醋酸致痛小白鼠原理

苯巴比妥钠具有良好的抗癫痫和抗惊厥作用，故其可以用于惊厥的治疗。而尼可刹米可以提高机体神经中枢的兴奋性，从而造成机体惊厥，故用尼可刹米复制惊厥模型后用苯巴比妥钠进行治疗，从而观察苯巴比妥钠的抗惊厥作用。 方法 分别前后腹腔注射苯巴比妥钠和尼可刹米后，观察惊厥发生的情况从而观察苯巴比妥钠的抗惊厥作用。 结果与分析 用苯巴比妥钠的小鼠惊厥率为0，而没有用的小鼠惊厥率高达100%，死亡率达50%，比较可以发现苯巴比妥钠具有良好的抗惊厥作用。

惊厥是由于中枢神经系统过度兴奋而引起的全身骨骼肌强烈的不随意收缩，出现强直性或者阵挛性抽搐。苯巴比妥钠属于苯巴比妥类药物，具有良好的中枢抑制作用，故具有抗癫痫和抗惊厥作用。本实验观察其抗惊厥作用。尼可刹米是一种呼吸兴奋剂，中毒剂量时可以造成机体惊厥甚至是死亡。由于尼可刹米的作用比较强而且本实验使用的是中毒剂量，故而应先腹腔注射一定量的苯巴比妥钠后，经过一定时间后再腹腔注射一定量的尼可刹米，观察有无惊厥的出现从而确定苯巴比妥钠的抗惊厥作用。

1 实验材料

1）实验动物：小白鼠

2）实验药品：苯巴比妥钠，尼可刹米，生理盐水

3）实验用具：注射器，电子称，小白鼠笼

2 实验步骤

1）每组取四只小鼠，称重，并分别编号为1,2,3,4号。

2）1,2两只小鼠腹腔注射苯巴比妥钠，0.1ml/10g，3,4两只小鼠腹腔注射生理盐水作为对照组，0.1ml/10g。

3）15min后，分别为四只小鼠注射尼可刹米，0.1ml/10g，并记录号时间。

4）观察并记录四只小鼠是否出现惊厥或者死亡。

3 实验结果

经过如上实验可以得到如下结果：表1

表1

对照组/实验组惊对照组惊实验组死对照组死亡组别 实验组/只 只 厥/只 厥/只 亡/只 /只

1 2 2 0 2 0 1 2 2 2 0 2 0 1 3 2 2 0 2 0 1 4 2 2 0 2 0 1 总数 8 8 0 8 0 4 注：实验组为注射苯巴比妥钠的小鼠，对照组为注射生理盐水的小鼠

通过计算百分率可得表2

实验惊厥百分率

0% 表2 对照惊厥百分率 实验死亡率 100% 0% 对照死亡率 50% 4 实验分析

由以上实验结果可以看到，注射苯巴比妥钠的小鼠没有出现惊厥，也没有死亡。而注射生理盐水的小鼠惊厥出现百分率高达100%，

且死亡率达到50%，通过比较两组实验结果，就可以明显的发现，苯巴比妥钠具有良好的抗惊厥作用，它是一种中枢神经系统抑制药，主要通过增强GABA 作用以及减弱谷氨酸作用而实现抗惊厥作用。

二 镇痛实验

摘要 目的 吗啡属于阿片类镇痛药，具有强大的镇痛作用，通过热刺激（热板法）或者化学刺激的方式引起小鼠疼痛，在经过吗啡镇痛后观测其痛阈的改变从而观察吗啡的镇痛作用，从而了解其镇痛效果和机制。 方法 热板法和化学刺激法 结果与分析 吗啡对热刺激或者化学刺激都具有良好的镇痛作用。

吗啡是阿片类镇痛药的代表药，具有良好的镇痛作用，其主要通过激动阿片受体从而产生镇痛作用，是临床常用药，也属于管制药。当给与一定的温度刺激时，小鼠会产生痛觉，小鼠由于脚部的疼痛而发生疼痛反应，从而出现舔后足的现象。出现此现象越快说明疼痛的潜伏期短，也就是痛阈越低。因此，可以通过比较小鼠出现舔足现象的时间来比较痛阈的大小。同理，给与小鼠腹腔化学刺激时，小鼠会出现扭体的现象。

