甲苯胺蓝染色液染色方法
甲苯胺蓝染色液染色方法
甲苯胺蓝 是常用的人工合成染料的一种属于醌亚胺染料类,是碱性染料, 甲苯胺蓝 中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色,可染细胞核使之呈蓝色;肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。不推荐用于软骨、胃粘膜等难染组织的染色。
肥大细胞的染色:
(1)组织脱蜡至水。
(2)蒸馏水浸洗2-3次。
(3) 甲苯胺蓝染液 染20-30min。
(4)稍水洗,洗去多余染色液。
(5)95%酒精分色,在镜下控制分色效果。
(6) 用100%酒精脱水。
(7) 二甲苯 透明, 中性树胶 封片。
肥大细胞染色结果:肥大细胞颗粒呈红紫色,胞核呈蓝色。
细胞涂片染色 :
(1)细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。
(2)滴加1~2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。
(3)后将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。
(4)无需干燥,直接镜检。
细胞涂片染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
原位杂交染色 :
(1)用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:10。
(2) 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
(3) 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
(4) 按需求进行压片固定。
神经元细胞的染色:
(1)将载有细胞的玻片取出放入4%多聚甲醛中固定1h左右;
(2)到时间后取出用PBS冲洗1~2次即可;
(3)然后加入提前预热的1%甲苯胺蓝溶液,在50度左右的气浴或水浴中染色20~30min;
(4)用梯度酒精已次脱水,分别为75%、90%、100%,也可自定梯度;
(5)在镜下控制分色效果,这一步不太好掌握;
神经元细胞染色结果:可见尼氏小体深蓝色颗粒,细胞核呈淡蓝色,背景基本无色。
北京索莱宝科技有限公司 自产产品 1%甲苯胺蓝染色液 ,货号为 G1220 ,主要用于生化实验中肥大细胞的检测。
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二甲苯透明,中性树胶封固。 结果:在胃粘膜腺上皮表面,腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌(HP),有的呈弯曲杆状或逗点状,HP可散在出现,也可成团聚集出现,这要根据不同病例而异。
试剂的配制:称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃冰箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为最佳,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。
间甲苯胺为无色液体
熔点-50%;沸点203℃、82.3℃(1.333kPa);相对密度0.9889;折射率1.5681。对甲苯胺为白色片状结晶;熔点44.5℃;沸点200%(常压)、79.6℃(1.333kPa);相对密度0.9619;折射率1.5534。
三种异构均可溶于乙醇、乙醚及稀酸液中,微溶于水。由相应的硝基甲苯还原制得。主要用作合成各种染料和药物的原料。在分析化学中除作溶剂外也用作矿物折射指数的浸渍液。
甲苯胺蓝染色,软骨呈鲜艳的紫色(紫红色),其他为浅蓝色,能够清楚地显示软骨形态潮线等结构,观察软骨组织是否有损伤。
甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种属于醌亚胺染料类,是碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色,可染细胞核使之呈蓝色。
注意事项
1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。
2、本产品为1%浓度水溶液,具体使用浓度可自行稀释。
3、由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响,若快速染色,当室温较低时,可以适当加温。
以上内容参考:百度百科-甲苯胺蓝
结果:在胃粘膜腺上皮表面,腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌(HP),有的呈弯曲杆状或逗点状,HP可散在出现,也可成团聚集出现,这要根据不同病例而异。试剂的配制:称取0.1g甲苯胺蓝,溶于100ml
0.1M醋酸盐缓冲液中,置室温5天后,即可使用染液于室温下可保存3个月,若放于4℃冰箱则可保存半年左右,但该液的染色效果在早期为最佳,若染液存放时间较长,则染色偏淡,应适应延长染色时间。
这是用来观察细胞结构的,经硼砂甲苯胺蓝染色的半薄切片经光镜观察可把组织细胞核被染色成深蓝色,胞浆被染成淡蓝色,结构层次清楚,包埋剂没有着色。
甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除了有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。
助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
,可用龙胆紫、醋酸洋红溶液等碱性染料染色。
1、染色体染色剂:
醋酸-洋红染液
醋酸-地衣红染液,龙胆紫染液,甲苯胺蓝染液配置方法。
配方一
醋酸-洋红染液
取45毫升冰醋酸,加蒸馏水55毫升,煮沸后徐徐加入洋红1克,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10分钟,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二
醋酸-地衣红染液
取45毫升醋酸,跟55毫升蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2克,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时。冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三
龙胆紫染液
取1克龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100毫升,保存在棕色瓶内。
配方四
甲苯胺蓝染液
取0.5克甲苯胺蓝,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。
2、观察染色体行为一定要保持细胞的活性,用碱性颜料可以在不影响的情况下观察到染色体。酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说,助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂,反之则为酸性染色剂。
碱性染料,basic
dye(s),亦称盐基性染料。在水溶液中能解离生成阳离子色素的染料,故划归为阳离子染料类。
酸、碱性染料的界定并非由染料溶液的pH值决定的,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说,助色基团带正电荷的染料为碱性染料,反之则为酸性染料。
碱性染料pH不一定大于7,酸性染料pH不一定小于7。使用龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液等碱性染料,这些染料是以龙胆紫或洋红溶解于醋酸溶液中制——配制后的龙胆紫溶液pH值约小于7(呈酸性)。
拓展:
染色体(Chromosome
),是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体(染色质),其本质为双股螺旋之脱氧核糖核酸,是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体,是遗传物质基因的载体,与生物基因有密切关系。染色体的主要化学成份是脱氧核糖核酸和5种称为组蛋白的蛋白质。
可用龙胆紫、醋酸洋红溶液等碱性染料染色。
1、染色体染色剂:
醋酸-洋红染液
醋酸-地衣红染液,龙胆紫染液,甲苯胺蓝染液配置方法。
配方一
醋酸-洋红染液
取45毫升冰醋酸,加蒸馏水55毫升,煮沸后徐徐加入洋红1克,搅拌均匀后加入1颗铁锈钉,煮沸10分钟,冷却后过滤,贮存在棕色瓶内。
配方二
醋酸-地衣红染液
取45毫升醋酸,跟55毫升蒸馏水相混,加热,徐徐加入地衣红粉末1~2克,搅拌溶解后,缓缓煮沸2小时。冷却后过滤,贮存在棕色瓶里。
配方三
龙胆紫染液
取1克龙胆紫,用少量蒸馏水溶解后,加蒸馏水,稀释到100毫升,保存在棕色瓶内。
配方四
甲苯胺蓝染液
取0.5克甲苯胺蓝,溶解在100毫升蒸馏水中,即成0.5%甲苯胺蓝水溶液。
2、观察染色体行为一定要保持细胞的活性,用碱性颜料可以在不影响的情况下观察到染色体。酸性(碱性)染色剂的界定并非由染料溶液的pH值决定的,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说,助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂,反之则为酸性染色剂。