常用的tlc显色方法,显色剂有哪些
TLC
显色试剂的选择
显色剂可以分成两大类:
一类是检查一般有机化合物的通用显色
剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
通用显色剂
硫酸
常用的有四种溶液:硫酸
-
水
(1:1)
溶液;硫酸
-
甲醇或乙醇
(1:1)
溶液;
1.5mol/L
硫酸溶液与
0.5-1.5mol/L
硫酸铵溶液,喷后
110
℃烤
15min
,不同有机
化合物显不同颜色。
0.5
%碘的氯仿溶液
对很多化合物显黄棕色。
中性
0.05
%高锰酸钾溶液
易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
碱性高锰酸钾试剂
还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液
I
:
1%
高锰酸钾溶液;
溶液
II
:
5%
碳酸钠溶液;
溶液
I
和溶液
II
等量混合应用。
酸性高锰酸钾试剂
喷
1.6%
高锰酸钾浓硫酸溶液
(
溶解时注意防止爆炸
)
,喷
后薄层于
180
o
C
加热
15
~
20min
。
酸性重铬酸钾试剂
喷
5%
重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时
150
o
C
烤薄层。
5%
磷钼酸乙醇溶液喷后
120
o
C
烘烤,
还原性化合物显蓝色,
再用氨气薰,
则背景变
为无色。
专属性显色剂
由于化合物种类繁多,
因此专属性显色剂也是很多的,
现将在各类化合物中
最常用的显色剂列举如下:
(1)
烃类
①硝酸银
/
过氧化氢
检出物:卤代烃类
溶液:硝酸银
0.1g
溶于水
1ml
,加
2-
苯氧基乙醇
l00ml
,用丙酮稀释至
200ml
,
再加
30%
过氧化氢
1
滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;
结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素
/
溴
检出物:不饱和烃
溶液:
I
.荧光素
0.1g
溶于乙醇
100ml
;
II
.
5%
溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷
(I)
,然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素
(
曙红
)
,荧光
消失,
不饱和烃斑点由于溴的加成,
阻止生成曙红而保留荧光,
多数不饱和烃在
粉红色背景上呈黄色。
③四氯邻苯二甲酸酐
检出物:芳香烃
溶液:
2
%四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯
(10:1)
的溶液。
方法:喷后置紫外光下观察。
④甲醛
/
硫酸
检出物:多环芳烃
溶液:
37%
甲醛溶液
0.2ml
溶于浓硫酸
l0ml
。
(2)
醇类
3,5-
二硝基苯酰氯
检出物:醇类
溶液:
I
.
2%
本品甲苯溶液;
II
.
0.5%
氢氧化钠溶液;
III
.
0.002%
罗丹明溶液。
方
法:先喷
(I)
,在空气中干燥过夜,用蒸气薰
2min
,将纸或薄层通过试液
(II)30s
,
喷水洗,趁湿通过
(III)15s
,空气干燥,紫外灯下观察。
硝酸铈铵
检出物:醇类
溶液:
I
.
1%
硝酸铈铵的
0.2mol/L
硝酸溶液;
II
.
N,N-
二甲基
-
对苯二胺盐酸盐
1.5g
溶于甲醇、
水与乙酸
(128ml+25ml+1.5ml)
混合液中,
用前将
(I)
与
(II)
等量混合。
喷板后于
105
o
C
加热
5min
。
薄层色谱(Thin layer chromatography)
是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大。
因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。是将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板(如玻璃板、塑料片、金属片等)上,形成薄层(常用厚度为0.25毫米左右)后,在此薄层上进行层析分离的分析方法。
扩展资料
优点——
薄层层析有许多优点:它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍;
它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。
参考资料来源:百度百科-薄层色谱
这个我也不擅长 这也是我看到的 你可以参考下
我的实验室就是取约50ml乙醇放在瓶中,再加3ml浓硫酸。
做TLC的时候,取出展开完毕的板,吹干,在溶液中蘸一下,湿了就可以。在瓶壁上把多余的酸液碰下去。再用电吹风的弱热风档小心地吹,变色明显即可。
配制方法:在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +
200mL 水. 使用期3 个月
磷钼酸(PMA)广谱配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物硫酸铈:生物碱配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物
配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羟基黄酮)
广谱, 有荧光活性
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
适用于醛和酮
配制方法:12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸,pKa