糖柱进了乙酸乙酸铵怎么办

糖柱在本质上属于离子色谱柱更为合理些，其交换基团主要为键合胺根离子，有机物进入柱子后会封住交换基团，并产生溶胀现象，因此出现柱压升高。糖柱同样也不能用于离子对色谱分析，如四氟丁酸等离子对实试剂同样会产生这样的效果。

您的柱子能不能再用就看您的造化了，咨询一下制造商，估计要恢复初始状态是很困难的。

参考下这个吧，虽然不一定有用，推荐你一本书，《高效液相色谱法的建立》是译著，很有用。

反相色谱中如何选择缓冲液

化合物的划分

HPLC分离的样品从其在分离体系内（或者说是流动相下）的状态来划分，可以分为中性样品和离子型样品。所谓中性样品就是在分离条件下不能解离的化合物，而离子型化合物则能够解离出离子。换句话说，离子型样品是指酸碱盐类的化合物，而中性化合物是除此之外的化合物。

有盐流动相好在那里

反相色谱（RPC）分离样品主要基于待分离化合物的极性实现分离的。在其他条件相类似的情况（分子量、空间结构）下极性强的物质保留值小。对于中性样品来说其极性取决于化合物本身，但是对于离子型化合物可以通过调整其是否解离或者解离程度来调整其极性，最终达到调整其保留值、分离度和拄效（一般保留值提前会带来拄效的提高）。

在分离含有少数化合物待检样品的情况下，使用无盐流动相是一般是可行的（可以不考虑其是否全部或者部分未中性化合物）。因为分离的化合物少，可能分离度方面的要求相对不是很重要，而保留值的调整还可以采用调整流动相的洗脱能力、流速等条件得以实现。。此时需要尝试采用有盐流动相，也就是要用到缓冲液。但是对于分离多组分的样品采用无盐流动相往往就会遇到麻烦当然如果样品中的化合物全部都是中性化合物采用有盐流动相也是很难奏效的，可是这样的时候毕竟比较少。所以，在分离多组分待检样品时如果无盐缓冲液效果不好，要首先考虑有盐流动相。

缓冲液

缓冲液是能够提供共轭酸碱对，在一定条件下稳定pH值的一种溶液。使用缓冲液就可以控制分离过程中的p H，进而控制化合物的解离程度，达到调整化合物极性的目的。

缓冲液控制pH的能力就是缓冲液的缓冲容量。其大小由三方面因素决定，分别是：所要控制的pH、缓冲盐的pKa和缓冲盐的浓度。这里就涉及你要控制的pH和选用的缓冲盐的关系，好在这方面的数据一般的色谱书中都会有提及，查一查就可以解决问题。关于缓冲盐浓度认为采用30mM是比较好的，这是一个通常的参数，一般来讲进样量越少、分子量越大、酸碱官能团越少选用的盐浓度可以越小。缓冲盐浓度越小对仪器和色谱拄越好。

缓冲液的选择

对于已知化合物来说这个比较容易。如果是一个碱性化合物，在无盐流动相下保留时间过长，那么可以采用控制流动相为低pH条件，使其达到完全解离，增加其极性，达到缩短分离时间的目的。如果分离的化合物pKa比较低（酸性化合物），在无盐流动相下保留时间比较长，可以采用控制流动相为高一些的pH条件，道理相同。对于保留时间过短的采用相反的调整方式即可，不赘述。

对于分离多个组分而且未知化合物组成的样品就显得比较麻烦了。缺少相关分离样品的资料只能从实验入手了。也就是说尝试各种pH值的流动相（期间最好有机相的比例固定），一般来说从低pH试起是一个比较好的选择，因为我做过的化合物多是碱性化合物（这点仅当参考），再有常用ODS柱子适用pH范围相对第一些。

另外，在调试分离最佳的pH条件的时候，可以采用一种盐——枸橼酸盐，其有点是在Ph2.1～6.4之间等体积混合相同浓度不同pH的缓冲液，混合后的pH值几乎是两者的平均值。声明这一点我没有试验过，从书上看来的。如果这样，在有双通道仪器上调整流动相的pH值将会非常方便。确定好了pH值，然后在换成常用的缓冲盐就OK了。

