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dna提取实验中70%乙醇的作用

爱听歌的大象
淡淡的秋天
2022-12-29 23:19:36

dna提取实验中70%乙醇的作用

最佳答案
端庄的大门
幽默的季节
2026-05-03 04:02:52

在质粒DNA的制备中,无水乙醇起到沉淀DNA继而达到浓缩DNA的目的,70%的乙醇是用来洗涤DNA的,进一步去除杂质。

在除去蛋白质沉淀后,要加入无水乙醇使质粒沉淀,离心除去上清,再加入70%乙醇清洗DNA沉淀,清洗两次左右。最后要把DNA沉淀溶于TE或ddH2O中。

扩展资料:

1、 测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。

2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。

参考资料来源:百度百科-质粒DNA纯化

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2026-05-03 04:02:52

在DNA提取时,用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。

DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙醇,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用o.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。

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聪明的大门
2026-05-03 04:02:52
因为DNA和杂质(主要是Pr)的耐受性不同,加入酒精后,DNA会析出。而且要是等体积、冷却的酒精溶液。作用:1.抑制核酸水解

2.降低分子运动,易于形成沉淀

3.增强DNA分子柔韧性,防止DNA断裂。

风中的柜子
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2026-05-03 04:02:52
在DNA的粗提取与鉴定中,酒精必须用预冷的95%的酒精,其作用是:

1.抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;

2.降低分子运动,易形成沉淀;

3.低温有利于增加DNA柔韧性,减少断裂。

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2026-05-03 04:02:52
植物DNA提取方法是采用CTAB法。

CTAB,是一种阳离子去污剂,能与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7mol/L) 浓度下可溶,并稳定存在,但在低盐浓度(0.1~0.5mol/L NaCl)下CTAB-核酸复合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白质及多糖等仍溶解于溶液中。通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。经离心弃上清后,CTAB-核酸复合物再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB。

无水乙醇:沉淀DNA。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。

氯仿:克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。

异戊醇:减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

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2026-05-03 04:02:52
溶解的原理是被溶解溶质的分子分散到溶解该物质的溶液分子间隙的过程,这个原理同样适用于DNA溶于水的过程,即DNA分子同水分子相互结合。乙醇分子和水的结合力大于DNA与水的结合力,故乙醇分子会抢占原来已经溶于水的DNA分子的位置,DNA分子因此被析出。为保证所形成的乙醇溶液的浓度,要加两倍以上体积的乙醇,这样能形成60%以上浓度的乙醇溶液,不一定是两倍,但是一定要高于这个值,否则DNA不容易析出。DNA提取的下一步加70%洗涤也是这个原理,其实量多量少不重要,关键是达到一定的条件。