消除甲醛和二甲苯的方法有哪些?
去除甲醛的方法:\x0d\x0a通风法去除甲醛\x0d\x0a 通过室内空气的流通,可以降低室内空气中有害物质的含量,从而减少此类物质对人体的危害。冬天,人们常常紧闭门窗,室内外空气不能流通,不仅室内空气中甲醛的含量会增加,氡气也会不断积累,甚至达到很高的浓度。\x0d\x0a植物除味法\x0d\x0a中低度污染可选择植物去污:一般室内环境污染在轻度和中度污染、污染值在国家标准3倍以下的环境,采用植物净化能达到比较好的效果。根据房间的不同功能、面积的大小选择和摆放植物。一般情况下,10平方米左右的房间,1.5米高的植物放两盆比较合适。\x0d\x0a活性炭吸附\x0d\x0a活性炭除甲醛是一种比较廉价和实用的方法,特点是物理吸附,吸附彻底,不易造成二次污染。活性炭的物理作用除臭,去毒;无任何化学添加剂,对人身无影响。\x0d\x0a\x0d\x0a去除二甲苯的方法: \x0d\x0a可以用石蜡,将石蜡熬融,然后灌进去.二甲苯可以溶解石蜡,因此,石蜡就可以吸收二甲苯了。\x0d\x0a如何避免家居二甲苯污染:\x0d\x0a\x0d\x0a1、家具购置,要让商家提供正规合格的检测报告,有条件的,最好在使用前让家具在通风条件下多放置一段时间。\x0d\x0a2、装修时间为一年以上且房间内并无明显异味,可选择生物降解法。比如在家中养殖芦荟、虎皮兰、吊兰、绿萝等植物,同时在天气条件允许下每日开窗通风一至两小时,可有效使室内污染物挥发。\x0d\x0a3、要保证房间的通风率和采光率。\x0d\x0a4、注意施工质量,防止不合理的施工程序或施工工艺影响污染物正常挥发扩散,造成室内环境污染。\x0d\x0a5、居住时如明显感觉到室内有异味并伴有身体不良反应(眼睛流泪、呼吸不顺畅、皮肤红肿等),经权威部门进行室内空气检测后各项数值超标,可选择专业的室内环境治理公司进行治理。\x0d\x0a6、选择环保指标优越的装饰材料,注意向生产商或销售商索要检测报告。\x0d\x0a7、家庭装修要尽量简约化。\x0d\x0a8、严把装修验收关,装修结束后2~4周,请有专业资质的检测机构对室内环境进行检测。若检测结果超标,可采取相应治理手段,合格后再入住。
怎样清洗二甲苯
全能乳化剂能完全乳化清洗二甲苯,
全能乳化剂简介
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二、乳化效果是奈米除油乳化剂的二倍以上,是常规乳化剂的10—40倍以上;
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二、非常广泛的使用效能
1、广泛用于清洗玻璃、瓷砖、灶台、油烟机、卫生间、马桶、外墙、麻将等硬表面。
2、广泛用于清洗各类衣物、酒店桌布、各种工作服、布料等布类。
3、广泛用于清洗碗筷、餐桌、器皿、杯盘、瓶子等餐具清洗消毒,是餐具消毒中心的首选清洗剂。
4、广泛用于清洗车辆的内饰、仪表和整车清洗。
5、广泛用于清洗全属锈体。
6、广泛用于油污管道的疏通。
7、广泛用于各种乳化剂的生产,是分类乳化剂的主要原料。
8、广泛用于洗洁精、洗手液、洗手粉、洗车液、洗衣液等各种清洗剂的新增助剂。
9、广泛用于洗碗机、洗衣机等机械洗涤的主洗剂。
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11、广泛用于其他行业的乳化。
怎么清洗邻二甲苯邻二甲苯与乙醇、乙醚、丙酮混溶,从价格方面考虑,用乙醇清洗就可以了
二甲苯能用来清洗油漆泵吗可以,也可以用香蕉水的,最好是用脱漆剂。不过,这个得把这个泵浸泡在里面才行。
怎么清除二甲苯可以用石蜡,将石蜡熬融,然后灌进去。二甲苯可以溶解石蜡,因此,石蜡就可以吸收二甲苯了。
二甲苯怎么清除?用活性炭吸附
高压橡胶钢丝管能用二甲苯清洗吗?二甲苯、汽油都会腐蚀、溶胀橡胶皮层,不建议试用!如果使用请擦拭后用大量清水冲洗干净!