1 实验材料

1) 实验动物：小白鼠

2) 实验药品：吗啡，生理盐水，醋酸

3) 实验器材：注射器，Woolfe 热板，电子称，秒表，鼠笼。 2 实验步骤

2-1 热板法

1）打开热板预热。取小鼠，筛选舔足时间在5s-30s之间 的小鼠，称重，分作两组，每组两只，作标记。

2）选定实验组和对照组，测定每只小鼠的舔足时间，记录。

3）实验组腹腔注射吗啡0.1ml/10g，对照组注射生理盐水0.1ml/10g。

4）给药后分别于15min,30min,45min测小鼠的舔足出现时间，并记录好。

2-2 化学刺激法

1）每组取四只小鼠，随机分作实验组和对照组，称重，做标记。

2）实验组腹腔注射吗啡0.1ml/10g，对照组腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。

3）20分钟后，两组小鼠分别腹腔注射醋酸0.1ml/10g，观察小鼠是否出现扭体现象并记录。

3 实验结果

根据以上实验，热板法可得如下表3的结果：

表3

组别

小鼠编

号 第二组 30给药前 15分钟 30分钟 45分钟 给药前 15分钟 分45分钟

钟 第一组

1 2 3 4 1 2 3 4 实验组均值 对照组均值

11 6 14 15

60 42 15

60 57 14

54 41 15 20

13.59 6.5 10.95 6.15

15 22 第三组

给药前 15分钟 30分钟 45分钟 给药前

25 16 18 19

56 60 45 30

60 60 30 20

60 60 28 18

23.41 14.18 57.76 40.58

43.

34.41 24 21.17 15.8 23 11.01

13.

13.44 57 9.18

10.

6.96 62 12.5 第四组

30

15分钟 分45分钟

钟 31.

25.61 22 20.04 31.17 60 56.76

27.

16.96 78 17.98 60 60 60

13.02 44.70 50.54 41.20 13.85 20.90 18.37 17.11

说明：1 表格中单位为秒。 2 由于第四组小鼠未经过筛选，故而舍去。

由此作出时-效曲线为图1所示：

镇痛与抗惊厥实验报告

而化学刺激法所得结果如下表4所示

组别 1 2 3 4 总数 实验组扭体百

分率 对照组扭体百

分率

实验组/只

2 2 2 2 8 0 100%

表4

实验组扭体/

对照组/只

只

2 0 2 0 2 0 2 0 8 0

对照组扭体/

只 2 2 2 2 8

4 分析

1）从表3及图1 可以看出，用药前实验组和对照组的痛阈几乎一样，而用药后，实验组的痛阈明显高于对照组，这说明吗啡能提高机体的痛阈值，从而具有良好的镇痛作用。

2）图1表明，在经过一段时间的代谢后，机体内的吗啡含量降低，从而痛阈值也跟着下降。

3）同样，表4中显示，注射吗啡后，扭体实验为全阴性而对照组为全阳性，同样说明了吗啡具有良好的镇痛作用。

【名称】

英文名： Polysorbate 80

英文别名： Tween 80 ；

polyoxyethylene 20 oleate ；

polysorbatum 80 ；

(Z) -sorbitan mono -9-octadecenoate poly(oxy1,2 -ethanediyl) derivatives

化学名： 聚氧乙烯 20 山梨坦单油酸酯；

Polyoxyethylene 20 sorbitan monooleate

中文名：聚山梨酯 80

中文别名： 吐温 80

聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯

聚氧乙烯脱水山梨醇油酸酯

乳化剂 T80

乳化剂 T-80

吐温 -80

脱水山梨醇单油酸酯聚氧乙烯醚

聚山梨醇酯

【一般性状描述】 [1]

