莫氏,塞氏,杜氏颜色反应适于鉴别哪类糖

▲促进成长；[6]

▲帮助消化，特别是碳水化合物的消化；

▲改善精神状况；维持神经组织、肌肉、心脏活动的正常；

▲减轻晕机、晕船；

▲可缓解有关牙科手术后的痛苦；

▲有助于对带状疱疹（herpes zoster）的治疗。

维生素B1是人体能量代谢，特别是糖代谢所必需的，故人体对硫胺的需要量通常与摄取的热量有关。当人体的能量主要来源于糖类时，维生素B1的需要量最大。

维生素B1还是维持心脏，神经及消化系统正常功能所必需的。当维生素B1缺乏时，按其程度，依次可出现下列反应：神经系统反应（干性脚气病），心血管系统反应（湿性脚气病）Wernicke（韦尼克氏）脑病及Korsakoff综合症（多神经炎性精神病）。

许多神经体症和症状是周围神经炎，伴有肢端感觉障碍，包括局部区域感觉过敏或感觉麻木。

心血管症状包括劳动时呼吸困难，心悸，心动过速和其他心电图不正常的情况，以及高输出量型心力衰竭。这种衰竭称为“湿性脚病”。它伴有广泛的水肿。

Wernicke综合症是维生素B1缺乏和醇中毒的另一严重后果。此病的特殊体征是眼肌麻痹，眼球震颤和共济失调，服用维生素B1后，可迅速见效。Wernicke脑病常伴有Korsakoff精神病的体征，其特点是记忆力明显减退。不能获得新知识，以及健谈症。这些常是不可逆的。（视野中出现灯丝闪烁也可能是此症状，服用维生素B1与腺苷钴胺可以治疗）

代谢过程

食物中的维生素B1有三种形式，即游离形式、硫胺素焦磷酸脂和蛋白磷酸复合物。结合形式的维生素B1在消化道裂解后被吸收。吸收的主要部位是空肠和回肠。大量饮茶会降低肠道对维生素B1的吸收；酒精中含有抗硫胺素物质；叶酸缺乏可导致维生素B1吸收障碍。维生素B1由尿排出，不能被肾小管再吸收。

该品经口服给药，在胃肠道主要是十二指肠吸收。吸收不良综合症或饮酒过多可阻止该品的吸收。肌肉注射吸收迅速。吸收后可分布于机体各组织中，也可进入乳汁，体内不贮存。血浆半衰期约为0.35小时。肝内代谢，经肾排泄。

维生素B1在肝，肾和白细胞内转变成硫胺焦磷酸脂，后者是体内丙酮酸分解所需的羧代酶的辅酶。但该品在体内不贮存，故短期缺乏即可造成患者丙酮酸在体内的蓄积，从而扰乱糖代谢。

影响和抑制维生素B1 的吸收及在肝脏内的储存，导致患者体内维生素B1 水平明显低于正常人。一般情况下，神经组织的主要能量来源于糖代谢，在维生素B1 缺乏时，由于焦磷酸硫胺素的减少，可造成糖代谢的障碍，引起神经组织的供能减少，进而产生神经组织功能和结构上的异常。此外，维生素B1 的缺乏还能够造成硫酸戊糖代谢障碍，影响磷脂类的合成，使周围和中枢神经组织出现脱髓鞘和轴索变性样改变。[7]

缺乏症

[8] 维生素B1缺乏常由于摄入不足，需要量增高和吸收利用障碍。肝损害、饮酒也可引起。长期透析的肾病者、完全胃肠外营养的病人以及长期慢性发热病人都可发生。

初期症状，有疲乏、淡漠、食欲差、恶心、忧郁、急躁、沮丧、腿麻木和心电图异常。一般分成几类：

1、干性脚气病

初期症状主要表现为烦躁不安、易激动、头痛。往后，以多发性神经炎症状为主，如下肢倦怠、无力、感觉异常（针刺样、烧灼样疼痛）、肌肉无力、肌肉酸痛（腓肠肌为主）。还会出现上升性对称性周围神经炎，表现为肢端麻术，先发生在下肢，脚趾麻木且呈袜套状分布。同时可能会伴随有消化道症状，主要表现为食欲不振、恶心、呕吐、腹痛、腹泻或者便秘、腹胀。

