建材秒知道
登录
建材号 > 乙醇 > 正文

提取RNA时,最后为什么要用75%乙醇洗涤

开心的楼房
单身的溪流
2022-12-29 21:49:24

提取RNA时,最后为什么要用75%乙醇洗涤

最佳答案
诚心的身影
怕黑的麦片
2026-05-04 07:33:10

前面提取的rna经异丙醇沉淀后,总会含有一些未除去的蛋白和其它杂质分子,这些蛋白和杂质分子如果不除尽的话,就会直接影响所提取的rna的纯度和稳定性。为此,就需要用70%乙醇洗涤沉淀(因为在70%乙醇里rna是不溶的,而一些蛋白和其它杂质分子却可溶),并且最好是洗涤2次,然后高速离心后,倒去上清,即可得到较纯的rna沉淀。用无水乙醇则达不到这个目的

最新回答
无语的蜡烛
魁梧的狗
2026-05-04 07:33:10

RNA在冷的无水乙醇里溶解度低,而蛋白溶解度高,因此可以用冷的无水乙醇把RNA沉淀下来从而达到提纯的目的。

2倍无水乙醇的是用来沉淀DNA的,也可以用2/3体积的异丙醇来沉淀DNA,NaAc则是提供钠盐环境,促进DNA沉淀,效果明显。

提取DNA时加入NaAc pH5.2和2倍体积的无水乙醇的作用是什么,主要是因为DNA在一定的盐浓度条件下才能更好地沉淀下来.如果你不急用其实可以沉淀过夜的。这样就可以少了75%乙醇洗涤的那一步,那一步主要是洗去多余的盐。急用的话就加吧,但是一定要用75%乙醇洗涤。

欣喜的睫毛膏
个性的香水
2026-05-04 07:33:10
氯仿: RNA脱离DNA及蛋白,从混合液中层析到水相.水相中的RNA可用异丙醇沉淀浓缩.

接着用异丙醇进行二次沉淀,随后用乙醇洗涤沉淀,可去除所有残留的蛋白质和无机盐. RNA样品中如果含有无机盐, 有可能对后续实验操作中的一些酶促反应产生抑制作用。

犹豫的菠萝
腼腆的自行车
2026-05-04 07:33:10
因为异丙醇沉淀的时候要加盐来提高RNA的沉淀效率,异丙醇会使以前几步溶液中的盐(比如trizon的水相中的)和沉淀时加入的醋酸铵一起沉淀下来,需要用酒精清洗两遍把这些盐溶解掉,否则可能会影响以后的反应.