上面说的是pH范围的选择。在确定了分离最适合的pH之后，就是确定用那种缓冲盐了。一般从两个方面考虑，一是溶解度，要求在所用的有机相比例下易溶解，否则容易造成系统内缓冲盐析出；二是要考虑截至波长的问题。磷酸盐是比较常用的，可以有两个缓冲范围2.0~3.0和6.2～8.2，截至波长小于200nm。注意：缓冲盐中的杂质可能严重影响其截至波长。碳酸盐也不错，但是在低pH会有CO2放出，可能导致缓冲效果降低。

缓冲液的制备

流动相的pH就指的是流动相中缓冲液的pH值。不要把有机相混入缓冲液之后再调其pH。

流动相或者缓冲液过滤的问题。有人倾向于先过滤缓冲液然后混合有机相使用。也有的是有机相与缓冲液混合之后统一过滤。虽然各有缺点，但我认为第二种做法更好些。因为毕竟这样做最仪器和柱子更为保险些，虽然有可能在抽了过程中有可能引起部分溶剂挥发，但我认为可以忽略之。

缓冲液不易长时间防止，尤其是夏天，会生细菌。2天内使用比较合适。

系统冲洗

用缓冲液的系统用过后一定、务必要冲洗。用过渡流动相是一种好办法。过渡流动相就是分析用流动相中去掉无机盐。但是有机相比例较少的最好不要用过渡流动相冲洗。

结束语

采用有盐流动相是反相色谱普中常用的方法，尤其适合分离离子型化合物。只是也有其缺点就是仪器维护上稍微费事点。这种方法不能解决分离中的所有问题，有些复杂样品必须借助于梯度洗脱或者离子对色谱。

乙酸铵，结构简式CH3COONH4，又称醋酸铵。白色三角晶体，分析试剂、肉类防腐剂。

用作分析试剂、肉类防腐剂，也用作制药等。还可以作为缓冲剂和提供乙酸根配体。

使用工业品乙酸铵应控制其中氯化物和重金属的含量。用以配制缓冲液,测定铝和铁。从其他硫酸盐分离硫酸铅。用于肉类防腐、电镀、水处理、制药等. 用作分析试剂、色层分析试剂和缓冲剂。

量的水使成100ml，即得。

两者不可能配制成PH=3.2的缓冲溶液，因为

PH=PKa-lg(c1/c2) 这里的PH直必须在PH=PKa+±1之间,这里的PKa=4.757,那么两者之间所配制成的缓冲溶液的PH值应该在5.757---3.757之间.

常见缓冲溶液配制方法

乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)： 取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)： 取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。

乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。

巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。

巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)： 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。

称取16.0g乙二胺四乙酸二钠（Na2H2Y.H2O）于500mL烧杯中,加200mL左右的纯水,温热使其溶解完全,转入至容量瓶（或聚乙烯瓶）中,用水稀释至2000mL,摇匀,即配得2L的0.02mol/L的EDTA溶液.希望有所帮助,

加乙醇60l和水20l,用10ol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀 释至1000l，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800l,搅拌溶解，并稀释至1000l,用6ol/L盐酸溶液调节 pH值至8.0,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2ol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40l使溶解，用1ol/L盐酸溶液调节pH值 至8.1，加水稀释至100l。

即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g。

再 加水溶解使成1000l，调节pH值至9.0，即得。 乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，加水溶解后。

加浓氨溶液4.2l。

再用水稀释至250l,即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400l。

用2ol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。

即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000l，即得。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量。

加暖溶解后并入上 述溶液中。然后用0.2ol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500l，即得。 甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2ol/L甲酸溶液25l。

加酚酞指示液1滴，用2ol/L氢氧化钠溶液中和。

再加入2ol/L甲酸溶液75l, 用水稀释至200l,调节pH值至3.25～3.30,即得。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g。

加水900l,搅拌使溶解。

用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至 5.6,加水稀释至1000l。

混匀。

即得。 枸橼酸盐缓冲液 取枸橼酸4.2g,加1ol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40l使溶解,再用20％乙醇稀释至100l。

