样品测定时加三氯乙酸的目的是什么

油脂受到光、热、空气中氧的作用，发生酸败反应，分解出醛、酸之类的化合物。丙二醛就是分解产物的一种，它能与TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉红色化合物，在532nm波长处有吸收高峰，利用此性质即能测出丙二醛含量，从而推导出油脂酸败的程度。

要检测乳与乳制品中的三聚氰胺最准的方法是先用红外光谱仪（振动光谱）对样品中含有的三聚氢胺的结构进行定性检测后（这种检测是非常规检测，只在极少数情况下采用），再利用普通显微镜对形态进行观察，这样就可以准确判定其是否含有三聚氰胺。显微镜法检测三聚氰胺的步骤有以下几步：第一步是从收购的牛奶底部取样；第二步是把样品用离心机离心3min；第三步是留下离心后的最后一部分（0.1ml）；第四步用吸管把收取的样品移入到载波片了；第五步是将载波片放到显微镜下用目镜16倍×物镜10倍观测，这样就可以定性检测出被检样品是否含有三聚氰胺（最小观测值0.2mg/100ml）。

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微生物

总大肠菌群（MPN/100mL或CFU/100mL） 不得检出

耐热大肠菌群（MPN/100mL或CFU/100mL） 不得检出

大肠埃希氏菌（MPN/100mL或CFU/100mL） 不得检出

菌落总数（CFU/mL） 100

毒理指标

砷（mg/L） 0.01

镉（mg/L） 0.005

铬（六价，mg/L） 0.05

铅（mg/L） 0.01

汞（mg/L） 0.001

硒（mg/L） 0.01

氰化物（mg/L） 0.05

氟化物（mg/L） 1.0

硝酸盐（以N计，mg/L） 10

地下水源限制时为20

三氯甲烷（mg/L） 0.06

四氯化碳（mg/L） 0.002

溴酸盐（使用臭氧时，mg/L） 0.01

甲醛（使用臭氧时，mg/L） 0.9

亚氯酸盐（使用二氧化氯消毒时，mg/L） 0.7

氯酸盐（使用复合二氧化氯消毒时，mg/L） 0.7

化学指标

色度（铂钴色度单位） 15

浑浊度（NTU-散射浊度单位） 1

水源与净水技术条件限制时为3

臭和味无异臭、异味

肉眼可见物 无

pH （pH单位） 不小于6.5且不大于8.5

铝（mg/L） 0.2

铁（mg/L） 0.3

锰（mg/L） 0.1

铜（mg/L） 1.0

锌（mg/L） 1.0

氯化物（mg/L） 250

硫酸盐（mg/L） 250

溶解性总固体（mg/L） 1000

总硬度(以CaCO3计，mg/L） 450

耗氧量（CODMn法，以O2计，mg/L） 3

水源限制，原水耗氧量>6mg/L时为5

挥发酚类（以苯酚计，mg/L） 0.002

阴离子合成洗涤剂（mg/L） 0.3

放射性

总α放射性（Bq/L） 0.5

总β放射性（Bq/L） 1

①　MPN表示最可能数；CFU表示菌落形成单位。当水样检出总大肠菌群时，应进一步检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群；水样未检出总大肠菌群，不必检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。