邻二甲苯,间二甲苯,对二甲苯的熔沸点顺序怎样?为什么熔点和沸点顺序不一样?熔点:邻<间<对
沸点:邻>间>对
在这三个异构体里面,邻二甲苯的分子对称性最不好,两个甲基在同一侧不利于分子间接近,所以熔点最低而沸点主要看分子极性,对二甲苯极性最小,所以沸点最低
二甲苯有邻、间、对三种形式,在三个当中,邻二甲苯的熔点是最低的,但是它的沸点反而是最高的,而对二甲苯正好相反。
对二甲苯形成晶体的时候堆积的比较紧密,因此晶格能比较大,所以熔点比较高。而邻二甲苯两个甲基位于一侧,很难像对二甲苯一样紧密堆积,因此熔点较低。
对二甲苯是非极性的,邻二甲苯则有一定的极性,因此沸点是对二甲苯最低,邻二甲苯的会高一些。但甲基本身给电子能力不强,三种二甲苯异构体极性差异也就不算大,因此沸点的差别也非常小。
对二甲苯需求量最大,工业上主要还是依靠熔点的差别,冷冻把对二甲苯结晶析出来,再用于制备对苯二甲酸。
类似地可以看到直链烃的熔点随碳数增加呈折线上升状,可见在直链烃中晶格能的影响也是很大的。
物质的熔点,即在一定压力下,纯物质的固态和液态呈平衡时的温度,也就是说在该压力和熔点温度下,纯物质呈固态的化学势和呈液态的化学势相等,而对于分散度极大的纯物质固态体系(奈米体系)来说,表面部分不能忽视,其化学势则不仅是温度和压力的函式,而且还与固体颗粒的粒径有关,属于热力学一级相变过程。
沸腾是在一定温度下液体内部和表面同时发生的剧烈汽化现象。沸点是液体沸腾时候的温度,也就是液体的饱和蒸气压与外界压强相等时的温度。液体浓度越高,沸点越高。不同液体的沸点是不同的。沸点随外界压力变化而改变,压力低,沸点也低。
二甲苯稀释剂能清洗车上刮的油漆?可以,只是需要时间,最好是一边用稀释剂擦拭,一边用细砂纸轻轻地打磨,这样会快一些的。
蜡连续吸收的工艺要
求:
(1)自由气体进口
温度25~30℃;油进
口温度38~45℃;
(2)油进解吸塔温
度120℃左右;富油
加热器出口温度
120℃左右;
(3)贫油冷却器出
口温度38~45℃;吸
收塔底部负压控制在
160毫米水柱。
(4)吸收剂的用量
要保持稳定;
(5)排放空尾气中
的溶剂含量不超过
0.1%(体积)。
2、自由气体吸收工
序的操作要点
(1)及时回收排出的
吸收液体。
(2)经常检测出口
尾气。如不符合标
准,应立即查出原
因,采取上相应措
施,使其达到排放标
准。
(3)按液态石蜡吸
收工艺的要求进行操
作时,吸收油要按浓
度或变质情况及时更
换。
(4)如用引风机
时,要求运转平稳,
保持溶剂系统的负压
稳定。
3、解析塔需要通直
接蒸汽
石蜡的理化性质如下:
一、物理性质
1、又称晶型蜡,通常是白色、无味的蜡状固体,在47°C-64°C熔化,密度约0.9g/cm³。
2、石蜡溶于汽油、二硫化碳、二甲苯、乙醚、苯、氯仿、四氯化碳、石脑油等一类非极性溶剂,不溶于水和甲醇等极性溶剂。纯石蜡是很好的绝缘体,其电阻率为1013-1017欧姆·米。
二、化学性质
1、石蜡的碳原子数约为18~30的烃类混合物,主要组分为直链烷烃(约为80%~95%),还有少量带个别支链的烷烃和带长侧链的单环环烷烃(两者合计含量20%以下)。
2、石蜡不与常见的化学试剂反应,但可以燃烧。工业上可以发生催化裂化反应。
3、石蜡的化学活性较低,呈中性,化学性质稳定,在通常的条件下不与酸除硝酸外和碱性溶液发生作用。
扩展资料:
石蜡的用途:
1、粗石蜡由于含油量较多,主要用于制造火柴、纤维板、篷帆布等。石蜡中加入聚烯烃添加剂后,其熔点增高,粘附性和柔韧性增加 ,广泛用于防潮、防水的包装纸、纸板、某些纺织品的表面涂层和蜡烛生产。
2、将纸张浸入石蜡后就可制取有良好防水性能的各种蜡纸,可以用于食品、药品等包装、金属防锈和印刷业上;石蜡加入棉纱后,可使纺织品柔软、光滑而又有弹性;石蜡还可以制得洗涤剂、乳化剂、分散剂、增塑剂、润滑脂等。
3、全精炼石蜡和半精炼石蜡用途很广,主要用做食品、口服药品及某些商品的组分及包装材料。烘烤容器的涂敷料,用于水果保鲜,电器元件绝缘,提高橡胶抗老化性和增加柔韧性等。也可用于氧化生成合成脂肪酸。
参考资料:百度百科-石蜡
一、物理性质:
1、细小结晶体。
2、熔点70~90℃。
3、相对密度:固体0.89~0.94,液体0.78~0.81(100℃)。
4、折射率1.435~1.445(100℃)。
5、闪点(开杯)260~340℃。
6、溶于非极性溶剂,不溶于极性溶剂。
二、化学性质:
石蜡是矿物蜡的一种, 也是石油蜡的一种,它是从原油蒸馏所得的润滑油馏分经济剂精制、溶剂脱蜡或经蜡冷冻结晶、压榨脱蜡制得蜡膏,再经溶剂脱油、精制而得的片状或针状结晶。
又称晶形蜡,碳原子数约为18~ 30的烃类混合物,主要组分为直链完烃(约为80%~95%),还有少量带个别支链的烷烃和带长侧链的单环环烷烃(两者合计含量20%以下)。 主要质量指标为熔点和含油量,前者表示耐温能力,后者表示纯度。