本品为淡黄色至橙黄色的粘稠液体；微有特臭，味微苦略涩，有温热感。

本品在水、乙醇、甲醇或乙酸乙酯中易溶，在矿物油中极微溶解。

【相对密度】 [1] 1.06~1.09

【黏度】 [1] 350~550mm 2/s（ 25 ℃）

【酸值】 [1] 不得过 2.0

【皂化值】 [1] 45~55

【羟值】 [1] 65~80

【碘值】 [1] 18~24

【过氧化值】 [1] 不得过 10

【鉴别】 [1] 化学鉴别 （ 1）、 化学鉴别 （（ 2）、 化学鉴别 （（ 3）、 化学鉴别 （（ 4）

【检查】 [1] O

O

HO w

O

x

O

y

O

O C17H33

O

z

HO

HO

酸碱度 [1] 5.0 ~7.5

颜色 [1] 不得比对照液深

乙二醇与二甘醇 [1] 乙二醇、二甘醇均不得过 0.01% 。

环氧乙烷和二氧六环 [1] 环氧乙烷不得过 0.0001% ；二氧六环不得过 0.01% 。

冻结实验 [1] 不得冻结

水分 [1] 不得过 3.0%

炽灼残渣 [1] 不得过 0.2%

重金属 [1] 不得过百万分之十

砷盐 [1] 不得过 0.0002%

脂肪酸组成 [1] 取本品约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 置 50 ml 锥 形 瓶 中 ， 加 2% 氢 氧 化 钠 甲 醇 溶

液 2ml ，置 65 ℃ 水 浴 中 加 热 回 流 30 分钟 ， 放 冷 ， 加 14% 三 氟 化 硼 甲 醇 溶 液 2ml ， 在

水 浴 中 加 热 回 流 30 分 钟 ， 放 冷 ， 加正庚烷 4ml ，继续在水浴中加热回流 5分 钟 ， 放

冷 ，加 饱 和 氯 化 钠 溶 液 10ml ，振 摇 、静 置 使 分 层 ，取 上 层 液 ，用 水 洗 涤 3次 ，每 次 用

蒸馏水 4ml ，上 层 液 经 无 水 硫 酸 钠 干 燥 后 ， 作 为 供 试 品 溶 液 。照 气 相 色 谱 法（ 通则 0521 ）

试验。以聚乙二醇 -20M 为固定液的石英毛细管柱 (0. 32mm×30m ， 膜 厚 度 0. 50μm )为

色谱柱，起始温度为 90°C ，以每分钟 20°C 的速率升温至 16 0°C ，维持 1分钟 ；再以

每分钟 2℃ 的 速 率 升 温 至 220 ℃ ，维 持 20 分钟； 进样口温度为 190 °C ； 检 测 器 温 度 为

250°C 。称取 肉 豆 蔻 酸 甲 酯 、棕 榈 酸 甲 酯 、棕 榈 油 酸 甲 酯 、硬 脂 酸 甲 酯、 油 酸 甲 酯 、亚

油酸甲酯与亚麻酸甲酯 对照品适量，用正庚烷溶解并制成每 1ml 中 各 约含 1mg 的溶

液 ，取 1μl 注 入 气 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ，理 论 板 数 按 油 酸 甲 酯 峰 计 算 不 低 于 10000 ，