2、湿性脚气病

以水肿和心脏症状为主。也即缺乏维生素B1而导致了心血管系统障碍，右心室扩大，出现水肿、心悸、气促、心动过速、心前区疼痛等症状；严重者表现为心力衰竭！

3、婴儿脚气病

多发生于2~5月龄的婴儿，且多是维生素B1缺乏的母乳所喂养的婴儿，其发病突然，病情急。初期食欲不振、呕吐、兴奋、心跳快，呼吸急促和困难。严重时身体会出现青紫、心脏扩大、心力衰竭和强直性痉挛，这些症状出现后的1~2天患儿易突然死亡，抢救时间非常紧急。

患“脚气病“的婴幼儿脚部略有浮肿，用手指压迫时，即出现一个凹陷，压力解除后，此凹陷不能立即消失。

婴幼儿患脚气病人数较多，也较为常见。这是由于婴幼儿生长发育迅速，维生素B1的需要量相应增多，且婴幼儿抵抗力较差易患疾病，致使维生素B1的吸收受障碍，或消耗增

维生素b1注射液

维生素b1注射液

加，如腹泻；呕吐时可使维生素B1的吸收减少，发热或感染时，代谢旺盛，维生素B1消耗增多。另一个原因是这个年龄的小孩多以母乳喂养为主。母乳含维生素B1较低，其含量是牛奶的1/4，若母亲饮食中缺乏维生素B1，则乳汁中维生素含量也就更少。人工喂养儿以淀粉食物为主，食用愈多，维生素B1的需要量也愈多。因此，婴幼儿时期患脚气病的人较多。但大多数患儿是轻度缺乏维生素B1致病。

维生素B1的重要功能是调节体内糖代谢，保证每天摄入的主食（淀粉）及糖类在人体内转化为能量而被利用。

谷类的胚芽和外皮（糠、麦麸）含维生素B1特别丰富，是维生素B1的主要来源，其次是豆类、动物肝、瘦肉中含量也较多。

因此，小儿每天需有一定量的粗粮、豆类和瘦肉等食品摄入，才能保证体内维生素B1的需要量，防止因维生素B1缺乏引起脚气病。

维生素B1的缺乏使糖代谢发生障碍，由糖代谢所供应的能量减少，而神经和肌肉所需能量主要由糖类供应，受影响最大，可引起神经、循环等一系列临床症状。

此外，维生素B1可抑制胆碱酯酶对乙酰胆碱的水解作用。B1缺乏时，该酶活性增高，加速乙酰胆碱的水解。乙酰胆碱是传递神经冲动的重要物质，它缺乏时，可使神经传导障碍，尤其影响支配胃肠道、腺体等处的神经传导，造成胃肠蠕动缓慢、腹胀、消化腺分泌减少，使食欲减低。所以在膳食中保证供给维生素B1有增进胃口的作用。婴幼儿若喂养不当，长期以精制面粉或精白米为主食，又不及时添加辅食，或长期腹泻患有慢性消化道紊乱，都会使维生素B1的吸收减少。若在这些情况下出现食欲低下和厌食，应想到补充维生素B1。

如何治疗婴儿脚气病？

1）轻症每日口服维生素B115—30毫克，症状消失后改为1—5毫克维持。重症可用维生素B110毫克肌肉或静脉注射，每日2次。

2）出现暴发型心力衰竭时，用维生素B150—100毫克静注，3小时1次，至心衰控制后改为每日2～3次，同时治疗心衰。应注意在治疗好转时，偶尔会出现突然的充血性心衰致患儿死亡，有可能与治疗置不足或心肌严重变性有关。

3）除维生素B1治疗外，还应补充全部其他B族维生素。母乳喂养的本病患儿，母子双方均须用维生素B1治疗。

如何预防婴儿脚气病？

1）对于产米区及以米为主食者，强调食品种类多样化及平衡膳食，肉类及豆制品为维生素B1的好来源，对孕妇和乳母尤为重要。

2）婴儿应及时添加辅食。每日维生素B，推荐摄入置婴儿0.2—0.3毫克；儿童0.7—1.2毫克；孕妇和乳母1.5-1.8毫克。

3）加强粮食加工的卫生监督和指导，防止谷物加工中维生素B1的过多耗损。[9]