扩展资料
石蜡的用途
粗石蜡由于含油量较多,主要用于制造火柴、纤维板、篷帆布等。石蜡中加入聚烯烃添加剂后,其熔点增高,粘附性和柔韧性增加 ,广泛用于防潮、防水的包装纸、纸板、某些纺织品的表面涂层和蜡烛生产。
将纸张浸入石蜡后就可制取有良好防水性能的各种蜡纸,可以用于食品、药品等包装、金属防锈和印刷业上;石蜡加入棉纱后,可使纺织品柔软、光滑而又有弹性;石蜡还可以制得洗涤剂、乳化剂、分散剂、增塑剂、润滑脂等。
全精炼石蜡和半精炼石蜡用途很广,主要用做食品、口服药品及某些商品(如蜡纸、蜡笔、蜡烛、复写纸)的组分及包装材料,烘烤容器的涂敷料,用于水果保鲜,电器元件绝缘,提高橡胶抗老化性和增加柔韧性等。也可用于氧化生成合成脂肪酸。
参考资料:百度百科——石蜡
二甲苯溶剂时,即强烈刺激食道和胃,并引起呕吐,还可能引起血性肺炎,应立即饮入液体石蜡,延医诊治。二甲苯蒸气对小鼠的LC为6000*10-6,大鼠经口最低致死量4000mg/kg。
二甲苯对眼及上呼吸道有刺激作用,高浓度时,对中枢系统有麻醉作用。急性中毒:短期内吸入较高浓度本品可出现作。慢性影响:长期接触有神经衰弱综合症,女性有可能导致月经异常。皮肤接触常发生皮肤干燥、皲裂、皮炎。
代谢和降解
在人和动物体内,吸入的二甲苯除3%~6%被直接呼出外,二甲苯的三种异构体都有代谢为相应的苯甲酸(60%的邻-二甲苯、80%~90%的间、对-二甲苯),然后这些酸与葡萄糖醛酸和甘氨酸起反应。在这个过程中,大量邻-苯甲酸与葡萄粮醛酸结合,而对-苯甲酸必乎完全与甘氨酸结合生成相应的甲基马尿酸而排出体外。与此同时,可能少量形成相应的二甲苯酚(酚类)与氢化2-甲基-3-羟基苯甲酸(2%以下)。
残留与蓄积
在职业.3µg/(cm3·min))被吸收,二甲苯蒸气的经皮吸收与直接接触液体相比是微不足道的。二甲苯的残留和蓄积并不严重,上面我们已经说过进入人体的二甲苯,可以在人体的NADP(转酶II)和NAD(转酶I)存在下生成甲基苯甲酸,然后与甘氨酸结合形成甲基马尿酸在18小时内几乎全部排出体外。即使是吸入后残留在肺部的3%-6%的二甲苯,也在接触后的3小时内(半衰期为0.5~1小时)全部被呼出体外。评价接触二甲苯的残留试验,主要是测定尿内甲基马尿酸的含量,也有人建议测定呼出气体中或血液中二甲苯的含量,但后者的结果往往并不准确。由于甲基马尿酸并不天然存在于尿中,又由于它几乎是全部滞留的二甲苯代谢物,因而测定它的存在是最好的二甲苯接触试验的确证。二甲苯能相当持久地存在于饮水中。自来水中二甲苯的浓度为5mg/L时,其气味强度相当于5级,二甲苯的特有气味则要过7至8天才能消失;气味强度为3级时则需4至5天。河水中二甲苯的气味保持的时间较短,这与起始浓度的高低有关,一般可保留3至5天。
迁移转化
二甲苯主要由原油在石油化工过程中制造,它广泛用于颜料、油漆等的稀释剂,印刷、橡胶、皮革工业的溶剂。作为清洁剂和去油污剂,航空燃料的一种成分,化学工厂和合成纤维工业的原材料和中间物质,以及织物的纸张的涂料和浸渍料。二甲苯可通过机械排风和通风设备排入大气而造成污染。一座精炼油厂排放入大气的二甲苯高达13.18~1145g/h,二甲苯可随其生产和使用单位所排入的废水进入水体,生产1吨二甲苯,一般排出含二甲苯300~1000mg/L的废水2吨。由于二甲苯在水溶液中挥发的趋势较强,因此可以认为其在地表水中不是持久性的污染物。二甲苯在环境中也可以生物降解,但这种过程的速度比挥发过程的速率低得多。挥发到空中的二甲苯也可能被光解,这是它的主要迁移转化过程。
二甲苯由呼气和代谢物从人体排出的速度很快,在接触停止18小时内几乎全部排出体外,二甲苯能相当持久的存在于饮水中。由于二甲苯在水溶液中挥发性较强,因此,可以认为其在地表水中不是持久性污染物。二甲苯在环境中也可以生物降解和化学降解,但其速度比挥发低得多,挥发到空气中的二甲苯可被光解。可与氧化剂反应,高浓度气体与空气混合发生爆炸。二甲苯有中等程度的燃烧危险。由于其蒸气比空气重,燃烧时火焰沿地面扩散。二甲苯易挥发,发生事故现场会弥漫着二甲苯的特殊芳香味,倾泄入水中的二甲苯可漂浮在水面上,或呈油状物分布在水面,可造成鱼类和水生生物的死亡。
泄漏应急处理
迅速撤离泄漏污染区人员至安全区,并进行隔离,严格限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴自给正压式呼吸器,穿消防防护服。尽可能切断泄漏源,防止进入下水道、排洪沟等限制性空间。小量泄漏:用活性炭或其它惰性材料吸收。也可以用不燃性分散剂制成的乳液刷洗,洗液稀释后放入废水系统。大量泄漏:构筑围堤或挖坑收容;用泡沫覆盖,抑制蒸发。用防爆泵转移至槽车或专用收集器内,回收或运至废物处理场所处置。迅速将被二甲苯污染的土壤收集起来,转移到安全地带。对污染地带沿地面加强通风,蒸发残液,排除蒸气。迅速筑坝,切断受污染水体的流动,并用围栏等限制水面二甲苯的扩散。