各色谱峰的分离度应符合要求。取供试品溶 液 1μl 注 入 气 相 色 谱 仪 ，记 录 色 谱 图 ， 按

面积归一化法计算 （ 忽 略 峰 面 积 小 于 0.05% 的 峰 ） ， 含油酸不得少于 58.0% ；肉豆蔻酸

不得大于 5.0% ；棕榈酸不得大于 16.0% ；棕榈油酸不得大于 8.0% ；硬脂酸不得大于 6.0% ；

亚油酸不得大于 18.0% ；亚麻酸不得大于 4.0% 。

甲醛和乙醛 [2] 取本品 0.5g ，精 密 称 定 ，至 10ml 容 量 瓶 中 ，加 入 乙 腈 1ml 溶 解 ，加 入 2,4 -

二硝基苯肼衍生化试剂（取重结晶去除杂质后的 2,4 -二 硝 基 苯 肼 0.25g ，精 密 称 定 ，置

于 50ml 棕 色 容 量 瓶 中 ， 加 乙 腈 40ml ， 混 匀 ， 加 入 浓 盐 酸 3ml ， 再 加 入 乙 腈 溶 解 并 稀 释

至 刻 度 ，得 2,4 -二 硝 基 苯 肼 的 过 饱 和 溶 液 ，临 用 现 配 ） 2ml ，混 匀 ，在 黑 暗 处 40℃ 静置

30 min 后 ，加 乙 腈 稀 释 至 刻 度 ，作 为 供 试 品 溶 液 。精 密 称 取 甲 醛 -2,4 二 硝 基 苯 腙 和 乙 醛

-2,4 二 硝 基 苯 腙 对 照 品 适 量 ，用 乙 腈 溶 解 并 稀 释 为 每 1ml 含甲醛 -2,4 二 硝 基 苯 腙 和 乙 醛

-2，4二 硝 基 苯 腙 分 别 为 300 μg和 800 μg的 溶 液 作 为 对 照 品 溶 液 。照 高 效 液 相 色 谱 法 （ 通

则 0512 ） 测 定 ， 用 八 烷 基 键 合 硅 胶 为 填 料 ， 以 水 （ A） 和 乙 腈 （ B） 为 流 动 相 ， 按 表 1

进 行 梯 度 洗 脱 ， 检 测 波 长 为 360nm ， 柱 温 为 30℃ 。 精 密 量 取 对 照 品 溶 液 和 供 试 品 溶 液

各 20μl 注 入 液 相 色 谱 仪 ， 记 录 色 谱 图 。按 标 准 曲 线 法 分 别 计 算 甲 醛 和 乙 醛 的 含 量 。含

甲醛不得过 0.003 %， 乙 醛 不 得 过 0.01% 。

表 1：流动相梯度表

时间（ min ） 流动相 A（ %） 流动相 B（ %）

0 65 35

11 20 80

15 0 100

16 65 35

【类别】 聚山梨酯 80 在药用辅料中作为增溶剂 、 乳化剂 和蛋白稳定剂 等。

【包装与贮藏】 聚山梨酯 80 应置于密封容器中、避光、阴凉干燥处贮存。

注释：

【功能性相关指标】

聚山梨酯 80 可作为表面活性剂；乳化剂；增溶剂；润湿剂。

功能性指标：（ 1） 临界胶束浓度（ CMC ） ；（ 2） 亲水亲油平衡值（ HLB ） ；（ 3）黏

度；（ 4）组成；（ 5）表面张力等

（ 1） 临界胶束浓度（ CMC ）

方法：芘荧光光谱法

以丙酮为溶剂配制 0.012mg/ml 的芘溶液。称取适量聚山梨酯 80 样品加水定容至 50ml ，

使其浓度成为 1μg/ml 、10 μg/ml 、15 μg/ml 、20 μg/ml 、22 μg/ml 、25 μg/ml 、28 μg/ml 、30 μg/ml 、