在一项缺乏维生素B1的实验中，纽约大学医学院的诺曼·乔利夫发现，受测者在四天之后，开始出现心脏周围疼痛，心悸、呼吸急促、便秘、不寻常的倦怠及情绪沮丧等症状，并且持续恶化。乔利夫博士以萤光镜及心电图检查受测者的心脏，发现他们的心脏胀大，并且出现心脏病的异常现象。在补充足够的维生素B1之后，这些症状在三到六天之内便消失了。

另一项类似的实验是由梅奥基金会主办，受测者的饮食中，维生素B1的含量是每一千卡路里零点二二毫克，相当于一般美国家庭的日常食物中的含量。为了确保其他营养充足，还加上畴母粉以补充维生素B，但是其中维生素B1已经因加热而被破坏。此外，还加上铁、钙、磷及鳕鱼肝油以补充维生素A及D。这样的饮食，已经优于数百万美国家庭的日常饮食。

所有受测者的性情都有所改变，脾气暴躁、容易与人发生争执、不合作、效率低落、健忘、懒散及消沉。这些情形日益严重。有时候受测者会显得极度倦怠、失眠、便秘、对噪音敏感；手部及脸部经常麻痹失去知觉，低血压、中度贫血、新陈代谢速率降低；心悸、呼吸急促；心电图显示他们的心脏异常胀大。以运动器材测量，他们的工作量逐渐降低。在运动及天气寒冷时，所有的症状都会更严重。

有时候受测者会因为过度衰竭而无法工作。腿部疼痛（神经炎）、胃酸减少甚至完全没有。在第二十一周时，他们开始剧烈头痛、恶心、呕吐，以致实验必须终止。

让受测者服用维生素B1，几个小时之后，他们变得精神愉快、活力充沛，不再有倦怠感。其他的症状则消失得较慢，胃酸的分泌在第十二天之后，心脏则在第十五天之后才恢复正常。

不是万灵丹

维生素B1是一种廉价而可以人工合成的维生素，很多食物都任意添加它美其名曰加强营养成分。许多人服用维生素B1片剂或少数几种复合的维生素B，就自以为可补充所有的营养。维生素B群的作用是相辅相成的，单独摄取任何一种或其中之数种，只会增加其他种未补充维生素B的需要量；使摄取不足的部份因为缺乏而造成身体异常，反而弄巧成拙。

充足的摄取维生素B1有助于能量的产生。但读者不可误会这句话，大量地服用维生素B1片剂以消除疲劳。曾经有读者这么做。一位劳累过度的女士，她每天服用大量的维生素B1已经持续两年。

她是一位女裁缝师，只有三十八岁，外表看起来却好像已经有五、六十岁了。她的两眼充血，而她自己则认为那是工作过于紧张劳累之故。她的上唇似乎完全消失，细小的裂缝由嘴角向下延伸，脸上的每一道皱纹都显得疲惫不堪。我真想劝她躺到床上好好休息半年。

她的头发在去年一年之间几乎掉光了，只剩下一些稀薄而散乱的白发，她的神经紧绷，时常抽搐、失眠、焦虑过度而感到沮丧，膝盖内侧长满湿疹，几乎无法坐下，也因为精疲力竭而无法久站。

在详细地地问过她许多问题之后，我终于找出真正的原因。她时常感到疲倦，并且听说维生素B1可防止疲倦，在服用初期，真的有不错的效果，当效果逐渐消失以后，她向药剂师要求剂量最高的维生素B1片剂，不久又再度失效；于是她再增加剂量至每天四片。

我很难让她相信服用维生素B1是不当的，她也不愿意放弃。我看过许多类似的例子，患者出现缺乏各种维生素B的症状，都是由于盲目服用维生素B1所引起的。但没有人像这位女士那么严重。

一知半解的知识实在是非常危险。缺乏某种维生素时，由饮食中加以补充，便能有所改善；如果摄取过量，超过所需，反而有害无益，只会造成其它各种维生素B相对缺乏，就像前述的例子一样。

天成医疗网

望采纳

一般有四种方法：

1、 直接滴定法。

原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。

2、 高锰酸钾滴定法。

所用原理同直接滴定法。缺点：水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响，过程较为复杂，误差大。

