。一般认为,当药物在体内达到稳定状态时,血浆中药物浓度与药物在作用点的浓度紧密相关,即血浆中的药物浓度反映了药物在体内(靶器官)的状况,因而血浆浓度可作为作用部位药物浓度的可靠指标。
供测定的血样应能代表整个血药浓度,因而应待药物在血液中分布均匀后取样。动物实验时,可直接从动脉或心脏取血。对于病人,通常采取静脉血,有时根据血药浓度和分析方法灵敏度,也可用毛细管采血。由采集的血液制取血浆或血清。
血浆的制备 将采取的血液置含有抗凝剂(如:肝萦、草酸盐、拘橡酸盐、EDTA、氟化钠等)的试管中,混合后,以2500~3000rpm离心5min使与血细胞分离,分取上清液即为血浆。
血清的制备 将采取的血样在室温下至少放置30min到1h,待凝结出血饼后,用细竹捧或玻璃棒轻轻地剥去血饼,然后以2000~3000rpm离心分离5~10min,分取上清液.即为血清。
血浆比血清分离快,而且制取的量多,其量约为全血的一半。但由于所用抗凝剂的种类不同,用血浆测定药物浓度有时不一致;血清的获取量小,但血清成分更接近于组织液的化学成分,测定血清中有关物质的含量,比全血更能反映机体的具体情况;同时,药物与纤维蛋白几乎不结合,因此,血浆及血清中的药物浓度测定值通常是相同的。基于上述原因,现在国外多采用“专用血清”来测定药物的浓度。
对大多数药物来说,血浆浓度与红细胞中的浓度成正比,所以测定全血也不能提供更多的数据,而全血的净化较血浆和血清更为麻烦,尤其是溶血后,血色素会给测定带来干扰。但在个别情况下也有采用全血测定药物浓度的。例如氯噻酮可与红细胞结合,其动力学行为与在血浆中不同,在血细胞的药物浓度比血浆药物浓度大50~100倍;又如一些三环降压药物,对个别患者来说,在血浆和红细胞的分配比率不是一个常数,因此宜采用全血进行测定。
全血(Whole blood)也应加入抗凝剂混合,防止凝血后影响测定。血样的采取量受到一定限制,特别是间隔比较短的多次取样,患者不易配合。过去一般取1~2ml。随着高灵敏度测定方法的建立,取量可减少到1ml以下。采取静脉血时,目前通行的方法是用注射器直接从静脉抽取,然后置试管中:采取毛细管取血时,应用毛细管或特殊的微量采血管采取。采取血样时,应由从事医疗工作的医生、护士或者临床检查技师实施,药剂师等不能进行采血工作。
血样的采血时间间隔应随测定目的的不同而异。例如:进行药物动力学参数的测定时,需给出药物在体内的药物浓度.时间曲线。应根据动力学曲线模型〈单室还是双室)、给药方式来确定取样间隔和次数,主要应在曲线首尾及峰值附近或浓度变化较大处取祥。采样次数示意图见
如进行治疗药物浓度监测(therapeuticdrug monitoring,TDM)时,则应在血中药物浓度达到稳态后才有意义。但每种药物的半衰期不同,因此达到稳态的时间也不间,取样时间也随之不同。药物进入体内后,大多数很快与血浆中的蛋白质(白蛋白、球蛋白)结合成结合型,并与未结合的游离型药物处于平衡状态而存在。结合型药物(bound型)不能通过血管壁,而游离型药物(free型)能够到达药物作用部位,因此可以说药物疗效与游离型药物浓度有着比较密切的关系,当然最理想的是测定游离型药物。由于测定游离型药物必须经过“超速离心”或“超滤法”等复杂的分离操作,又因药物的蛋白结合率没有很大的个体差异,通常血药总浓度(结合型与游离的总和)可以有效表示游离药物的浓度,因此,大多数的检验室不测定游离型药物,而是测定药物的总浓度。
但某些疾病可改变药物与血浆蛋白的结合率,如肝硬化病人奎尼丁的游离型药物分数几乎增加三倍;肾病时,苯妥英、水杨酸、安妥明等的血浆蛋白结合卒明显下降。有些药物血浆蛋白结合率存在着很大的个体差异,如奎尼丁的血浆蛋白结合率的范围为50%~90%,不同个体问游离药物浓度差达10倍。也就是说在肝硬化、肾功能不全、肾病变、低营养等状态下,血中白蛋白浓度显著减少,药物的蛋白结合率下降,游离型药物浓度上升,此时应测定游离型药物浓度。
采取血样后,应及时分离血浆或血清,并最好立即进行分析。如不能立即测定时,应妥善储存。血浆或血清样品不经蒸发、浓缩,必须置硬质玻璃试管中完全密塞后保存。短期保存时置冰箱(4℃)中,长期保存时要在冷冻橱(库)(-20℃)中冷冻保存。
要注意采血后及时分离出血浆或血清再进行储存。若不预先分离,血凝后冰冻保存,则因冰冻有时引起细胞溶解从而妨碍血浆或血清的分离或因溶血影响药物浓度变化。
(二)唾液
唾液由腮腺、颌下腺、舌下腺和口腔粘膜内许多散在的小腺体分泌液混合组成的,平时所说的唾液就是指此混合液。一般成人每天分泌1~1.5ml,但个体差异大,即使是同-个人每日之内、每日之间也有变动;各腺体分泌的唾液组成也会有很大差别。对口腔粘膜给予机械的或化学的剌激时,会影响各唾液腺的分泌;视觉、听觉、嗅觉等剌激所产生的条件反射以及思维、情绪也会影响唾液腺的分泌;随年龄不同,唾液的分泌量也不同:小儿的唾液分泌量多,老年人的分泌量减少。