35 μg/ml 、40 μg/ml 、45 μg/ml 、50 μg/ml 的系列浓度 。向顶空瓶中分别加入 0.1ml 上述芘 -丙酮

溶液，挥干溶剂，再分别向上述顶空瓶中加入 10ml 上述系列浓度的聚山梨酯 80 水溶液，拧

紧瓶盖 ， 45℃ 条件下水浴 2h ， 采用荧光分光光度计在 25℃ 条件下分别测定各浓度溶液荧光

光谱。荧光扫描激发波长： 335nm ，发射光谱范围： 350nm~450nm ，激发狭缝设置为 5.0nm ,

发射狭缝设置为 2.5nm 。 I1/I3 对浓度作图 (I1/I3 为 在 374 nm 处荧光强度与在 384 nm 处的

比值 )，采用 Boltzmann 曲线拟合法求出其临界胶束浓度。

厂家 批号 CMC （ ug/ml) RSD%

A BCBT8094 29.81 2.3

B 20100403 33.66 1.7

C 20100501 36.23 1.9

D C-05 -181101 23.57 4.0

E 20180102 -3 32.20 1.5

F 20130822 28.91 1.1

（ 2） 亲水亲油平衡值（ HLB ）

标准曲线的绘制：按不同质量比配成各种 HLB 值的混合物。混合表面活性剂的 HLB 值

计算公式为： HLB 0=（ WA HLB A+W BHLB B）／ (W A+W B) [HLB 0为复配表面活性剂的 HLB 值，

WA为其中一种表面活性剂组分的质量， HLB A为其 HLB 值， WB为另一种表面活性剂组分

的质量， HLB B为其 HLB 值 ]，分别称取不同质量比的聚山梨酯 20 （ HLB A值 16.7 ）和司盘

80（ HLB B值 4.3 ）混合物 0.5 g 于 100 ml 锥形瓶中，加入 10 ml 异丙醇／甲苯的混合溶剂 (体

积比为 100:5) ，控制温度在 40℃ ，锥形瓶底放一张三号字体的白纸 ，用滴定管边滴定边摇晃

锥形瓶且滴定过程中要保持恒温，三号字变模糊时为滴定终点，记录消耗蒸馏水的体积，以

水数的对数值为 X 轴， HLB 值为 Y 轴，绘制标准曲线图。

编号 1 2 3 4 5 6

聚山梨酯 20(g) 0.0000 0.1157 0.1963 0.3001 0.4031 0.4992

司盘 80(g) 0.5027 0.4050 0.3028 0.2071 0.0996 0.0000

聚山梨酯 80 的 HLB 值测定方法：取 0.50 g 聚山梨酯 80 ，精密称定，于 100 ml 锥形瓶

中，加入 10 ml 异丙醇／甲苯的混合溶剂 (体积比为 100:5) 溶解，边滴定边摇晃锥形瓶，控制

温度在 40℃ ， 锥形瓶底放一张三号字体的白纸 ， 三号字变模糊时为滴定终点 ， 记录消耗蒸

馏水的体积。

聚山梨酯 80

样品 新工艺 * 旧工艺 *

HLB 值 15.6 15.3

*注：新工艺： 先聚合后酯化的现代生产工艺 。旧工艺： 先酯化后聚合的传统生产工艺 。

【药典收载情况 】

本品的质量标准主要收载于 ChP2015 ，USP41 -NF36 ，EP9.0 ，JP17 等，各标准收载情况

比较见表 2。

表 2：聚山梨酯 80 各国标准比较表

项目 ChP2015 USP41 -NF36 EP9.0 JP17

品种名称 聚山梨酯 80 Polysorbate 80 Polysorbate 80 Polysorbate 80

外观 + / + +

溶解度 + / / +

相对密度 1.06~1.09 1.06~1.09 约 1.10 约 1.10

黏度 350~550 mm 2/s

（ 25℃ ）

300~500 mm 2/s

（ 25℃ ）

400mPa·s

（ 25℃ ）

400mPa·s

（ 25℃ ）

酸值 不得过 2.0 不得过 2.0 不得过 2.0 不得过 2.0

皂化值 45~55 45~55 45~55 45~55