3、硫酸苯酚法。

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。

缺点：如果水样呈橙红色（大部分水样为黄色），会对比色法造成较大的干扰。

4、蒽酮法

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。

缺点：，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。

综合比较；采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。

（一） 直接滴定法

Ⅰ、原理

v 一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀很快与酒石酸钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用标液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由蓝色变为无色，即为滴定终点。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。

样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝做指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液），根据样品溶液消耗体积计算还原糖量。

Ⅱ、仪器和试剂

1．仪器

酸式滴定管，可调电炉（带石棉板），250ml容量瓶。

2．试剂

1. 盐酸。

2. 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。

3. 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

4. 乙酸锌溶液：称取21.9 g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。

5. 亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，用水溶解并稀释至100ml。

6. 葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000L。此溶液相当于1mg/ml葡萄糖（注：加盐酸的目的是防腐，标准溶液也可用饱和苯甲酸溶液配制）。

7. 果糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的果糖。

8. 乳糖标准溶液：按⑹操作，配制每毫升标准溶液相当于1mg的乳糖。

9. 转化糖标准溶液：准确称取1.0526g纯蔗糖，用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中加5ml盐酸（1+1），在68℃~70℃水浴中加热15min，放置至室温定容至1000ml，每ml标准溶液相当于1.0mg转化糖。

Ⅲ、实验步骤

1．样品处理

⑴ 乳类、乳制品及含蛋白质的食品：称取约2.50～5.00g固体样品（吸取25～50ml液体样品），置于250 ml容量瓶中，加50 ml水，摇匀。边摇边慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀。静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。（注意：乙酸锌可去除蛋白质、鞣质、树脂等，使它们形成沉淀，经过滤除去。如果钙离子过多时，易与葡萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢；从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与钙结合，形成沉淀并过滤。）

⑵ 酒精性饮料：吸取100ml样品，置于蒸发皿中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后，移入250ml容量瓶中，加水至刻度。

⑶ 含多量淀粉的食品：称取10.00～20.00g样品，置于250ml容量瓶中，加200ml水，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇（注意：此步骤是使还原糖溶于水中，切忌温度过高，因为淀粉在高温条件下可糊化、水解，影响检测结果。）。冷后加水至刻度，混匀，静置，沉淀。吸取200ml上清液于另一250ml容量瓶中，慢慢加入5ml乙酸锌溶液及5ml亚铁氢化钾溶液，加水至刻度，混匀，沉淀，静置30 min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，滤液备用。

⑷ 汽水等含有二氧化碳的饮料：吸取100ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250ml容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后备用。（注意：样品中稀释的还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液的浓度。）

2. 标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶中（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10 ml，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 ml葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液兰色刚好褪去为终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10 ml（甲、乙液各5 ml）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg）。（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。）

3. 样品溶液预测：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，控制在2 min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，出现亮黄色为终点。如果样品液颜色较深，滴定终点则为兰色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。） 当试样溶液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗试样溶液的体积控制在与标定碱性酒石酸酮溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10ml左右。当浓度过低时则采取直接加入10ml样品溶液，免去加水10ml，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10ml试样溶液中所含还原糖的量。

4. 样品溶液测定：吸取5.0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，置于150 ml锥形瓶中，加水10 ml，加入玻璃珠2粒，在2 min内加热至沸，快速从滴定管中滴加比预测体积少1 ml的样品溶液，然后趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定直至终点。记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。

5. 计算

样品中还原糖的含量（以某种还原糖计）按下式计算。

X=〔A/(m×V/250×1000)〕×100

式中：X--样品中还原糖的含量(以某种还原糖计)，单位 g/100g；

A—碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各半）相当于某种还原糖的质量，单位 mg；

m--样品质量，单位 g；

V--测定时平均消耗样品溶液的体积，单位 ml；

计算结果保留小数点后一位。

注意：

滴定结束，锥形瓶离开热源后，由于空气中氧的氧化，使溶液又重新变蓝，此时不应再滴定。

（二）高锰酸钾滴定法

v 原理 将样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐，用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，再从检索表中查出氧化亚铜量相当的还原糖量，即可计算出样品中还原糖含量。