唾液的相对密度为1.003~1.008;pH值在6.2~7.6之间变动,分泌量增加时趋向碱性而接近血液的pH值;通常得到的唾液含有粘蛋白,其粘度是水的1.9倍。
唾液的采集应尽可能在剌激少的安静状态下进行。一般在漱口后15min收集。分泌量多的,可以将自然贮存于口腔内的唾液吐入试管中,1min内约可取1ml的唾液。必要时也可转动舌尖,以促进唾液的分泌。采集的时间至少要10min。采集后立即测量其除去泡沫部分的体积。放置后分为泡沫部分、透明部分及灰乳白色沉淀部分三层。分层后,以3000rpm离心分离10min,取上清液作为药物浓度测定的样品。也可以采用物理的(如嚼石蜡块、橡胶、海绵)或化学的(如酒石酸)等方法剌激,使在短时间内得到大量的唾液。但另一方面,这样做往往使唾液中的药物浓度受到影响。特殊需要时,可以采集腮腺、颌下腺及舌下腺分泌的单一唾液。这种单一唾液的采集必须采用特殊的唾液采集器来收集。 ~6["b\}iY\
唾液中含有粘蛋白,唾液的粘度由粘蛋白的含量多少而定。粘蛋白是在唾液分泌后,受唾液中酶催化而生成的。为阻止粘蛋白的生成,应将唾液在4℃以下保存。如果分析时没有影响,则可用碱处理唾液,使粘蛋白溶解而降低粘度。唾液在保存过程中,会放出二氧化碳而使pH值升高,因此,需要测定唾液的pH值时,应在取样的当时为好。冷藏保存唾液时,解冻后有必要将容器内唾液充分搅匀后再用,不然测定结果会产生误差。
用唾液作为样品测定药物浓度有几个优点:与采取血样不同,患者自己可以不受时间和地点的限制,很容易地反复采集;采集时无痛苦无危险;有些唾液中药物浓度可以反映血浆中游离型药物浓度。但另一方面,由于唾液是由腮腺、颌下腺及舌下腺等各腺体分泌的组成不同的混合液体,其组成也会发生经时变动;因此,唾液中的药物浓度与血浆中的游离型药物浓度相比就容易变动;而且唾液中药物浓度与血浆中药物浓度的比值〈S/P)只有少数药物是恒定值;有些与蛋白结合率较高的药物,药物在唾液中的浓度比血浆浓度低得多,需要高灵敏度的分析方法才能检测;对有些患者(如癫痫、昏迷)不能采集唾液样品。最后应该指出的是:目前所指的血浆或血清浓度的治疗范围,都是指血浆或血清中的总浓度(游离型和结合型),因此,只有知道唾液中药物浓度与血浆中药物浓度有-定的比值时,唾液中药物浓度的监测才有意义,并且应该先求出具体患者的比值(S/P)。
(三)尿液
采用尿样测定药物浓度的目的与血液、唾液样品不同。尿药测定主要用于药物剂量回收研究、尿清除率、生物利用度的研究,并可推断患者是否违反医嘱用药,同时根据药物剂量回收研究可以预测药物的代谢过程及测定药物的代谢类型(代谢速率,MR)等。
体内药物清除主要是通过尿液排出,药物可以原型(母体药物)或代谢物及其缀合物(conjugete)等形式排出。尿液中药物浓度较高,收集量可以很大,收集也方便。但尿液浓度通常变化很大。尿液主要成分是水、含氮化合物(其中大部分是尿素)及盐类。
健康人排出的尿液是淡黄色或黄褐色的,成人一日排尿量为1~5L,尿液相对密度1.015~1.020,pH值在4.8~8.0之间。放置后会析出盐类,并有细菌繁殖、固体成分的崩解,因而使尿液变混浊。由于这些原因,必须加入防腐剂保存。采集的尿是自然排尿。尿包括随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿及时间尿几种。测定尿中药物浓度时应采用时间尿,时间尿以外的尿不可能推断全尿中药物的排泄浓度和药物总量。因此,测定尿中药物的总量时,将一定时间内(如8h、12h或24h等)排泄的尿液全部储在起来,并记录其体积,取其一部分测定药物浓度,然后乘以尿量求得排泄总量。如采集24h的尿液时,一般在上午8点让患者排尿并弃去不要,之后排出的尿液全部储存于干净的容器,中,直到次日上午8点再让患者排尿,并加入容器中。将此容器中盛的尿液做为检液。采集24h尿液时,常用2L容量的带盖的广口玻璃瓶,其体和可能会有士100ml的误差,因此,需再用量筒准确地测量储尿量。采集一定时间内的时间尿液时,常用涂蜡的一次性纸杯或用玻璃杯,并用量筒准确量好体积放入储尿瓶,并做好记录。
尿液中药物浓度的改变不能直接反映血药浓度,即P与血药浓度相关性差;受二试者的肾功能正常与否直接影响药物排泄,因而肾功能不良者不宜采用尿样;婴儿的排尿时间难于掌握;尿液不易采集完全并不易保存。这些是尿样的缺点。
采集的尿样应立即测定。若收集24h的尿液不能立即测定时,应加入防腐剂置冰箱中保存。常用防腐剂有:甲苯、二甲苯、氯仿、麝香草酚以及醋酸、浓盐酸等。利用甲苯等可以在尿液的表面形成薄膜,醋酸等可以改变尿液的酸碱性来抑制细菌的生长。保存时间为24~36h,可置冰箱(4℃)中,长时间保存时,应冰冻(-20℃)。
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