羟值 65~80 65~80 65~80 65~80

碘值 18~24 / / /

过氧化值 不得过 10 NMT10 不得过 10 不得过 10

鉴别

化学鉴别

（ 1） +

（ 2） +

（ 3） +

（ 4） +

A. 符合脂肪酸

组成检测项；

B. 红外光吸收

光谱

首选 A,D, 其次为

B,C,D,E

A. 红外光吸收光

谱：与对照图谱

一致；

B.羟值；

C.皂化值；

D. 脂肪酸组成；

E.+ （化学鉴别）

脂肪酸组成检查

项

酸碱度 pH5.0~7.5 / / /

颜色 + / / /

乙二醇和二甘

醇

均不得过 0.01% / / /

水分 不得过 3.0% 不得过 3.0% 不得过 3.0% 不得过 3.0%

环氧乙烷和二

氧六环

环氧乙烷：不得

过 0.0001%

二氧六环：不得

过 0.001%

环氧乙烷：不得

过 1ppm

二氧六环：不得

过 10ppm

环氧乙烷：不得

过 1ppm

二氧六环：不得

过 10ppm

环氧乙烷：不得

过 1ppm

二氧六环：不得

过 10ppm

炽灼残渣 不得过 0.2% 不得过 0.25% 不得过 0.25% 不得过 0.25%

重金属 不得过百万分之

十

不得过 10ppm / 不得过 20ppm

砷盐 不得过 0.0002% / / /

脂肪酸组成 油酸 ≥58.0% ；

肉豆蔻酸

≤5.0 %；

棕榈酸 ≤16.0 %；

棕榈油酸

≤8.0 %；

硬脂酸 ≤6.0 %；

亚油酸 ≤18.0 %；

亚麻酸 ≤4.0 %；

油酸 ≥58.0% ；

肉豆蔻酸

≤5.0 %；

棕榈酸 ≤16.0 %；

棕榈油酸

≤8.0 %；

硬脂酸 ≤6.0 %；

亚油酸 ≤18.0 %；

亚麻酸 ≤4.0 %；

油酸 ≥58.0% ；

肉豆蔻酸

≤5.0 %；

棕榈酸 ≤16.0 %；

棕榈油酸

≤8.0 %；

硬脂酸 ≤6.0 %；

亚油酸 ≤18.0 %；

亚麻酸 ≤4.0 %；

油酸 ≥58.0% ；

肉豆蔻酸

≤5.0 %；

棕榈酸

≤16.0 %；

棕榈油酸

≤8.0 %；

硬脂酸 ≤6.0 %；

亚油酸

≤18.0 %；

亚麻酸 ≤4.0 %；

【配伍禁忌】

聚山梨酯 80 同多种物质特别是苯酚、鞣酸、焦油及焦油类物质会发生变色和 /或沉淀反

应。在聚山梨酯 80 存在下，防腐剂羟苯酯类的抗菌活性减低。

【来源和制法】

聚山梨酯 传统合成工艺是 由梨（糖）醇通过三步反应制得。首先，山梨醇脱水形成去水

山梨糖（环状山梨酐）；去水山梨糖同脂肪酸，如油酸或硬脂酸酯化生成己糖酯；最后，在

催化剂作用下再同环氧乙烯反应生成聚山梨酯。

【安全性】

世界卫生组织作过有关聚山梨酯 20 、 40 、 60 、 65 、 80 可接受的日摄取量的评估，按总

聚山梨酯计算，日摄取量可高达每千克体重 25mg 。

静注毒性中等、胃肠道摄取毒性中等、对眼有刺激性。为实验性致癌物，对生殖有影响。

有致突变的报道。 国内外报道的聚山梨酯 80 的不良反应有：类过敏 反应、溶血性、肝毒性、

肺毒性、外周神经毒性、细胞毒性等。此外，聚山梨酯 80 还会影响生物膜的结构和功能，

影响药物吸收，增强药物的 BBB 渗透性，因用量不同而对肿瘤产生促进或抑制的作用。

LD 50 (小鼠， IP) ： 7.6g/kg

LD 50 (小鼠， IV) ： 4.5g/kg

LD 50 (小鼠，口服 )： 25g/kg

LD 50 (大鼠， IP) ： 6.8g/kg

LD 50 (大鼠， IV) ： 1.8g/kg

【使用 说明 】

遵守材料操作的环境和数量相适应的注意事项。注意眼睛保护，并戴手套。

【 监管规定现状 】

聚山梨酯 80 被视为安全的表面活性剂，美国 FDA 允许在食品、药品中添加聚山梨酯

