如何获得能降解苯酚的微生物,简述筛选步骤
苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。下列相关叙述错误的是
A.图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源
B.如果要测定②中活细菌数量,常采用稀释涂布平板法
C.若图中④为对照实验,则其中应以苯酚作为唯一碳源
D.使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落
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答案
C
解析
试题分析: 培养能降解苯酚的微生物,培养基中应以苯酚作为唯一碳源,A正确。稀释涂布平板法可用来测定活细菌数量,B正确。对照实验④应用正常的培养基进行对照,C错误。平板划线法可在培养基表面形成单个菌落,D正确。
考点: 本题考查微生物培养相关知识,考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力及从图形中提取信息的能力。
(1)选择分解苯酚的菌的培养基是以苯酚为唯一碳源的培养基;苯酚是唯一的碳源,当苯酚消耗尽时,菌株因缺少碳源而不能继续繁殖,所以②中不同浓度的碳源A影响细菌数量;一般采用稀释涂布平板法来测定②中活菌数目.
(2)④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基没有加入苯酚作为碳源,⑤培养基的中加入苯酚作为碳源;使用释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落.采用固体平板培养细菌时要倒置培养,以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基.
(3)取5支洁净培养瓶→分别加入相同培养基加等量的苯酚,→分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种→在相同的适宜条件下培养相同时间→再检测这5支瓶内培养基的苯酚的含量,从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小.
(4)从制备培养基到接种与培养等全部实验过程要无菌操作:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵:a.实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒;
b.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌;
c.为避免周围环境中微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行;
d.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触.
故答案为:
(1)苯酚 A 平板菌落计数(活菌计数或菌落计数)
(2)④含除苯酚外的其他碳源,⑤以苯酚为唯一碳源 平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离) 避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株,一定时间后,测定培养液中苯酚含量
(4)培养基灭菌,接种环境灭菌,接种过程无菌操作
(2)培养基中必须添加的微生物的营养物质有5类,分别是水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子,故选AD.
(3)该实验中苯酚作为细菌培养唯一的碳源,步骤③和④中的培养基最主要的成分差异是后者添加了琼脂,培养基需用高压蒸汽灭菌,其具体要求是121℃,1.05kg/cm2,15~30分钟.
(4)利用平板划线法接种时,由图可知,划线顺序应为甲→乙→丙,最终可以得到由一个细胞繁殖而来的单个菌落.
(5)步骤④的目的是分离纯化菌种,经过步骤⑤培养后,应该从残余苯酚浓度最低的培养瓶中再分离、再培养目的菌株.
故答案为:(1)高压灭菌锅、超净工作台、接种环(针)
(2)A、D
(3)碳源 琼脂 121℃,1.05kg/cm2,15~30分钟
(4)甲→乙→丙 单个菌落
(5)分离纯化 最低
实验二 交通干线附近空气中NO和NO的含量日变化规律
实验三 环境空气中烯烃与臭氧的反应
实验四 环境空气中SO液相氧化模拟
实验五 气体温室效应的测定与评估
实验六 天然水的主要离子组成
实验七 湖泊富营养化程度的评价
实验八 有机物的正辛醇-水分配系数
实验九 水中有机物挥发速率的测定
实验十 底泥对苯胺和硝基苯的吸附
实验十一 苯酚的光降解与光催化降解速率测定
实验十二 邻苯二甲酸二丁酯的微生物降解
实验十三 甲萘威在水环境中的水解
实验十四 水体中悬浮颗粒物和表层沉积物对重金属的富集、、
实验十五 工业废水与生活污水的OD与OD的相关性
实验十六 河流沉积物中汞的存在形态分析
实验十七 土壤中铅和铜的形态分析
实验十八 土壤中的有机氯农药残留
实验十九 铜在不同土壤-溶液体系中的分配
实验二十 土壤-粮食体系中的重金属
实验二十一 活性炭吸附法处理废水
实验二十二 Fenton氧化法处理模拟有机废水
生物分解法含苯酚废水处理工艺
用微生物将含苯酚废水中的有机物进行氧化、分解。好氧处理是在含苯酚废水中含有充分溶解氧的条件下,利用好氧性微生物使含苯酚废水中的有机物分解成二氧化碳、氨及水等。 厌氧处理是在含苯酚废水中缺氧的条件下,利用厌氧性微生物使含苯酚废水中的有机物分解成甲烷、二氧化碳、硫化氢、氮及水等。
萃取法含苯酚废水处理工艺
将不溶于水的溶剂投入废水中,以溶解废水中的溶质,利用溶质与水的密度差,将溶剂分离。
除上述含苯酚废水处理工艺外还可采用氧化法、过滤、膜处理等多种工艺进行处理,具体根据实际情况而定。
二,培养的过程中改造微生物,用物理、化学、生物的各种方法改变微生物的基因!使它能够利用苯酚!
一二两步循环进行!
不过苯酚是有毒的化学物质!会抑制微生物的生长!另外苯酚很难被分解!试验很困难!基本上是失败的!