（三）硫酸苯酚法

Ⅰ、原理

糖在浓硫酸作用下，脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。

多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。再以比色法测定。

Ⅱ、试剂

1． 浓硫酸：分析纯，95.5%

2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。

3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）

4． 标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。

5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。

6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。

7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。

8． 6mol/L 盐酸

Ⅲ、操作。

1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

2．样品含量测定：

①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。最后一次将残渣一起到入离心管。注意：总的溶液不要超出10毫升。（既不要超出离心管的容量）。

②离心，转速3000转/分钟，共三次。第一次15分钟，取上清液。后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。最后滤液保持18毫升左右。（测肝胰腺样品时，每次取上清液时应过滤。因为其脂肪含量大容易夹带残渣。）

③水浴，在向比色管中加入2毫升6mol/L 盐酸之后摇匀，在96℃水浴锅中水浴2小时。

④定容取样。水浴后，用流水冷却后加入2毫升6mol/L 氢氧化钠摇匀。定容至25毫升的容量瓶中。吸取0.2 ml的样品液，以蒸馏补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却室温放置20分钟以后于490nm测光密度。每次测定取双样对照。以标准曲线计算多糖含量。

Ⅳ、注意

（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。

（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。

（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。

（4）测定时根据光密度值确定取样的量。光密度值最好在0.1——0.3之间。比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml的样品液测定。

（四）蒽酮法

Ⅰ、实验原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖和己糖，而且可以测所有的寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应。所以，用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量。此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅。故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。

Ⅱ、试剂：

蒽酮试剂，0.20 g蒽酮溶入100 mL 95%浓硫酸中，冰箱保存；

Ⅲ、方法：

样品2.0 mL加5.0 mL蒽酮试剂，混匀，然后水浴煮沸10 min，取出冷却至室温，在620 nm处测定其吸光度，根据标准曲线计算水样中糖的浓度。（标线以葡萄糖为标样）

西列瓦诺夫反应：在硫酸或盐酸作用下，单糖经过多步脱水，分别生成糠醛或糠醛衍生物（多糖经过酸水解，也可发生此反应）。反应生成的糠醛及其衍生物可与酚类或芳胺类缩合，生成有色化合物，故常利用该性质进行糖的鉴别。由于酮糖的反应速度明显快于醛糖，故该反应常用于酮糖和醛糖的鉴别。

皮阿尔反应：在浓盐酸作用下，戊糖与5-甲基-1,3-苯二酚反应生成绿色物质，该反应是鉴别戊糖的一种方法。

狄斯克反应：脱氧核糖与二苯胺在乙酸和浓硫酸的混合液中共热，生成蓝色物质，其他糖类无此现象，故此反应可用于鉴别脱氧核糖。

综上，正确选项是B。

上一期文章《 “仙人余粮”——黄精，到底有什么神奇功效？ 》中提到，黄精中含有黄精多糖，黄精发挥药效的主要活性成分为黄精多糖，并且生活中也总是看到很多产品上打着XX多糖、XX多糖含量多少之类的字眼，这个多糖到底是什么？有什么功效呢？

这一期，我们就一起来探讨一下： 【神奇的多糖】。

什么是多糖？

糖是一大类物质。

➊单糖：由单个糖分子组成的糖类，叫单糖。

➋寡糖：一般将少于10个糖基的糖链称为寡糖。

➌多糖：多于10个糖基的糖链称为多糖。

因此，糖的家族可以概括为：单糖、寡糖和多糖。

多糖类是构成生命的四大基本物质之一，对人体生命活动的正常进行起着至关重要的作用，可作为天然的免疫调节剂。

随着分子生物学的发展，人们逐渐认识到多糖具有极其重要的生物功能。

多糖的生物活性

至今多糖已发现的生物活性有很多方面：降血糖、降血脂、增强免疫作用、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗细菌、抗辐射、抗衰老、抗凝血作用、抗过敏等。

抗肿瘤活性： 多糖抗肿瘤作用的免疫学机制研究较多，一般认为多糖提高宿主的免疫功能是其抗肿瘤作用机理之一。另外，也有学者从多糖对肿瘤细胞膜组分、磷脂酰肌醇(PI)转换、抗癌基因的影响等角度研究其抗肿瘤作用机理。

抗氧化活性： 大量研究表明，许多多糖都具有提高抗氧化酶活性、清除自由基、抑制脂质过氧化，从而保护生物膜的作用。多糖抗氧化主要是通过增强SOD，CAT，GSH－PX等抗氧化酶的活性及清除自由基，降低LOP，MDA来实现。