80 ，并将其列入 GRAS ，同时收载在非活性组分数据库中；在英国，聚山梨酯 80 允许在注

射和非注射剂中使用；日本监管部门称聚山梨酯 80 是较好的表面活性剂，其用量最高可达

5% （ w/w ） 。

【在制剂中的使用情况】见表 3

表 3：聚山梨酯 80 在制剂中的应用情况

给药剂型 给药途径 处方最大用量

混悬剂 耳部 5%

注射剂 关节内 0.4%

注射剂 囊内 0.2%

注射剂 肌内 12%

注射剂 滑膜内 0.2%

注射剂 静脉 12%

注射剂 静脉 50%

喷雾剂 鼻部 10%

乳剂 眼部 4%

胶囊剂 口服 418.37mg

颗粒剂 口服 20mg

栓剂 直肠 72.15mg

注射剂 皮下 0.3%

面霜 外用 15%

洗涤剂 外用 9.4%

栓剂 阴道 28mg

【应用案例】

薄荷水

处方组成 处方解析

薄荷叶 API

聚山梨酯 80 分散剂、增溶剂

乙醇 溶剂

水 溶剂

小鼠的饲养管理非常繁琐，要求饲养人员具有高度的责任心，随时检查小鼠状况，出现问题立即加以纠正。下面是我精心为你整理的小鼠的饲养方法，一起来看看。

1. 饲喂

小鼠胃容量小，随时采食，是多餐习性的动物。成年鼠采食量一般为3～7克/天，幼鼠一般为1～3克/天。应每周添料3～4次，在鼠笼的料斗内应经常有足够量的新鲜干燥饲料，在小鼠大群饲养中，每周应固定两天添加饲料，其它时间可根据情况随时注意添加。

根据小鼠不同阶段的生长发育特点，应有不同的给饲标准。由于种鼠群和生产鼠群交配繁殖频繁，尤其生产种母鼠的负担重，能量消耗大，因此除供给足够的块料外，还要定时饲喂少量葵花籽、麦芽和拌有鸡蛋的软料。葵花籽供应量为0.5～1克/天/只成年鼠。而麦牙和软料由于微生物条件较难控制，目前趋于淘汰不用，而致力于颗粒料的全价营养，即用维生素合剂代替。

2. 给水

用饮水瓶给水，每周换水2～3次，成年鼠饮水量一般为4～7ml/天，要保证饮水的连续不断，应常检查瓶塞，防止瓶塞漏水造成动物溺死或饮水管堵塞使小鼠脱水死亡。小鼠在吸水过程中，口内食物颗粒和唾液可倒流入水瓶。为避免微生物污染水瓶，换水时应清洗水瓶和吸水管。严禁未经消毒的水瓶继续使用。

3. 清洁卫生和消毒

每周应至少更换两次垫料。换垫料时将饲养盒一起移去，在专门的房间倒垫料，可以防止室内的灰尘和污染。一级以上动物的垫料在使用前应经高压消毒灭菌。

要保持饲养室内外整洁，门窗、墙壁、地面等无尘土。

坚持每月小消毒和每季度大消毒一次的制度。即每月用0.1 %新洁尔灭喷雾空气消毒一次,室外用3%来苏尔消毒,每季度用过氧乙酸(0.2%)喷雾消毒鼠舍一次。笼具、食具至少每月彻底消毒一次，鼠舍内其它用具也应随用随消毒。可高压消毒或用0.2 %过氧乙酸浸泡。

应有周转用房，在饲养室使用一年时，将小鼠全部移入，原饲养室彻底整修消毒。

4. 动物健康的外观检查

这是检查动物健康状况的一项常规工作。外观判断小鼠健康的标准是：

①食欲旺盛

②眼睛有神，反应敏捷

③体毛光滑，肌肉丰满，活动有力

④身无伤痕，尾不弯曲，天然孔腔无分泌物，无畸形⑤粪便黑色呈麦粒状。

5. 性别鉴别

成年鼠性别很易区分，雄鼠的阴囊明显雌鼠可见阴道开口和五对乳头。

幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定，近者为雌，远者为雄。另外，雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟，而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。再者，雌鼠有比雄鼠明显很多的乳头。

(一)小鼠饲养管理的基本条件

饲养小鼠的基本条件包括鼠舍及笼具设备。由于前述小鼠的生物学特性及习性，小鼠对房舍的建筑和环境条件的要求比较严格，鼠舍应满足基本要求，如温度、湿度、噪音、氨浓度、通风换气和气流等条件。

