乙醇提取液蒸干浓缩液后加盐酸溶解的意义

用乙醇沉淀法浓缩质粒DNA：

提取液中加入等体积预冷的5mol/L

Licl

充分混匀，1000rpm

4℃离心15min，取上清。

加等体积异丙醇，混匀，室温放置10min，10000rpm

4℃离心15min。

弃上清，纯点加入70%乙醇洗涤一次，沉淀风干10~15min。

500ul，含RNA酶的TE（pH8.0）溶解沉淀，室温放置30min。（将质粒RNaesA混合物用酚：氯仿抽提一次，然后用氯仿抽提一次）

用2.5倍体积无水乙醇沉淀质粒，风干10min。

加1ml灭菌水溶解沉淀，加500ul

PEG-MgCl2溶液，充分混合，室温10min，12000rpm

4℃离心15min。

用70%乙醇重悬沉淀，12000rpm

4℃离心15min。

弃上清，沉淀用70%乙醇处理一次，最后将质粒，溶于500ulTE（pH8.0）中，取1ul质粒DNA，100倍稀释后测OD260，计算DNA的浓度，其余封装，-20℃保存备用。

浓缩液中加乙醇精制的目的：帮助挥发多余的水分，操作关键：提取液精制处理工艺多采用乙醇沉淀法，目前常采用絮凝沉淀、大孔树脂吸附、微孔薄膜滤过、高速离心等新技术除杂质。

因为酒精能与水以任意比例互溶，制备的酒精里通常多少都会有一些水分影响纯度，由于太容易互溶了，而且沸点相差不大，乙醇分子又容易与水分子结合，传统的蒸馏操作无法制备无水乙醇，所以制备过程中需要无水操作，关键在于前期加入CaO除水。

化学性质

乙醇的官能团是羟基（—OH），其化学性质主要由羟基和受它影响的相邻基团决定，主要反应形式是О—H键和C—О键的断裂。羟基的结构特征是氧的电负性很大，分子中的C—О键和O—H键都是极性键，因而乙醇分子中有2个反应中心。由于α-H和β-H受到C—О键极性的影响具有一定的活性，因此它们还能发生氧化反应和消除反应等。

以上内容参考：百度百科-乙醇

把浓缩好的药液用水沉淀。实际上，不同的植物提取黄铜，工艺是不同的。举个例子：

以前做实验提取银杏叶总黄酮，用的工艺如下：

银杏叶加乙醇回流提取3次，合并提取液后浓缩。用硅藻土添加后索氏提取器，乙酸乙酯部位反复经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇梯度洗脱得到粗品。

通常,提取蒽醌类成分,多选用甲醇、乙醇作为提取溶剂.其醇提取液进行浓缩时,要求浓缩至无醇味,目的主要在于防止溶剂残留,有利于后续分离操作.因在后续蒽醌苷类和游离蒽醌类分离过程中,通常采用有机溶剂萃取法,是用与水不相混溶的有机溶剂进行萃取的.若有甲醇、乙醇等溶剂残留,则存在水与醇互溶,醇又与有机溶剂互溶情况,就造成萃取难以分层、乳化或萃取不彻底,蒽醌苷与游离蒽醌类达不到尽可能进行初步分离.

水提醇沉法（水醇法）系指在中药水提浓缩液中，加入乙醇使达不同含醇量，某些药物成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，固液分离后使水提液得以精制的方法。

一般操作过程是：将中药水提液浓缩至1︰1～1︰2（ml︰g），药液放冷后，边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量，密闭冷藏24～48h，滤过，滤液回收乙醇，得到精制液。

操作时应注意以下问题：

①药液应适当浓缩，以减少乙醇用量。但应控制浓缩程度，若过浓，有效成分易包裹于沉淀中而造成损失。

②浓缩的药液冷却后方可加入乙醇，以免乙醇受热挥发损失。

③选择适宜的醇沉浓度。一般药液中含醇量达50％～60％可除去淀粉等杂质，含醇量达75％以上大部分杂质均可沉淀除去。

④慢加快搅。应快速搅动药液，缓缓加入乙醇，以避免局部醇浓度过高造成有效成分被包裹损失。

⑤密闭冷藏。可防止乙醇挥发，促进析出沉淀的沉降，便于滤过操作。

⑥洗涤沉淀。沉淀采用乙醇（浓度与药液中的乙醇浓度相同）洗涤可减少有效成分在沉淀中的包裹损失。

用真空冷冻干燥机。如果没有的话可以考虑冰浴。

浸渍法：浸渍法是将原料用适当的溶剂在常温或温热条件下浸泡出有效成分的一种方法。具体做法是: 取适量粉碎后的原料，置于加盖容器中，加入适量的溶剂并密盖，间断式搅拌或震摇，浸渍至规定时间使有效成分浸出。取上清夜，过滤，压榨残渣，合并滤液和压榨液， 过滤浓缩至适宜浓度， 可进一步制备流浸膏， 浸膏，片剂，冲剂等。

80%乙醇要现配主要是因为乙醇会挥发，配好后分装成数管，每次用一管的操作，理论上没什么问题。但实际操作下来，就会发现有点不合理，例如配好后分装成多少管？数量少了没必要，数量多了，操作的时间长了，乙醇也是一直在挥发的呀。还有，每次提取如果只是提一个样品的话那还好，数量多的话，那些分装使用的管就显得很麻烦了。