防护措施
呼吸系统防护:空气中浓度较高时,佩戴过滤式防毒面具(半面罩)。紧急事态抢救或撤离时,建议佩戴空气呼吸器。
眼睛防护:戴化学安全防护眼镜。
身体防护:穿防毒物渗透工作服。
手防护:戴橡胶手套。
其它:工作现场禁止吸烟、进食和饮水。工作毕,淋浴更衣。注意个人清洁卫生。
急救措施
皮肤接触:脱去被污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。
眼睛接触:提起眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗。就医。
吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难,给输氧。如呼吸停止,立即进行人工呼吸。就医。
食入:饮足量水,催吐。就医。
四、治理装修污染中的二甲苯的方法有:竹炭吸附法和化学剂反应法(如:KMnO4(H+)aq)!前者为物理作用,后者为化学作用!
灭火方法
喷水冷却容器,可能的话将容器从火场移至空旷处。灭火剂:泡沫、二氧化碳、干粉、砂土。
危险特性
易燃,其蒸气与空气可形成爆炸性混合物。遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与氧化剂能发生强烈反应。流速过快,容易产生和积聚静电。其蒸气比空气重,能在较低处扩散至相当远的地方,遇明火会引着回燃。
燃烧(分解)产物:一氧化碳、二氧化碳。
包装及贮运
采用镀锌铁桶包装,每桶180kg。亦可用槽车装运。
环境危害编辑
污染来源
二甲苯是重要的化工原料,有机合成、合成橡胶、油漆和染料、合成纤维、石油加工、制药、纤维素等生产工厂的废水废气,以及生产设备不密封和车间通风换气,是环境中二甲苯的主要来源。运输、贮存过程中的翻车、泄漏,火灾也会造成意外污染事故。
环境标准
中国(TJ36-79) 车间空气中有害物质的最高容许浓度 100mg/m3(二甲苯)
中国(TJ36-79) 居住区大气中有害物质的最高容许浓度 0.30mg/m3(一次值、二甲苯)
中国(GB16297-1996) 大气污染物综合排放标准(二甲苯)
①最高允许排放浓度(mg/m3):
70(表2);90(表1)
②最高允许排放速率(kg/h):
二级1.0~10(表2);1.2~12(表1)
三级1.5~15(表2);1.8~18(表1)
③无组织排放监控浓度限值:
1.2mg/m3(表2);1.5mg/m3(表1)
中国(待颁布) 饮用水源中有害物质的最高容许浓度 0.5mg/L(二甲苯)
中国(GHZB1-1999) 地表水环境质量标准(I、II、III类水域特定值) 0.5mg/L(二甲苯)
中国(GB8978-1996) 污水综合排放标准 一级:0.4mg/L
二级:0.6mg/L
三级:1.0mg/L
二甲苯混合物
xylene是邻、间、对二甲苯的混合物。这是一种常用的有机溶剂。
二甲苯异构体
异构体有三种,
为对位二甲苯para-, p-xylene,简称PX,沸点138.35℃
为邻位二甲苯ortho-,o-xylene,简称OX,沸点144.42℃
为间位二甲苯meta-,m-xylene,简称MX,沸点139.10℃
三种异构体的分离可以用MFI沸石膜来进行分离,b-orientation的MFI膜可以达到500的分离度。
此外,一般混合二甲苯中还会含有一定量的乙基苯(ethyl-benzene,简称EB,沸点136.19℃)
二甲苯中毒编辑
致病原因
1.制造、使用、贮存、运送甲苯、二甲苯的石油化工业,油漆涂料、染料、塑料、橡胶、皮革、糖精、人造麝香和合成纤维等生产中,发生管道、贮制度意外损坏、阀门漏气等情况下,较长时间大量吸入高浓度甲苯、二甲苯蒸气可以引起急性中毒。
2.在密闭型的贮罐糟内涂刷以甲苯、二甲苯为溶剂的防腐涂料,因无良好通风,大量甲苯、二甲苯蒸气积聚,可使作业工发生急性中毒。曾见报道针织厂窗紧完备的印花车间用含甲苯的洗液水清洗印花强桌面而引起7名女工发生急性甲苯中毒。
一般甲苯、二甲苯空气浓度200~300 mg/立方米吸入8h即可产生轻度中毒症状,3.76g/立方米浓度吸入1h即发生急性中毒,71.4g/立方米浓度下数分钟可使吸入者迅速昏迷、死亡。
3.经皮或误服致急性中毒者,罕见报道。
急救处理
1.立即移至空气新鲜处,必要时给予吸氧。除去沾染衣物及皮肤上毒物。
2.解毒剂可用葡萄糖醛酸内脂(参见急性苯中毒)。
3.对症处理:口服维生素B族、防治脑水肿等。