　 抗凝血活性： 肝素用于凝血性疾病的治疗和预防已有数十年，它主要通过增强抗凝血酶(肝素辅助因子Ⅱ，HCⅡ)的作用来抗凝血。肝素作为抗凝剂，其构效关系已经比较清楚。另外，多硫酸戊聚糖、硫酸木聚糖、糖胺聚糖肝素均是用于预防和治疗血栓的重要抗凝剂。

其他作用： 多糖除上述作用外，多糖还具有抗辐射作用，如冬虫夏草多糖可被用作辐射保护剂；人参多糖还具有抗溃疡的作用等。

多糖已经成为近些年来众多科学团队的重点研究领域，其中以中医药研究团队为主力。

根据国家973首席科学家、博士生导师秦志海教授所撰 《调节养免疫多糖与 健康 》 中介绍，多糖对于病毒有5种不同类型的作用，分别是：直接灭杀病毒、抑制病毒生物合成和增殖、阻止病毒吸附与进入细胞、直接抑制病毒、对宿主进行免疫调节。用更为通俗一些的语言来解释，多糖在“抗病毒”上主要存在作用对象的差异。

多糖近些年来受到众多研究团队的关注，其实并非偶然，更主要的是因为多糖本身具备突出的实际效果。多糖本身对 健康 领域有着重大影响，今后它的进一步发展值得我们关注和期待。 而对于普通大众来说，去了解和掌握更多多糖的作用对于自己的 健康 大有裨益。目前疫情在世界范围内尚未结束，做好防范，提高自身免疫力，是我们在当前阶段应当重点关注的 健康 生活方式。

一、原理

糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的定量测定.

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物,不但可以测定戊糖与己糖含量,而且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应）,所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量.在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用蒽酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值.但在测定水溶性碳水化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中,不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差.此外,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅,故测定糖的混合物时,常因不同糖类的比例不同造成误差,但测定单一糖类时,则可避免此种误差.

糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ,故在此波长下进行比色.

二、实验材料、试剂与仪器设备

（一）实验材料：

任何植物鲜样或干样.

（二）试剂：

1、80 ％乙醇.

2、葡萄糖标准溶液（ 100 μg/mL ）：准确称取 100 mg 分析纯无水葡萄糖,溶于蒸馏水并定容至 100 mL ,使用时再稀释 10 倍（ 100 μg/mL ）.

3、蒽酮试剂：称取 1.0 g 蒽酮,溶于 80% 浓硫酸（将 98% 浓硫酸稀释,把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中） 1000 mL 中,冷却至室温,贮于具塞棕色瓶内,冰箱保存,可使用 2 ～ 3 周.

（三） 仪器设备：

分光光度计,分析天平,离心管,离心机,恒温水浴,试管,三角瓶,移液管（ 5 、 1 、 0.5 mL ）,剪刀,瓷盘,玻棒,水浴锅,电炉,漏斗,滤纸.

三、实验步骤

1、 样品中可溶性糖的提取

称取剪碎混匀的新鲜样品0.5～1.0 g（或干样粉末5 ～100 mg ）,放入大试管中,加入15 mL 蒸馏水,在沸水浴中煮沸 20 min ,取出冷却,过滤入100 mL容量瓶中,用蒸馏水冲洗残渣数次,定容至刻度.

2、标准曲线制作

取 6 支大试管,从 0 ～ 5 分别编号,按表 24-1 加入各试剂.

表 蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量

试 剂 管 号

0 1 2 3 4 5

100 μg/mL 葡萄糖溶液（ mL ） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

蒸馏水（ mL ） 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0

蒽酮试剂（ mL ） 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0

葡萄糖量（ μg ） 0 20 40 60 80 100

将各管快速摇动混匀后,在沸水浴中煮 10 min ,取出冷却,在 620 nm 波长下,用空白调零测定光密度,以光密度为纵坐标,含葡萄糖量（ μg ）为横坐标绘制标准曲线.

3、样品测定

取待测样品提取液 1.0 mL 加蒽酮试剂 5 mL ,同以上操作显色测定光密度.重复 3 次.

四、结果计算

式中： C ——从标准曲线查得葡萄糖量, μg .

V T ——样品提取液总体积 , mL .

