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乙醇 醋酸钠沉淀质粒要多长时间

火星上的咖啡豆
孤独的海燕
2022-12-30 02:06:46

乙醇 醋酸钠沉淀质粒要多长时间

最佳答案
整齐的黑裤
听话的泥猴桃
2026-05-01 01:58:07

用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐.个人见解.

异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗.只有醋酸钠 乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐,乙醇浓度太高达不到脱盐效果,浓度太低DNA会溶掉

异丙醇沉淀以后有人用无水乙醇洗一遍,目的是加速DNA的干燥,因为异丙醇的挥发性没有乙醇好

主要目的还是为了除盐,前面沉淀DNA时加入的盐会影响你后续的克隆操作,如酶切和PCR.

最新回答
完美的未来
害羞的帽子
2026-05-01 01:58:07

醋酸钠乙醇沉淀法用于pcr产物的纯化

加1/10的3N醋酸钠,再加3倍量无水乙醇,冰浴30min,13600rpm离心20min,弃上清.加75%乙醇,再离心20min,弃上清,真空干燥,加水溶解。

俭朴的墨镜
瘦瘦的镜子
2026-05-01 01:58:07
因为乙醇钠能够和空气中的二氧化碳发生反应,生成碳酸氢钠,生成碳酸氢钠之后,碳酸氢跟在溶液中会和水中的钙镁离子,发生反应,所以沉淀不是乙醇钠,这种物质应该是对化学镀镍液有影响的,所以建议你重新进行配置

年轻的饼干
含糊的电脑
2026-05-01 01:58:07

哈哈哈 ethanol precipitation讲究太多了你摸不透的。

在ethanol precipitation里面可使用的盐有以下:

使用CH3COONa

使用最多的最普遍的。添加终浓度0.3M

使用CH3COONH4

可去除dNTP或糖类,蛋白质的混入。

注意NH4离子阻碍DNAligase等酶活性。

使用LiCl

适合RNA precipitation。

注意Cl-离子阻碍reverse transcription。

使用NaCl

溶液中如有SDS,为了避免沉淀将需要用NaCl盐。

使用MgCl2

沉淀7-100bp的DNA时用。

没什么特别的就用CH3COONa吧。

至于你的收量问题我推荐你加长离心时间。4度离心一小时试试。

谨慎的钻石
炙热的洋葱
2026-05-01 01:58:07
乙醇精制的步骤,仅供参考 1.加入2.5倍体积的预冷的无水乙醇,然后在加入10分之一体积的醋酸钠(PH5.2,3M)或者醋酸氨 2.混合均匀,零下80度15分钟或者零下20度30分钟 3.14000RPM,低温(一般指4度),离心15分钟 4.弃上清,加入500-600微升的70%的乙醇 5.14000RPM,低温(一般指4度),离心5分钟 6,弃上清,充分晾干,将残留的乙醇充分除净 7.根据起始的DNA的量,加入灭菌水或者TE 8.电泳定量备用我一般是将无水乙醇和70%的乙醇均放到零下20度保存,但我也做过实验,使用室温的乙醇也可以

如果DNA的量很大,醋酸钠和氯化钠是不必要的.它们的作用就是增强沉淀,纯化极少量的DNA时,它们就起很大的作用了. 要使用什么样的盐沉淀,要看下一步做什么了.

其实沉淀用的乙醇都可以使用室温的, 分子克隆上就写到了, 我用的效果也的确如此. 很多抽提DNA,RNA的KIT的PROTOCOL上也是这么用的 但大家好象都习惯用预冷的了, 也没什么坏处. 阳离子的存在是为了中和DNA上磷酸基团的负电荷, 以便于其沉淀.

风中的秀发
稳重的滑板
2026-05-01 01:58:07
您好

钠与水反应的现象:

1、钠浮在水面上

2、钠在水面上迅速游动,并有轻微的嘶嘶声

3、钠融成一个小球

4、反应后溶液中滴入酚酞,变红

5、生成的气体可点燃,有爆鸣声

拓展资料:

钠与乙醇反应的现象:

1、钠下沉(钠的密度比乙醇的大)

2、有气泡出现,但无爆鸣声(有气体产生,虽然该气体为氢气,但由于被乙醇隔绝,不与空气接触,不与氧气反应,故没有爆鸣声,1mol乙醇中的1mol-OH羟基上的氢参加了反应)

3、反应结束后,试管壁变热,但钠不熔化(反应放热,但热量没达到钠的熔点,反应慢,放热,羟基上的氢不如水活泼)

4、反应结束后往试管滴加酚酞,溶液变红(证明反应生成碱性物质(乙醇钠))2H3CH2OH+2Na==2H3CH2ONa+H2(气体)也叫取代反应(Na取代H)氧化反应(加氧去氢都叫氧化反应,生成H2)

迷人的砖头
顺利的海燕
2026-05-01 01:58:07
解析:

乙醇 和 醋酸钠 不能发生反应

乙醇 和 醋酸 可以发生反应,但要在浓硫酸加热催化下进行:

酯化反应:

H3C-CO - OH + H - O-CH2-CH3 =(△、浓硫酸)=H3C-CO - O-CH2-CH3 + H2O

此反应为可逆反应,根据勒沙特列原理,如果改变某种条件,可逆反应就有向着减少这种影响的方向进行的趋势

(1)浓硫酸具有脱水性,可作为反应催化剂,

(2)浓硫酸具有吸水性,可促使反应不断地向右进行,生成更多的乙酸乙酯,

寒冷的西牛
苗条的钢铁侠
2026-05-01 01:58:07
是为了除去沉淀物之中的水分。由于水提醇沉法沉淀物多为多糖、蛋白质等大分子复合物,具有较强的吸水性。沉淀物单凭烘干无法除去其中的水分,会使沉淀产物含有较多的水分,影响产物性状(是产物呈胶状,而非粉末状固体)以及纯度是产物无法进行精确的定量分析。醇沉后用无水乙醇洗涤,除去一部分水分;再用可溶于水的丙酮洗涤,确保水分除净;最后用无水乙醚洗涤沉淀物,除去残存的乙醇、丙酮和溶于其中的水分。这样就可以得到较纯的多糖或蛋白质了。

时尚的鸵鸟
忧郁的超短裙
2026-05-01 01:58:07
如果有浓硫酸存在,可以发生酯化反应.

原理是浓硫酸与醋酸钠反应生成醋酸,醋酸再与乙醇发生酯化反应

CH3COONa + H2SO4 = NaHSO4 + CH3COOH(写生成Na2SO4也可)

CH3CH2OH + CH3COOH ==浓硫酸加热可逆== CH3CH2OOCCH3 + H2O

羞涩的铃铛
光亮的心锁
2026-05-01 01:58:07
用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐.个人见解.异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗.只有醋酸钠 乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐,乙...