针对高效液相色谱仪，在做含有缓冲液的流动相时，一般要冲多久的柱子？
冲柱时间的长短，要看你的色谱柱。
柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行，需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验，通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。
反相色谱柱，比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水（或乙腈水）来过渡半小时，然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结束后用10%的甲醇水（或乙腈水）过渡半小时，然后用纯甲醇（或纯乙腈）保存色谱柱半小时。
这样做的主要原因是，流动相中的缓冲盐不可以直接遭遇纯有机相。因为溶解度等原因，可能会出现盐析现象。所以会用甲醇水做过渡。
你在冲流动相的时候可以观察基线，平衡后就可以进样分析。但是冲洗色谱柱的时候和基线没有关系。冲洗色谱柱主要是洗去色谱柱中残留的流动相和样品，避免他们对固定相，也就是你色谱柱的填料产生影响。
可以。
冲柱子千万要注意不用二氯甲烷，含氯的溶剂的比重大，容易破坏柱子里的结构，只能短时间冲，一二十分钟都可以。
还有能用甲醇就不要用乙腈冲，因为纯乙腈冲新柱子还可以，如果是根老柱子，时间长了，纯乙腈容易对管道有溶解作用，造成柱压不稳。
第二、作为普通C18柱，尤其是硅胶基质的普通C18柱，对酸碱盐以及水，都是造成柱子的损坏的流动相构成。水不能过多（除了带AQ的纯水柱，一般各家品牌都有这款防水柱）我个人认为只要超过80%的水的流动相，都会造成C18的寿命缩短。所以做高水相的流动相分析时请注意选合适的柱子。酸对柱子的损伤是不可逆的，一定要控制PH，我个人认为PH在2以下的都要做好费柱子的准备。碱性条件是对于硅胶基质的C18的弱项，一般的硅胶基质的C18碱性条件都不太耐用，但现在也有碱性PH11的柱子，但比较贵。盐对色谱柱的影响主要是盐析造成的，而且是致命。
第三冲洗方法的问题。冲洗方法根据使用的流动相和样品的不同冲洗方法要加以区分。一般不加酸碱盐，水相也不高的情况（如甲醇水60:40），无需太过冲洗，冲洗的目的就是为了把样品的杂质冲出即可。保存流动相保存即可。酸和碱的条件下，原则上是将酸碱冲出色谱柱，保存在甲醇水即可（如60:40比例可根据要使用的流动相，只要水相不高即可）。盐的条件比较麻烦，处理不好，不仅仅色谱柱出问题而且仪器也比较麻烦。常用的就是高水相流动相甲醇-水（10：90）将盐冲出（注意压力），然后用纯甲醇冲洗（这一步是恢复高水相对色谱柱的损伤），最后保存在一般的甲醇水体系即可。
第四点，冲洗的时候注意是压力，最好是从小流速开始慢慢提升流速到压力许可的范围。冲洗的时间，准确的是流量一般色谱柱的冲洗都要达到10-20倍的柱体积。
要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇 乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。
尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中，避免在缓冲溶液中保存。
(2)先用90%的甲醇-再用纯甲醇-二氯甲烷。每个都要冲够20--30的体积。然后再相反依次冲
不行的话用40%的异丙醇冲,不过异丙醇用100%的可能压力太大,因为它的粘度太大
这和安捷伦还是岛津的仪器没关系。一般的色谱仪管路都是耐有机相的，不然跑正相色谱的时候仪器还不得溶解了？