晚上好,石蜡如果在低温条件下析出说明此时已经达到了它的凝固点无法再溶于二甲苯,建议替换成冰点更低一些的非极性溶剂比如甲苯试试看或许能防冻,而且固体石蜡和芳香烃一样分子量越大冰点越高越容易析出。也可以在混合溶剂里加入少量预先除水的四氢呋喃来降低冰点。
shí là qiē piàn
2 英文参考paraffin section
3 器材
切片刀,切片机,恒温箱,温台,熔蜡炉,蜡杯,酒精灯,蜡铲,展片台,解剖刀,解剖针,解剖剪,解剖盘,培养皿,吸管,镊子,单面刀片,台木,毛笔,洒精灯,包埋纸盒,染色缸,盖玻片,载玻片,玻片盘,树胶,树胶瓶,显微镜,温度计,脸盆,水浴锅。
4 试剂卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、埃利希苏木精染液, 1%伊红酒精溶液,1%盐酸酒精溶液,甘油蛋白粘片剂,郝普特氏粘片剂,中性树胶。1%番红,1%固绿,1%过碘酸,Schiff试剂,0.5%偏重亚硫酸钠溶液,醋酸酐吡啶混合液,0.5%~1%淀粉糖化酶溶液。
5 材料
鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的根、茎、叶等。
6 每个实验小组的用量6.1 器材切片机,切片刀,温台,恒温箱,熔蜡炉,水浴锅等这类几个小组用一台就行;解剖刀,单面刀片,小台木,毛笔一只,蜡铲一个,盖玻片和载玻片30个,脸盆一个,酒精灯各一个,包埋纸盒2~3个,染色缸一个,瓷杯3个,显微镜一台。
6.2 试剂FAA固定液50ml、1%番红100ml、1%固绿100ml、1%过碘酸100ml、Schiff试剂100ml、亚硫酸盐300ml、醋酸酐吡啶混合液100ml、0.5%~1%淀粉糖化酶溶液200ml,石蜡半盒、蜂蜡10块、埃利希苏木精染液100ml、1%伊红酒精溶液100ml、1%盐酸酒精溶液100ml、95%酒精5瓶、二甲苯2瓶,甘油蛋白粘片剂数滴,中性树胶数滴。
6.3 材料小白鼠一只、蚕豆种,小麦和大豆种10~20粒,洋葱和大蒜由实验室统一种,然后取其所需部分。
7 石蜡切片法实例(一)—苏木精伊红对染法
7.1 目的要求1、 熟悉石蜡切片的制作过程。
2、 掌握HE染色的基本原理和染色方法。
7.2 实验原理石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
7.3 实验用品(一) 器材
切片机,切片刀,温台,恒温箱,解剖刀,镊子,剪刀,解剖针,单面刀片,小台木,洒精灯,包埋纸盒,染色缸,烧杯,水盆,熔蜡炉,蜡杯。
(二) 试剂
卡诺(Carnoy)固定液,埃利希苏木精染液,1%伊红酒精溶液,1%盐酸乙醇液,各级酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲苯,甘油蛋白粘片剂,中性树胶。
试剂配法:
1、卡诺氏固定液:
100%酒精3份
冰醋酸 1份
或:100%酒精6份
氯仿 3份
冰醋酸 1份
2、埃利希苏木精染液的配法:
苏木精 1g
纯酒精 50ml
冰醋酸 5 ml
甘油 50 ml
钾矾(硫酸铝钾)约5g(饱和量)
蒸馏水 50 ml
配法:
ⅰ、将苏木精溶于约15 ml的纯酒精中,再加冰醋酸后搅拌。
ⅱ、当苏木精溶解后即将甘油倒入并摇动容器,同时加入其余的酒精。
ⅲ、将钾矾在研钵中研碎并加热,然后将它溶解于水中。
ⅳ、将温热的钾矾溶液一滴一滴地加入上述染液中,并随时搅动。
ⅴ、此液混合完毕,将瓶口用一层纱布包著小块棉花塞起来,放在暗处通风的地方,并经常摇动以促进它的成熟。成熟时间约3~4周。若加入0.2g碘酸钠,可立刻成熟。此液稳定而染色均匀,染核效果良好,不会发生沉淀,长期贮备无妨。此液可分别与伊红等进行二重染色。
3、1%伊红酒精溶液:
伊红1g溶于100 ml95%酒精溶液。
4、1%盐酸乙醇液
盐酸 1份
70%酒精 100份
5、甘油蛋白贴片剂:
蛋白 50 ml
甘油 50 ml
水杨酸钠(防腐剂) 1g
配制时将鸡蛋一个打破入碗或杯中,去蛋黄留下蛋白,用玻棒调打成雪花状泡沫,然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中,经数小时或一夜,即可滤出透明蛋白液。此时在其中再加等量的甘油,稍稍振摇使两者混合。最后加入防腐剂(水杨酸钠)作防腐用。可保存几个月。
(三) 材料
鼠肝
7.4 实验程序1、 取材
颈椎脱臼法处死小鼠,打开腹腔,剪取肝组织(或小肠)。切取的组织块不宜太大,以便固定剂穿透,通常以5mm×5mm×2mm或10 mm×10 mm×2 mm为宜。取下所需要的肝组织,切成一小块2~3mm厚。
取材的注意事项:
(1)取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。
