多糖提取中，加入乙醇后什么沉了

乙醇在提取过程中的作用一般有溶解被提取物或是溶解杂质，可以看出，水发提取多糖用乙醇回流，主要作用是用乙醇溶解植物组织中的水溶性杂质而又可以把糖的损失率降低。因此，之后利用水法提取多糖的时候就可以减少杂质的溶出。

甘蔗渣制乙醇的工艺过程描述如下：

秸秆――粉碎――预处理――酶解1――过滤――酶解2――过滤――接种――发酵――初馏――蒸馏――乙醇 ，七吨多甘蔗渣可生产一吨95％乙醇，并且无污水排放；每吨乙醇的成本比其他原料如玉米、木薯等低1000元以上。 过去是利用蔗糖水解发酵制取的，成本高。

扩展资料：

乙醇就是酒精，它是糖经过发酵之后变成的，从成本上来说，一般不会直接用糖来做酒，糖厂多是用榨过糖之后的蔗渣浸提液和下脚料来发酵。经过发酵之后的料进行蒸馏，出来的就是酒精，先出来的含甲醇多，不能食用（食了会瞎眼）称作工业酒精，后出来的基本上是乙醇，当酒卖。再提纯就是医用酒精。

乙醇是常用的化学试剂，而我们平时所见的多是水和乙醇的混合物 ，想要制作更高精密度的实验，就要用无水乙醇。首先将比例为95 %的乙醇添加到大容器中，接着加入干燥剂成分。这些干燥剂可以起到吸收水分的作用，静置一段时间后倒入比重计中测量浓度，达到100 %后就可以对乙醇进行净化了。

参考资料来源：百度百科-乙醇

溶剂提取法溶剂提取法是从植物中提取多糖的常用方法，溶剂提取法首先要考虑的因素是选择溶剂，一般应遵循相似相溶的原则，即极性强的有效成分选择极性强的溶剂，极性弱的成分选择极性弱的溶剂。多糖是极性大分子化合物，应选择水、醇等极性强的溶剂。在所有溶剂中，水是典型的强极性溶剂，对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全。它能用于各种植物多糖，被广泛应用。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提液可直接或离心除去不溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。刘青梅等在紫菜粗多糖提取方式研究中，热水提取控制条件为：温度为20~100℃，水与紫菜的液固质量比为50:1，提取时间30~180min，经多次试验最终得率为2.05%。周峙苗得到热水浸提羊栖菜多糖的最佳因素：浸提温度为煮沸(102℃)，ph为3.0，浸提时间为3h，液固质量比为40:1。李战对三种紫球藻的提取工艺研究表明，三种紫球藻的最佳提取工艺各不相同。铜绿紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度5%，乙醇用量为3倍体积，醇沉时间为1.5h。氯仿与正丁醇的比例4:1，样液与sevag试剂的比例1:2，作用时间为15min。淡色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度75%，乙醇用量为2倍体积，醇沉时间为1h，氯仿与正丁醇的比例3:1，样液与sevag试剂的比例1:2，作用时间为45min。血色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度50%。乙醇用量为1倍体积，醇沉时间为0.5h，氯仿与 正丁醇的比例4:1，样液与sevag试剂的比例2:1，作用时间为45min。酸碱提取法有些多糖适合用稀酸或碱溶液提取，才能得到更高的提取率。但酸碱提取法有其特殊性，因多糖类的不同而异。只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸碱度。因为某些多糖在酸性或者碱性较强时，可能引起多糖中糖苷键的断裂。另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。赵宇等对海篙子多糖的提取方法研究发现，从硫酸根含量及粗多糖产率看酸提方法好于水提方法。具体方法为：100g海篙子干粉，加入1000ml 0.1mo1/l hcl溶液提取。室温搅拌1h后过滤，重复操作三遍，合并滤液；滤液减压浓缩至总体积的1/5，再加入95%乙醇至乙醇浓度达30%，沉淀，离心除去沉淀中的褐藻酸，继续向上清液中加入乙醇至乙醇浓度达7%。室温放置过夜使沉淀完全，离心，沉淀干燥得海篙子粗多糖，多次试验算得平均产率为3.35%。孟宪元等在茜草多糖提取研究中发现酸提相对多于水提，以稀酸提取茜草多糖，产品纯度较高。具体方法如下茜草根粗粉1000g 5%hcl浸泡、离心、取上清液加入etoh并调节至浓度为7%，静置，2500rpm离心，收集棕色沉淀物，95%etoh洗涤3次，用45%hcl溶解。加1%活性炭脱色，真空抽滤，滤液4℃过夜，弃去容器底部少许沉淀物。溶液置透析袋内，逆水法透析3d，冷冻干燥，得白色粉末状多糖约10g。hayashi katsuhiko发明了一种从绿色藻类中提取酸性多糖的方法，而这种多糖用常规的热水法是无法得到的。具体过程为：将干燥的绿藻粉末制成悬浮液，热水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分离，取粘稠的固状物，加入碱水，在ph≥10的条件下再进行搅拌提取，碱水提取液在搅拌的同时加入酸水调节ph值为3.0~4.0，静置沉降后离心得酸性多糖。1.3生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。孟江研究不同酶对大枣渣多搪提取效果的影响，根据多糖得率、多糖含量及蛋白质含量进行综合评分得到最适合的酶为复合酶2(先胰蛋白酶提取，后 木瓜蛋白酶提取)，接下来依次是木瓜蛋白酶、复合酶、(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶(ph=7.0)、胃蛋白酶(ph=2.0)。复合酶2作用条件温和，多糖得率及含量较高，且蛋白含量较低，实为一种理想的酶提取剂。通过进一步正交实验考察得出最佳工艺：先用胰蛋白酶3%，40倍体积在ph=7.0，65℃温浸1.5h后，再加木瓜蛋白酶2.5%，在ph=7.0，50℃水温浸1h，过滤残渣加40倍体积水，迅速升温至80℃，然后温浸1.5h。此外，植物多糖的提取方法还有超滤法，超声波强化法，微波法等等。植物多糖的提取方法和技术在不断改进和创新，但对于同一种方法和技术又需在不同植物多糖的提取中研究考察。在选取提取分离方法的同时，应当根据目标多糖的特点、物理化学性质，综合比

