dna提取实验中70%乙醇的作用
在质粒DNA的制备中,无水乙醇起到沉淀DNA继而达到浓缩DNA的目的,70%的乙醇是用来洗涤DNA的,进一步去除杂质。
在除去蛋白质沉淀后,要加入无水乙醇使质粒沉淀,离心除去上清,再加入70%乙醇清洗DNA沉淀,清洗两次左右。最后要把DNA沉淀溶于TE或ddH2O中。
扩展资料:
1、 测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。
参考资料来源:百度百科-质粒DNA纯化
其它浓度也行 但是有问题 首先要明白70%乙醇的目的 一是去除残留的有机溶剂如 异丙醇 另一方面是去除盐离子
假如用其它浓度 如用80% 它可以很好的溶解有机溶剂 但是对盐离子溶解能力差
如果用50% 它可以很好的溶解盐离子 但是对与有机溶剂可能就差一些 再者你的浓度越低 越容易溶解DNA 在后面离心去上清过程中就会损失越多的DNA
70%就是一个很好的溶解盐离子 有机溶剂 但是DNA又形成沉淀的浓度
用70%乙醇洗涤DNA,在70%乙醇中用枪头吧沉淀的dna轻轻挑起,离心管轻轻颠倒几次,离心。
因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶。 沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素。
dna漂洗注意事项
1、琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用。
2、凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶解的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡,以免影响电泳结果。
3、电泳缓冲液:为保持电泳所需的离子强度和pH,应常更新电泳缓冲液。
乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