(2)切片材料应根据需要观察的部位进行选择,尽可能不要损伤所需要的部分。
2、固定
将切好的肝组织用生理盐水组织洗一下,立即投入卡诺固定液中固定,固定30~50min。
固定的注意事项:
(1)一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。
(2)有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。
(3)固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1~2次新液。
(4)材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶液中投入相应的标签,以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字,应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。
1、 洗涤
材料经固定后,除乙醇外,组织中的固定液必须冲洗干净,尤其是含有重金属的固定液。因为残留在组织中的固定液,有的不利于染色,有的产生沉淀或结晶影响观察。冲洗方法根据固定液的性质而定,固定液为水溶液的常用水洗涤,固定液含有乙醇的则用50%~70%乙醇冲洗。
2、 脱水
30%、50%、70%、80%、90%各级乙醇溶液脱水各40min,放入95%、100%各两面三刀次,每次20min。各种材料经固定与洗涤后,组织中含有大量水分,由于水与石蜡不能互溶,所以必须将组织中的水分除去。
脱水注意事项
(1)脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。
(2)在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。
(3)在低浓度或纯酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。
(4)在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。
(5)如需过夜,应停留在70%酒精中。
(6)脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象
5、透明
纯酒精、二甲苯等量混合液15min,二甲苯0.5h(或至透明为止),须换一次二甲苯。
由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度的透明状态。
透明注意事项
(1)使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。
(2)更换每级透明剂,动作要迅速,一方面为了不使材料块干涸,另一方面能避免吸收湿气。
(3)在透明过程中, 如果材料周围出现白色雾状,说明材料中的水未被脱净,应退回纯酒精中重新脱水,然后再透明。
6、透蜡
放入二甲苯和石蜡各半的混合液15min,再放入石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ透蜡各20~30分钟。
透蜡的目的是除去组织中的透明剂(如二甲苯等),使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以
便包埋。透蜡时间根据组织的透蜡时间较长,约需1~2d。透蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在55~60℃左右,注意温度不要过高,以免组织发脆。置于恒温箱0.5h。
透蜡注意事项
(1)尽量保持在较低温度中进行,以石蜡不凝固为度;
(2)透蜡温度要恒定,不可忽高忽低;
(3)操作要迅速,力求在最短的时间内完成石蜡透入过程,以免引起组织变硬、变脆、收缩等。
1、 包埋
将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡,一起倒入容器内,然后立即投入冷水中,使其立刻凝固成蜡块。
用于包埋的石蜡的熔点在50~60℃之间,包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素,选择不同熔点的石蜡。一般动物材料常用的石蜡熔点为52~56℃,植物材料用的石蜡熔点为54~58℃。
包埋的操作过程