水提法的优点是：可直接或离心去除杂质。缺点在于温度高、耗时长、提取率低。乙醇提取法优点：可以将多糖沉淀出来。缺点：容易破坏多糖的空间结构。

多糖（polysaccharide）是由多个单糖分子脱水缩合而成的糖类化合物，具有抗病毒、免疫调节、抑制脂类氧化等多种生物活性。多糖提取方法有很多种，可择优提取。多糖提取溶剂提取法方法如下。

1、水提法：以水为溶剂，可采用热水浸提或冷水浸提（植物多糖多采用热水浸提，可直接或离心去除杂质），由于多糖不溶于乙醇，可通过沉淀将多糖提纯出来。水提法的确缺点在于温度高、耗时长、提取率低。

2、酸提法：有些含酸性基团的多糖在酸性条件下不易溶解，可用盐酸或乙酸处理后，再用乙醇或不溶性络合物将多糖沉淀出来。酸提法容易破坏多糖的空间结构，一般较少使用。

3、碱提法：一些含有糖醛酸的多糖和酸性多糖在碱性条件下都比较稳定，可提高多糖的提取率，一般用硼氢化钠或硼氢化钾作为溶剂。碱提法的不足之处在于某些多糖在碱性较强时会降解，而且容易影响成品的色泽和风味。

一、多糖的提取

1 热水浸提法

其步骤为：原料→粉碎→脱脂→粗提（2－3次）→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥

2 微波辅助提取法

3超声波辅助法与常规提取法相比,具有提取时间短、产率高、无需加热等优点[17].

4 索氏提取法：（索氏提取器中,石油醚）

5 醇提法：（乙醇）

醇提法方法简单,易于操作,但提取率较低,乙醇使用量大,不宜大规模提取使用.

