怎样取出质粒
质粒大量提取之碱裂解法
该法是R．Treisman尚未发表的方法，同时也是Brinboim和Doly(1979)及Ish-Horowicz和Burke(1981)所用方法的改进。该方法对于目前使用的所有大肠菌菌株都卓有成效，并可与随后的纯化步骤，如聚乙二醇沉淀或氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心等，一并联合使用。注：括号中给出的体积可适用于未经氯霉素处理的培养。
试验准备：
1、 溶液I：50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/L EDTA(pH8.0)溶液I可成批配制，在10 lbf/in2(6.895x104Pa)高压下蒸气灭菌15min，贮存于4℃。
2、 溶液Ⅱ: 0.2mol/L NaOH(临用前用10mol/L贮存液现用现稀释）1％SDS 盖紧瓶盖，缓缓颠倒离心瓶数次，以充分混匀内容物。于室温放置5-10分钟。当溶液的pH值低于8.0时，溶菌酶不能有效工作。防止NaOH接触空气中的CO2所以要现用现配。
3、 溶液Ⅲ：5mol/L乙酸钾 60ml 冰乙酸 11.5ml 水 28.5ml。所配成的溶液对钾是3mol/L，对乙酸根是5mol/L。
溶菌酶溶液: 10mg/ml,溶于10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)。
试验步骤：
1 将冼过的500ml 培养物的细菌沉淀物,重悬于10ml（18ml）溶液I中。
2 加1ml(2ml)新配制的溶菌酶溶液。
3 加20ml(40ml)新配制的溶液Ⅱ。
4、 加15nl(20ml)用冰预冷的溶液Ⅲ。封住瓶口，摇动离心瓶数次以混匀内容物，此时应不再出现分明的两个液相。于冰上放置10min，会出现一白色絮状沉淀。沉淀应包括染色体DNA、 高分子量RNA和钾－SDS－蛋白质－膜复合物。
5、 用SorvallGS3转头（或与其相当的转头）于4℃以4000rpm离心15min，使转头自然停止转动。如果细菌碎片贴壁不紧，则可以5000rpm再度离心20min， 然后尽可能将上清全部转到另一瓶中，弃去残留在离心管内的粘稠状液体。未能形成致密沉淀块通常是由于溶液Ⅲ与细菌裂解物混合不充分。
6、 用4层干酪包布把上清过滤至一250ml离心瓶中，加0.6体积的异丙醇，充分混匀，于室温放置10min。
7. 用Sorvall GS3转头（或与其相当的转头）于室温以500rpm离心15min，回收核酸。盐也会在4℃离心时沉淀下来。
8、 小心倒掉上清，敞开瓶口倒置离心瓶使残余上清液流尽，室温下用70％乙醇洗涤沉淀。倒出乙醇，并除去附于瓶壁的所有液滴，室温下将瓶倒置放在纸巾上，使最后残余的痕量乙醇挥发完全。
9、 用3ml TE(pH8.0)溶解核酸沉淀。
CAS: 111-55-7
分子式: C6H10O4
分子质量:146.14
沸点: 186-187℃
熔点: -41℃
中文名称: 乙二醇二乙酸酯；1,2-乙二醇二乙酸酯
英文名称: Ethylene glycol diacetate；1,2-Ethanediol, diacetate；ethylene glycol, diacetate；1,2-diacetoxyethane；1,2-ethanediol diacetate；diacetate d'ethylene glycol；ethanediol diacetate；ethylene acetate；ethylene diacetate；ethylene diethanoate；ethylene glycol acetate
性质描述: 无色液体。熔点-31℃，沸点190-191℃，相对密度1.1063（20/20℃），折光率1.4159，闪点82℃。能与乙醇；乙醚；苯混溶，能溶于7份水。
生产方法: 由1,2-二溴乙烷与乙酸钾反应而得。
用途: 用作油类；纤维素酯类；炸药的溶剂。
没什么影响，柏金(Perkin)反应是指芳香醛与酸酐在碱的催化下，发生亲核加成反应，脱去一分子羧酸，生成α，β-不饱和芳酸的反应。乙酸钾又称醋酸钾，分子式是C2H3KO2，分子量为98.1423，该品用作脱水剂、纤维处理剂和分析试剂。乙酸甲，冰乙酸与氢氧化钾反应而得，.取碳酸氢钾2000g，加入水1000g。在加热和搅拌下慢慢加入98%醋酸650g。有大量二氧化碳气体产生。控制加酸速度，使溶液不致溢出。加完醋酸后，煮沸溶液约半小时，稍冷后过滤。在不断搅拌下蒸发滤液至温度达160～180℃，此时大部分结晶析出。用力搅拌并冷却，抽滤出结晶。用氢氧化钾中和醋酸水溶液，浓缩溶液使结晶析出，所得结晶在180℃下干燥1日。该品用作脱水剂、纤维处理剂和分析试剂。医药工业中作为青霉菌培养基，在可的松醋酸酯、氢化泼尼桦醋酸酯、地塞米松醋酸酯、倍他美松、肤轻松醋酸酯等生产中，都要用乙酸钾作原料。用作分析试剂和催化剂。用作分析试剂，调节ph值。用作干燥剂。制造透明玻璃。用于医药工业。在熔融状态时可用于处理氟塑料，295℃/30min，改善表面的粘接性能。还用作脱水剂、缓冲剂。亦可以催化CTBN端羧基与环氧基的反应。.检定酒石酸，干燥剂，调节pH值，制造透明玻璃。 医药工业中作为青霉菌培养基，在可的松醋酸酯、氢化泼尼桦醋酸酯、地塞米松醋酸酯、倍他美松、肤轻松醋酸酯等生产中，都要用乙酸钾作原料。
根据需要的浓度和溶液的量，准确称取一定量的乙酸钾。将称量好的乙酸钾放到烧杯里用蒸馏水溶解，搅拌使溶解完全，然后倒入试剂瓶里，烧杯用蒸馏水洗三次，也转移到试剂瓶了。最后在试剂瓶里加满水，摇匀。就是需要的乙酸钾溶液。