②　放射性指标超过指导值，应进行核素分析和评价， [3]  判定能否饮用。

表2 饮用水中消毒剂常规指标及要求

消毒剂名称 与水接触时间 出厂水

中限值 出厂水

中余量 管网末梢水中余量

氯气及游离氯制剂（游离氯,mg/L） 至少30min 4 ≥0.3 ≥0.05

一氯胺（总氯，mg/L） 至少120min 3 ≥0.5 ≥0.05

臭氧（O3，mg/L） 至少12min 0.3 0.02

如加氯，

总氯≥0.05

二氧化氯（ClO2，mg/L） 至少30min 0.8 ≥0.1 ≥0.02

非常规

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指 标 限 值

微生物

贾第鞭毛虫（个/10L） <1

隐孢子虫（个/10L） <1

毒理指标

锑（mg/L） 0.005

钡（mg/L） 0.7

铍（mg/L） 0.002

硼（mg/L） 0.5

钼（mg/L） 0.07

镍（mg/L） 0.02

银（mg/L） 0.05

铊（mg/L） 0.0001

氯化氰（以CN-计，mg/L） 0.07

一氯二溴甲烷（mg/L） 0.1

二氯一溴甲烷（mg/L） 0.06

二氯乙酸（mg/L） 0.05

1,2-二氯乙烷（mg/L） 0.03

二氯甲烷（mg/L） 0.02

三卤甲烷（三氯甲烷、一氯二溴甲烷、二氯一溴甲烷、三溴甲烷的总和） 该类化合物中各种化合物的实测浓度与其各自限值的比值之和不超过1

1,1,1-三氯乙烷（mg/L） 2

三氯乙酸（mg/L） 0.1

三氯乙醛（mg/L） 0.01

2,4,6-三氯酚（mg/L） 0.2

三溴甲烷（mg/L） 0.1

七氯（mg/L） 0.0004

马拉硫磷（mg/L） 0.25

五氯酚（mg/L） 0.009

六六六（总量，mg/L） 0.005

六氯苯（mg/L） 0.001

乐果（mg/L） 0.08

对硫磷（mg/L） 0.003

灭草松（mg/L） 0.3

甲基对硫磷（mg/L） 0.02

百菌清（mg/L） 0.01

呋喃丹（mg/L） 0.007

林丹（mg/L） 0.002

毒死蜱（mg/L） 0.03

草甘膦（mg/L） 0.7

敌敌畏（mg/L） 0.001

莠去津（mg/L） 0.002

溴氰菊酯（mg/L） 0.02

2,4-滴（mg/L） 0.03

滴滴涕（mg/L） 0.001

乙苯（mg/L） 0.3

二甲苯（mg/L） 0.5

1,1-二氯乙烯（mg/L） 0.03

1,2-二氯乙烯（mg/L） 0.05

1,2-二氯苯（mg/L） 1

1,4-二氯苯（mg/L） 0.3

三氯乙烯（mg/L） 0.07

三氯苯（总量，mg/L） 0.02

六氯丁二烯（mg/L） 0.0006

丙烯酰胺（mg/L） 0.0005

四氯乙烯（mg/L） 0.04

甲苯（mg/L） 0.7

邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（mg/L） 0.008

环氧氯丙烷（mg/L） 0.0004

苯（mg/L） 0.01

苯乙烯（mg/L） 0.02

苯并(a)芘（mg/L） 0.00001

氯乙烯（mg/L） 0.005

氯苯（mg/L） 0.3

微囊藻毒素-LR（mg/L） 0.001

化学指标

氨氮（以N计，mg/L） 0.5

硫化物（mg/L） 0.02

钠（mg/L） 200

水产品中组胺用正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。组胺是水产品中游离的组氨酸在组氨酸脱羧酶作用下，发生脱羧反应而形成的一种胺类物质。脱羧酶来自一些含有组氨酸脱羧酶的微生物，如某些肠杆菌、弧菌属等，其中最重要的是摩根变形杆菌和组胺无色杆菌。当水产品受到这些细菌污染后，会产生大量组胺，从而反映出水产品受微生物污染的程度。

糖的测定方法

一般有四种方法：

1、 直接滴定法。

原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。

2、 高锰酸钾滴定法。

所用原理同直接滴定法。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响，过程较为复杂，误差大。

3、硫酸苯酚法。

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。

缺点：如果水样呈橙红色（大部分水样为黄色），会对比色法造成较大的干扰。

4、蒽酮法

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。

缺点：，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。

综合比较；采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。

（一） 直接滴定法

Ⅰ、原理

v 一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用标液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。

样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝做指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。

Ⅱ、仪器和试剂

1．仪器

酸式滴定管，可调电炉（带石棉板），250ml容量瓶。

2．试剂

1. 盐酸。

2. 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。

3. 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

4. 乙酸锌溶液：称取21.9 g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。

5. 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。

6. 葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000L。此溶液相当于1mg/ml葡萄糖（注：加盐酸的目的是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制）。