6 其它方法：

多糖的提取方法还有稀碱液浸提法、稀酸液浸提法、酶法等.但由于稀酸、稀碱条件下,易使多糖发生糖苷键的断裂,部分多糖发生水解而使多糖的提取率减少,因而很多试验中避免采用稀碱液浸提法和稀酸液浸提法.

二、多糖的纯化

多糖中杂质除去方法 粗多糖中往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖等杂质,必须分别除去.

1 除蛋白质常用的方法有

1) 沙维积法（Sevag法）：

2) 三氟三氯乙烷法

3) 三氯醋酸法

4) 酶解法：在样品溶液中加入蛋白质水解酶,如胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶等,使样品中的蛋白质降解.通常将其与Sevag法综合使用除蛋白质效果较好.

5 )盐酸法：取样品浓缩液,用2mol/L盐酸调节其PH至3,放置过夜,在3000r/min条件下离心,弃去沉淀,即脱去蛋白质.

6) 其它方法：可以加入5%ZnSO4溶液和饱和Ba(OH)2溶液,振荡后离心去蛋白.此法除蛋白不够彻底,可结合Sevag法使用.还可在提取液中加入50%的TCA溶液至沉淀完全,在4000r/min的条件下离心10min,收集上清液,即为除蛋白液.

还有人使用4:1的氯仿-乙醇溶液除蛋白,将混合液清摇,再静置,取上清液.此过程需重复多次方可除尽蛋白.

除去蛋白质的样品用紫外分光光度计检验,观察在280mm处是否有吸收,如果无吸收则表明蛋白质已经除尽.

2 除色素

1)活性炭

2)弱碱性树脂:对于植物来源的多糖,可能含有酚型化合物而颜色较深,这类色素大多呈负性离子,不能用活性炭吸收剂脱色,可用弱碱性树脂DEAE纤维素或DuoliteA－7来吸附色素.

3)氧化脱色:若糖和色素时结合的,易被DEAE纤维素吸附,不能被水洗脱,这类色素可进行氧化脱色：以浓氨水或NaOH液调至PH8.0左右,50℃以下滴加H2O2至浅黄色,保温2小时.

4)乙醚和无水乙醇洗涤：依次用丙酮、无水乙醚和无水乙醇洗涤多糖,即可得到较为纯净的多糖.此法较为简单,便于操作,多糖损失也较小.

5）用4:1的氯仿-正丁醇除色素.操作简单,多糖有一定损失.

6）发酵来源的多糖颜色一般较浅,色素含量较少,一般可不除色素.

3 除低聚糖等小分子杂质

1）采用逆向流水透析法.即准备好一桶蒸馏水,用一根导管将水通入透析袋的烧杯底部,另用一根导管将水引出,根据水量控制流速,使水缓慢流动48小时.这样得到的就是多糖的半精品.

2）利用溶液浓度扩散效应,将分子量小的物质如无机盐、低聚糖等从透析袋渗透到袋外的蒸馏水中,不断换水即可保持浓度差,从而除尽小分子杂质.具体的做法是根据多糖溶液的体积截取相应长度的透析袋,用透析夹夹住一端,灌入多糖液,离液面2－3cm处夹紧透析袋,置于一大烧杯中,注入蒸馏水至完全浸没透析袋后,用磁力搅拌器慢速搅拌,每12小时换一次水,重复3－4次.

多糖提取稀释倍数：

需根据测定吸光度的工作曲线来确定用多少水去溶解多糖，稀释后的多糖溶液浓度应在工作曲线范围之内。例如，工作曲线的浓度范围是0.1~0.5mol/l，那么稀释50倍之前的溶液浓度就不能超过5~25mol/l，否则试验误差会很大。

原理

分子量大于10，000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后，加入碱性铜试剂，选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖，沉淀部分与苯酚-H2SO4反应，生成有色物质，在485nm条件下，有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10，000道尔顿葡聚糖的样品。