包埋时,将纸盒放在已经加热的温台上,从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯,倒入包埋用的纸盒中,取出存放材料的蜡杯3,迅速轻轻地用镊子夹取材料平放于纸盒底部(注意切面朝下放置),再用温镊子轻轻拨动材料,使之排列整齐。轻轻将纸盒两侧的把手提起,慢慢地平放在面盆,并立即使它沉入水中,使盒中包埋块迅速凝固。待石蜡完全凝固(约30min)后即可取出备用。
2、 切片
①将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。
②将切片刀固定在刀夹上,刀口向上。
③摇动推动螺旋,使石蜡块与刀口贴近,但不可超过刀口。
④调整石蜡块与刀口之间的角度与位置,刀片与石蜡切片约成15度左右。
⑤调整厚度调节器到所需的切片厚度,一般为4~10微米。
⑥一切调整好后主可以开始切片。此时右手摇动转轮,让蜡块切成蜡带,左手持毛笔将蜡带提起,摇转速度不可太急,通常以40~50r/min。
⑦切成的蜡带到20~30cm长时,右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起,以免卷曲,并牵引成带,平放在蜡带盒上,靠刀面的一面较光滑,朝下,较皱的一面朝上。
⑧用单面刀片切取蜡片一小段,放在载玻上加水一滴,置于放大镜或显微镜下观察切片是否良好。
⑨切片工作结束后,应将切片刀取下用氯仿擦去刀上沾著的石蜡,把切片机擦拭干净妥为保存。
3、 贴片
①、取一片清洁的载玻片,滴一滴粘片剂于玻片中央,然后用洗净的手指加以涂抹,便成
均匀薄层。
②、滴1~2滴的蒸馏水已涂粘片剂的载玻片上。
③、用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带,放在水面上,注意蜡片光亮平整的一面贴于玻片上,并使之处于稍偏玻片的一端,另一端便于粘贴标签。
④、把玻片摆好片位置,在酒精灯火焰上方适度加热至蜡片舒展。或放置置于预先加热的展片台上(温度保持在40~45℃)。此时蜡片因受热而伸展摊平。并使之处于稍偏玻片的一端,另一端便于粘贴标签。
⑤、展片后把载玻片放在平盘上编好记号置于37℃温箱烘干,一昼夜干燥后即可取出存放于切片盒待染。
10、脱蜡复水
石蜡切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5~10min,然后放入100%、95%、90%、80%、70%等各级酒精溶液中各3~5min,再放入蒸馏水中3min。
染色液多数为水溶液,因此,染色前必须将蜡脱去,使切片中的材料由有机相进入到水相。一般采用二甲苯脱蜡,逐级复水与脱水浸蜡过程正好相反,但是,由于蜡片较薄,所需时间比脱水浸蜡要短的多。
11、染色
切片放入苏木精中染色约10~30min。染色时间应根据染色剂的成熟程度及室温高低,适当缩短或延长。室温高时促进染色,染色时间可短些,否则可适当延长时间,冬季室温低时可放入恒温箱中染色。
12、水洗
用自来水流水冲洗约15min。冲洗过程中使切片颜色发蓝(或放入堿性水中也可,但用促蓝剂对伊红可能拒染,如果时间来得及,应以流水冲洗使切片显示蓝色为宜),但要注意流水不能过大,以防切片脱落,并随时用显微镜检查见颜色变蓝为止。
13、分化
就是将细胞质著的色褪去,使细胞核着色更加鲜明,也称分色。将切片放入1%盐酸乙醇液(盐酸1份+70%乙醇100份)中褪色,见切片变红,颜色较浅即可,约数秒至数十秒钟。这一步骤是H.E.染色成败的关键,,如分化不当会导致染色不匀,或深或浅,得到的切片染色效果差。如果染色适中,可取消此步骤。
14、漂洗
切片再放入自来水流水中使其恢复蓝色。低倍镜检查见细胞核呈蓝色、结构清楚;细胞质或结缔组织纤维成分无色为标准。然后放入蒸馏水中漂洗一次。
15、脱水Ⅰ
切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各3~5min。
16、复染
用0.5%伊红乙醇液对比染色2~5min。伊红主要染细胞质,着色浓淡应与苏木精染细胞
核的浓淡相配合,如果细胞核染色较浓,细胞质也应浓染,以获得鲜明的对比。反之,如果细胞核染色较浅,细胞质也应淡染。可在伊红乙醇液中滴加数滴冰醋酸助染,促使细胞质容易着色,并且经乙醇脱水时不易褪色。
17、脱水Ⅱ
放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3~5min。最后用吸水纸吸干多余的乙醇。
18、透明
切片放入二甲苯乙醇等量混合液中约5min,然后放入纯二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3~5min。二甲苯应尽量保持无水,应经常更换,或用纱布包无水硫酸铜放入染色缸内吸收水分。切片如在二甲苯中出现白雾现象,说明脱水未尽,应退回乙醇中重新脱水,否则切片难以镜检。
19、封藏:中性树胶封存