7. 果糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的果糖。

8. 乳糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的乳糖。

9. 转化糖标准溶液：准确称取1.0526g纯蔗糖，用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中加5ml盐酸（1+1），在68℃~70℃水浴中加热15min，放置至室温定容至1000ml，每ml标准溶液相当于1.0mg转化糖。

Ⅲ、实验步骤

1．样品处理

⑴ 乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约2.50～5.00g固体样品（吸取25～50ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。边摇边慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。）

⑵ 酒精性饮料：吸取100ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后，移入250ml容量瓶中，加水至刻度。

⑶ 含多量淀粉的食品：称取10.00～20.00g样品，置于250ml容量瓶中，加200ml水，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。）。冷后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。吸取200ml上清液于另一250ml容量瓶中，慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

⑷ 汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后备用。（注意：样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。）

2. 标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶中（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10 ml（甲、乙液各5 ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg）。（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。）

3. 样品溶液预测：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，出现亮黄色为终点。如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。） 当试样溶液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗试样溶液的体积控制在与标定碱性酒石酸酮溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10ml左右。当浓度过低时则采取直接加入10ml样品溶液，免去加水10ml，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10ml试样溶液中所含还原糖的量。

4. 样品溶液测定：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2 min内加热至沸，快速从滴定管中滴加比预测体积少1 ml的样品溶液，然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至终点。记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。

5. 计算

样品中还原糖的含量（以某种还原糖计）按下式计算。

X=〔A/(m×V/250×1000)〕×100

式中：X--样品中还原糖的含量(以某种还原糖计)，单位 g/100g；

A—碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于某种还原糖的质量，单位 mg；

m--样品质量，单位 g；

V--测定时平均消耗样品溶液的体积，单位 ml；

计算结果保留小数点后一位。

注意：

滴定结束，锥形瓶离开热源后，由于空气中氧的氧化，使溶液又重新变蓝，此时不应再滴定。

（二）高锰酸钾滴定法

v 原理 将样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐，用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原糖量，即可计算出样品中还原糖含量。

（三）硫酸苯酚法

Ⅰ、原理

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。

多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。

Ⅱ、试剂

1． 浓硫酸：分析纯，95.5%

2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。

3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）

4． 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。

5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。

6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。

7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。

8． 6mol/L 盐酸

Ⅲ、操作。

1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

2．样品含量测定：

①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。注意：总的溶液不要超出10毫升。（既不要超出离心管的容量）。

②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。）

③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。

④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。

Ⅳ、注意

（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。

（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。

（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。

（4）测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1——0.3之间。比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。

（四）蒽酮法

Ⅰ、实验原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖和己糖，而且可以测所有的寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应。所以，用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量。此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。

Ⅱ、试剂：

蒽酮试剂，0.20 g蒽酮溶入100 mL 95%浓硫酸中，冰箱保存；

Ⅲ、方法：

样品2.0 mL加5.0 mL蒽酮试剂，混匀，然后水浴煮沸10 min，取出冷却至室温，在620 nm处测定其吸光度，根据标准曲线计算水样中糖的浓度。（标线以葡萄糖为标样）

相对校正因子的测定需要配置定量的标准溶液.然后选择内标法或者标准曲线法,仍然需要用几个浓度不同的标准溶液.如果是标准曲线法做出校准曲线以后把你需要测定含量的氯乙酸丁酯走一次柱子,然后就可以通过曲线算出氯乙酸丁酯的浓度了.

定性方法可以用核磁共振波谱法NMR配合红外IR根据特征化学位移和特征吸收峰的位置定性分析.