即得。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2) 取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0) 甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000l，置冰箱内保存。乙液：取磷 酸氢二钠71.63g。

加水使溶解成1000l。 取上述甲液61.45l与乙液38.55l混合，摇匀。

即得。 氨－氯化铵缓冲液(pH8.0) 取氯化铵1.07g。

加水使溶解成100l，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0。

即得。 氨－氯化铵缓冲液(pH10.0) 取氯化铵5.4g。

加水20l溶解后，加浓氯溶液35l，再加水稀释至100l。

即得。 硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0) 取硼砂0.572g与氯化钙2.94g。

加水约800l溶解后,用1ol/L盐酸溶液约2.5l调节pH值至8.0。

加 水稀释至1000l。

即得。 硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2) 取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000l；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100l。临用前 取碳酸钠溶液973l 与硼砂溶液27l。

混匀，即得。 硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0) 取硼酸3.09g,加0.1ol/L氯化钾溶液500l使溶解，再加0.1ol/L氢氧化钠溶液210l。

即得。 醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g，加水25l溶解后，加7ol/L盐酸溶液38l，用2ol/L盐酸溶液或5ol/L氨溶液准确调节pH 值至3.5(电位法指示),用水稀释至100l,即得。 醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50l。

加水800l混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0。

再加水稀释至1000l，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20l，再加水稀释至250l,即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300l溶解后。

加溴酚蓝指示液1l及冰醋酸60～80l。

至溶液从蓝色转变 为纯绿色，再加水稀释至1000l，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2ol/L醋酸钠溶液13l与2ol/L醋酸溶液87l,加每1l含铜1g的硫酸铜溶液0.5l,再加水稀 释至1000l，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8l,再加水稀释至1000l,即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50l使溶解。

用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100l，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g。

加1ol/L醋酸溶液20l溶解后，加水稀释至500l。

即得。 醋酸－醋酸钾缓冲液(pH4.3) 取醋酸钾14g，加冰醋酸20.5l，再加水稀释至1000l，即得。 醋酸－醋酸铵缓冲液(pH4.5) 取醋酸铵7.7g，加水50l溶解后。

加冰醋酸6l与适量的水使成100l，即得。 醋酸－醋酸铵缓冲液(pH6.0) 取醋酸铵100g，加水300l使溶解，加冰醋酸7l,摇匀。

即得。 磷酸－三乙胺缓冲液 取磷酸约4l与三乙胺约7l。

加50％甲醇稀释至1000l，用磷酸调节pH值至3.2。

即得。 磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000l,即得。 磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6l。

加水至1000l。

摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g。

加水使溶解成1000l。取上述 甲液72.5l与乙液27.5l混合，摇匀。

即 得。 磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g。

加水800l，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000l。 磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2ol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。 磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000l，即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1ol/L氢氧化钠溶液15.2l，用水稀释至100l，即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g。

加水使溶解成400l。

即得。 磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500l使溶解,用0.1ol/L 氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g。

加水适量使溶解。

将两液混合后,加水稀释至1000l。

即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2ol/L磷酸二氢钾溶液250l。

加0.2ol/L氢氧化钠溶液118l。

用水稀释至1000l。

摇匀。

即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g。

加0.1ol/L氢氧化钠溶液29.1l。

用水稀释至100l，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2ol/L磷酸二氢钾溶液50l与0.2ol/L氢氧化钠溶液35l。

加新沸过的心灰意冷水稀释至200l。

摇匀。

即 得。 磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000l。

调节pH值至7.3，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1ol/L氢氧化钠溶液79l。

用水稀释至200l，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000l。

取50l，加0.2ol/L氢氧化钠溶液42.4l，再加水稀释至 200l，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液：取磷酸氢二钠35.9g。

加水溶解。

并稀释至500l。 乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解。

并稀释至100l。取上述甲液91.5l与乙液8.5l混合，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0) 取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g。

加水使溶解成1000l，即得。 乙酸铵-乙酸缓冲溶液（pH=7）：30g乙酸铵加水100L再加入几滴乙酸即可（乙酸铵pH值7.15左右，乙酸滴几滴就够了，网上说 1.4L感觉多了） 前53条是网上找的，最后一条是自己刚配的。