切片经染色、脱水、透明后,即可用封藏剂将其封藏起来,目的是永久保存切片,便于镜检。常用的封藏剂一类为干性封藏剂如中性树胶、加拿大树胶等,另一类为湿性封藏剂如甘油明胶等。如果切片是经二甲苯透明,则用树胶作为封藏剂,树胶可以用二甲苯稀释至合适的稠度。如果切片是直接从水中或水溶液中取出,则常用甘油明胶作为封藏剂,可用于短期保存标本。
封藏的方法:
封片前应根据材料的大小,选用不同规格的盖玻片。材料透明后,按照下列方法进行封藏。在桌上放一张洁净的吸水纸,将含材料的载玻片从二甲苯中取出放在纸上(切片的一面向上),迅速地在切片的中央滴一滴树胶(千万不能待二甲苯干燥后再进行),用右手持小镊子轻轻地夹住盖玻片的右侧,稍为倾斜使其左侧与封藏剂接角,然后再缓慢地将盖玻片放下,这样就可以减少或避免产生气泡。如胶液不足,可以用玻棒再滴一滴树胶从盖玻片边缘补足。如胶液过多,可在干燥以后用刀刮去,并用纱布蘸二甲苯拭去残留的树胶。
染色结果:细胞核被苏木素染成蓝色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
8 石蜡切片法实例(二)
——番红固绿对染法
8.1 目的要求1、 熟悉植物石蜡切片的制作过程。
2、 掌握番红固绿对染法的基本原理和具体方法。
8.2 实验原理石蜡切片法也是在研究植物细胞的形态结构等方面常用的制片方法。它可以使植物材料切成薄的薄片,又可以切成连续薄片,切片经染色,观察效果甚好。番红固绿对染法,为
植物制片上最普遍的一种二重染色法,其染色程序简单并能清晰地显示出细胞的结构。番红为堿性染料,能使细胞核及木质化的细胞壁染成红色;固绿为酸性染料,能使细胞质及纤维素的细胞壁染成绿色。
8.3 实验用品(一) 器材
切片刀,切片机,温箱,温台,解剖刀,镊子,单面刀片,台木,毛笔,蜡铲,酒精灯,包埋纸盒,染色缸,玻片盘,温度计,脸盆。
(二)试剂
FAA固定液,1%番红,1%固绿,各级酒精(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%),二甲苯,石蜡,郝普特氏明胶粘片剂,树胶。
试剂配法:
1、FAA固定液(福尔马林醋酸洒精混合液)
福尔马林 5 ml
50%或70%的洒 90 ml
冰醋酸 5 ml
此液适用于植物组织,此液中的酒精,有用50%的,也有用70%的,一般薄嫩的材料右用50%的,厚硬的材料用70%的,醋酸的用量也可根据材料情况作适当的改变,对一些大块而密实的组织可增加用量,同时减少福尔马林的用量。固定时间可因材料及醋酸含量的变化而异,一般为5~20h。固定的材料,一般无需用水洗,可直接从70%的酒精开始脱水。
1、 1%番红
番红1g溶于100ml水中。
2、 1%固绿
1g固绿溶于100ml95%酒精中。
3、 郝普特氏明胶粘片剂
明胶 1g
蒸馏水 100ml
石炭酸 2g
甘油 15ml
配制时先将明胶溶解于30℃的蒸馏水中(在水浴锅内进行),待溶解后再加石炭酸和甘油,搅拌均匀后,趁热过滤,贮存于玻璃瓶中。
(三)材料
大豆、小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆等。
8.4 实验程序1、 取材
取已培养好的大豆、小麦、蚕豆根或茎、叶等用刀片将其尖端约1.2cm根尖切割下来,用刀
片切割其成熟区部分成5mm长的小段(亦可切带侧根的部分),将切好的材料放入玻管中。
2、 固定
将FAA固定液倒入盛有材料的玻管中,固定时间为24h。
3、 冲洗
用70%酒精换洗3次,每次0.52h。
4、 脱水
80%、90%酒精各12h,纯酒精(中间换一次)12h。
5、 透明
等量纯酒精及二甲苯中12h,二甲苯(中间换一次)12h。
6、 透蜡
方法同前。
7、 包埋
方法同前。
8、 切片
根为横切面,其厚度为8~10um。
9、 贴片。
方法同前。
10、 番红固绿对染法染色程序如下:
(1)切片在二甲苯中脱蜡,约10min。
(2)等量纯酒精二甲苯5min。
(3)经纯酒精,95%、90%、80%、70%、505、305各级酒精各5min。
(4)蒸馏水25min。
(5)1%番红水溶液染色2h左右。
(6)用水洗去多余染液。
(7)50%、70%、80%、90%、95%各级酒精脱水10min。
(8)1%的固绿(用95%酒精配制)染色1040s。
(9)95%酒精洗一下。
(10)纯酒精脱水5min。
(11)等量纯酒精二甲苯混合液中5min。
(12)二甲苯5min。
(13)中性树胶封藏。
注意:
(1)番红与固绿在酒精中很容易脱色,因此在酒精中脱水时,不能放置太久。
(2)用固绿对染之前应检查番红染色的是否合适,所染颜色应稍深一些,以防其在以后脱水步骤中仍会脱色,如果太浅,应退回重染。