肝糖原的提取和鉴定

一、实验目的

1.了解肝糖原的性质并掌握其提取的方法。

2.熟悉肝糖原的鉴定方法。

二、实验原理

糖原属于高分子糖类化合物，是动物体内糖的主要储存形式，在肝脏内储量较为丰富。糖原在体内的合成与分解代谢，对血糖浓度的调节起着重要的作用。

糖原微溶于水，无还原性，与碘作用生成红色。常用的提取肝糖原的方法是将新鲜的肝组织与石英砂共同研磨以破坏肝组织，加入三氯醋酸溶液沉淀其中的蛋白质，离心除去沉淀。上清液中的肝糖原则通过加入乙醇沉淀而得。将沉淀的糖原溶于水，取一部分加入碘观察颜色反应，另一部分经酸水解成葡萄糖后，用斑氏试剂(Benedict)检验。

三、仪器和原料

仪器

研钵、离心机、离心管、电炉、广泛试纸、滤纸、试管等。

原料

新鲜动物肝脏（猪肝）

四、试剂

1. 10%的三氯醋酸溶液

2. 5%的三氯醋酸溶液

3. 95%乙醇

4. 浓盐酸

5. 20%的NaOH 溶液

6. 碘液：碘1g、碘化钾2g 溶于500mL 蒸馏水中。

7. 配制班氏试剂：将硫酸铜17.3g 溶于100mL 温蒸馏水中；将柠檬酸钠173g 和无水碳酸钠100g 溶于700mL 温蒸馏水中，冷却；将硫酸铜溶液搅拌下缓缓加入柠檬酸和碳酸钠混合液中，最后用蒸馏水稀释至1000mL。

五、操作步骤

(一)肝糖原的提取

称取1g 左右新鲜动物肝脏至研钵中，加入少许石英砂以及1mL10%的三氯醋酸溶液，研磨至糜状再加入2mL5%的三氯醋酸继续研磨片刻，使成均匀糜浆，转入离心管中，2500r/min 离心10min。取上清液于另一离心管中，加入等体积的95%乙醇，混匀后静置片刻，使糖原呈絮状析出，再放入离心机2500r/min 离心10min。弃去上清液，将离心管倒置于滤纸上。

(二)肝糖原的鉴定

向肝糖原沉淀中加入1mL 蒸馏水，用细玻棒搅拌至溶解，得糖原溶液。

1.取小试管2支，一支加入糖原溶液10滴，另一支加入蒸馏水10滴，然后两管再各加入碘液2滴，混匀。观察管中颜色变化，并解释现象。

2.在剩余糖原溶液内加入浓盐酸3滴，放入沸水浴中加热10min，取出冷却，用20%的NaOH 溶液中和至中性(pH 试纸检测)。加入斑氏试剂2mL，再置沸水浴中加热5min，取出冷却。观察管中沉淀的生成，并解释现象。

（步骤简化：

（一）提取

1、称取肝脏约1g+10﹪三氯醋酸溶液1mL＜研磨＞→加5%三氯醋酸2mL＜研磨至肉糜烂状＞过滤（滤液收集在带刻度的离心管中）→加入等体积的95%的乙醇，混匀、静置10min→离心→弃去上清液、留沉淀，此步骤重复两次＜加蒸馏水1mL＞→搅拌溶解得到肝糖原待用

（二）鉴定

1、取试管2支 ①加入肝糖原溶液10滴 ②加蒸馏水10滴

各加1滴碘液，混匀，观察现象

2、剩余肝糖原液内+浓HCL3滴→沸水浴10min＜冷却＞→加入10﹪NaOH3~4滴至中性偏碱性→班氏试剂2ml→沸水浴5min＜冷却＞→观察现象

沉淀重量法对沉淀型式的要求是沉淀溶解度小，纯度高，便于滤洗。温度升高可以使杂质吸附量减少，从而达到较高纯度。缓慢加入氯化钡且快速搅拌，是因为要降低局部相对过饱和度，使晶核形成速度减小，从而得到较大颗粒沉淀，同时减少共沉淀中的包.

下面的结晶是三氯乙酸，估计还没有被污染。

上面估计因为密封不良，已经吸水潮解了，变成HCL及羟基酸了，你可以取上层的液体检测下酸值，推算下是否被潮解了没有，若潮解酸值变大很多。

希望能帮上你。