多糖纯化：a、分部沉淀法：根据各种多糖在不同浓度的低级醇或丙酮中具有不同溶解度的性质，逐次按比例由小到大加入甲醇或乙醇或丙酮，收集不同浓度下析出的沉淀，经反复溶解与沉淀后，直到测得的物理常数恒定（最常用的是比旋光度测定或电泳检查）。这种方法适合于分离各种溶解度相差较大的多糖。为了多糖的稳定，常在pH7进行，唯酸性多糖在pH7时－COOH是以－COO` 离子形式存在的，需在pH2－4进行分离，为了防止苷键水解，操作宜迅速。此外也可将多糖制成各种衍生物如甲醚化物、乙酰化物等，然后将多糖衍生物溶于醇中，最后加入乙醚等极性更小的溶剂进行分级沉淀分离。b、盐析法：在天然产物的水提液中，加入无机盐，使其达到一定浓度或饱和，促使有效成分在水中溶解度降低沉淀析出，与其它水溶性较大的杂质分离。常做盐析的无机盐的有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。c、季铵盐沉淀法：季铵盐及其氢氧化物是一类乳化剂，可与酸性糖形成不溶性沉淀，常用于酸性多糖的分离。通常季胺盐及其氢氧化物并不与中性多糖产生沉淀，但当溶液的PH增高或加入硼砂缓冲液使糖的酸度增高时，也会与中性多糖形成沉淀。常用的季铵盐有十六烷基三甲胺的溴化物（CTAB）及其氢氧化物（cetyl trimethyl ammonium hydroxide，CTA－OH）和十六烷基吡啶（cetylpyridinm hydroride，CP－OH）。CTAB或CP－OH的浓度一般为1％－10％（W/V）的多糖溶液中，酸性多糖可从中性多糖中沉淀出来，所以控制季铵盐的浓度也能分离各种不同的酸性多糖。值得注意的是酸性多糖混合物溶液的PH要小于9，而且不能有硼砂存在，否则中性多糖将会被沉淀出来d、柱层析：纤维素柱层析：纤维素柱层析对多糖的分离既有吸附色谱的性质，又具有分配色谱的性质，所用的洗脱剂是水和不同浓度乙醇的水溶液，流出柱的先后顺序通常是水溶性大的先出柱，水溶性差的最后出柱，与分级沉淀法正好相反。纤维素阴离子交换柱层析：最常见的交换剂为DEAE－纤维素（硼酸型或碱型），洗脱剂可用不同浓度的碱溶液、硼砂溶液、盐溶液等。此方法目前最为常用。它一方面可纯化多糖，另一方面还适于分离各种酸性多糖、中性多糖和粘多糖。凝胶柱层析：凝胶柱层析可将多糖按分子大小和形状不同分离开来，常用的凝胶有葡聚糖凝胶（sephadex G）、琼脂糖凝胶（sepharose bio－gel A）、聚丙烯酰胺凝胶（bio－gel P）等，常用的洗脱剂是各种浓度的盐溶液及缓冲液，但它们的离子强度最好不低于0.02。出柱的顺序是大分子的先出柱，小分子的后出柱。由于糖分子与凝胶间的相互作用，洗脱液的体积与蛋白质的分离有很大的差别。在多糖分离时，通常是用孔隙小的凝胶如sephadex G－25、G－50等先脱去多糖中的无机盐及小分子化合物，然后再用孔隙大的凝胶sephadex G－200等进行分离。凝胶柱层析法不适合于粘多糖的分离。

籽实体是担子菌长出地面的地上部份，为蘑菇的生殖器官，模样很像插在地里的1把伞。地下还有白色

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其提取物（以乙醇提取24小时，滤液加丙酮混合沉淀，其上清液再用乙醇提，并经真空干燥）有下降血糖的作

水对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全、经济。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物，或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，沉淀提纯多糖。但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离。还可按不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离，其中，以乙醇沉淀最为普遍，但以根茎为主的植物体，细胞壁多糖含量高，热水直接提取率不高，此时为破坏细胞壁，增加多糖的溶出，有两种方法：一为酶解，二位弱碱溶解。