V 1 ——显色时取样品液量, mL .

W ——样品重（ g ）.

1、丙糖是一种含三个碳原子的单糖，是生物体内糖酸解过程的磷酸化型物质，分子量是90g/mol，包含“丙醛糖”—甘油醛，“丙酮糖”—二羟基丙酮两个化合物。

2、戊糖在生物界分布很广，在生命活动中具有重要作用。主要有D-木糖、L-阿拉伯糖、D-核糖及其衍生物D-2-脱氧核糖。作为糖代谢中间产物的戊酮糖有D-核酮糖和D-木酮糖。

3、脱氧核糖是一种有机物，化学式为C4H9O3CHO (C5H10O4)。一种存在于一切细胞内的戊糖衍生物，是分子中氢原子数与氧原子数不符合2:1的糖类。

4、单糖是指不能再被简单水解成更小的糖类的分子。根据羰基所处位置的不同分为醛糖和酮糖两大类。

5、多糖由几百个乃至几万个单糖分子缩合生成，通式为(C6H10O5)n，最重要的是淀粉与纤维素。均一性多糖：淀粉、糖原、纤维素、半纤维素、几丁质(壳多糖)；不均一性多糖：糖胺多糖类(透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等)。

5、多糖由几百个乃至几万个单糖分子缩合生成，通式为(C6H10O5)n，最重要的是淀粉与纤维素。均一性多糖：淀粉、糖原、纤维素、半纤维素、几丁质(壳多糖)；不均一性多糖：糖胺多糖类(透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等)。

用来鉴别糖与非糖的有两个反应：Molisch反应和蒽酮反应。Molisch反应以奥地利植物学家Hans Molisch命名，是用α-萘酚和浓硫酸与糖反应，生成紫红色。具体做法是在少量样品（如1毫升1%葡萄糖溶液）中加入几滴莫氏试剂（3%α-萘酚乙醇溶液），混匀后倾斜试管，沿管壁缓慢加入1毫升浓硫酸。立起试管后溶液分为两层，界面处有紫红色环出现，所以又叫紫环反应。

Molisch反应为阴性可以确定无糖存在，如果为阳性则表明样品中可能含有糖，但不能确定是单糖、寡糖、多糖、糖苷还是糖的衍生物，如糖醛酸等。该反应很灵敏，滤纸屑也会造成假阳性。丙酮、甲酸、乳酸、草酸等都会产生近似的颜色，干扰该反应。果糖浓度过高时会由于浓硫酸的焦化作用而呈褐色。另外，浓硫酸如果直接与莫氏试剂反应，会生成绿色，影响观察。所以操作中加入莫氏试剂时，应该直接滴加到样品中，不要碰到试管壁，以免影响实验结果。下图中右侧试管底部的绿色应该就是试管壁上残留的萘酚造成的。

蒽酮（10-酮-9，10-二氢蒽）反应原理与之相似，产物为蓝绿色，在620nm有吸收，常用于定量测定总糖。色氨酸使反应不稳定。

鉴别酮糖与醛糖一般用Seliwanoff 试剂（间苯二酚和浓盐酸），酮糖在20-30秒内生成鲜红色，醛糖反应慢，颜色浅，增加浓度或长时间煮沸才有较浅的粉红色。含有酮糖的多糖或寡糖（如蔗糖）会因为酸水解而产生颜色。该反应以俄罗斯化学家Theodor Seliwanoff命名。

Seliwanoff反应阳性结果，引自维基百科

鉴定戊糖的Bial反应以德国医生Manfred Bial命名。Bial试剂（含0.025%氯化铁，0.2%地衣酚的浓盐酸）与戊糖在沸水中生成蓝绿色物质，可能沉淀，但可溶于正丁醇。该反应以前常用于RNA定量，吸收峰为670 nm。己糖生成灰色或棕色沉淀，很容易区分，且不溶于正丁醇。

鉴定单糖的Barfoed反应由丹麦化学家Christen Thomsen Barfoed发明,原理类似费林反应。半缩醛羟基在微酸性条件下与乙酸铜反应，生成氧化亚铜的砖红色沉淀。单糖还原快，在30秒到3分钟内显色，而寡糖要在20分钟以上。样品水解、浓度过大都会造成干扰，NaCl也有干扰。