笼具可采用瓦罐、塑料罐或塑料盒，按照体重20 g的小鼠计算，每只小鼠需要饲养笼具面积0.009～0.063 m2，最好是分为5～10只小笼饲养。非同窝的性成熟雄鼠放在一起时，易互斗并咬伤，所以已配过种的雄鼠应单独饲养。笼具上配以合适的上盖，上盖用金属网，网孔大小以逃不出仔鼠为原则。笼具上应配备饮水器具，以玻璃瓶或塑料瓶配以瓶塞组成，瓶塞中间打孔插入铝管或两端烧钝的玻璃管作为饮水管，饮水管的内径5～6毫米，外径7～8毫米。笼具内用清洁、干燥的小刨花或锯末作为垫料。笼具应摆放在鼠架上，以节约鼠舍空间。

(二)小鼠的饲料

小鼠的饲料，要求必须保持营养物质的平衡稳定，富含蛋白质，否则会影响生长发育、生产繁殖(如产仔数下降、不愿喂奶、嚼食仔鼠等)和抵抗疾病的能力(尤其在断奶时仔鼠死亡率高)。

小鼠对维生素、矿物质的要求也比较高，长期缺乏这些营养物质时，仔鼠生长缓慢，并出现死亡。另外，小鼠的饲料不宜经常更换，如果饲料不稳定，易引起小鼠生长停滞、繁殖率下降等情况发生。

小鼠饲料采用块料，一般是按照配方制作成块料后烘干。我们根据当地的饲料来源，常用的小鼠饲料基础配方为：白面40 %，玉米面25 %，麸皮20 %，豆粉15 %。混合后另加：鱼粉4 %，鸡蛋1 %，酵母粉1 %，骨粉3 %，食盐1 %，鱼肝油1 %。充分混合，加温水拌匀，压实切块，晒干烘干。烘烤的温度不宜超过80 ℃，时间不能太长，否则容易破坏维生素等营养成分。制作小鼠饲料的原料及成品饲料要包装严密，防止污染，放置在干燥、凉爽的环境中。饲料不宜久放，因存放时间过久，营养物质损失过多，则不能满足小鼠的生理需要。对清洁级小鼠，所用饲料应经过灭菌。

(三)小鼠的饲养管理

小鼠采食以夜间为主，应在每天下午加满料块及饮水，并于次日早上检查，补充缺料笼具的料块，不一定每笼必加。

管理要求如下：

温度：18～22 ℃，每日观察温度，必要时调整温度。

相对湿度：50～60%，每日用干湿球温度计估计湿度，必要时采取措施调整湿度。

噪音：60分贝以下

照明：10～14小时，每日8:00开灯，18:00～20:00关灯。

氨气：20 ppm以下

换气：8～20次/小时

气流：10～25厘米/分

笼具：一般每周换一次小鼠笼具内的垫料，每月对笼具洗涤、消毒一次。

饮水瓶：供应清洁无污染的饮水。每3天洗一次饮水瓶，并注意添加新鲜洁净的饮水。每月煮沸消毒一次。

饲养室：室内每月用0.1%新洁尔灭喷雾消毒每季度用过氧乙酸熏蒸消毒。严禁非本室工作人员随意进入。每日观察温度、并用干湿球温度计估计湿度，必要时调整温度，或采取措施调整湿度。

(四)小鼠的性别鉴定和抓取与保定方法

雌鼠可见明显的阴道开口和五对乳头，肛门与外生殖器距离较近雄鼠可见明显的阴囊，肛门与外生殖器距离较远。

保定小鼠时，用右手从笼盒中将小鼠尾部抓住并提起，放在笼盖(或表面粗糙的物体)上，轻轻向后拉鼠尾，在小鼠向前挣脱时，用左手的拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤，无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部，中指固定其前肢，并调整好小鼠在手中的姿势。抓取小鼠的整个动作要快，切不可粗暴，否则可能把小鼠捏伤。