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dna提取实验中70%乙醇的作用

单身的龙猫
认真的中心
2022-12-29 17:07:07

dna提取实验中70%乙醇的作用

最佳答案
微笑的棒球
爱笑的小蘑菇
2026-05-07 03:07:40

在质粒DNA的制备中,无水乙醇起到沉淀DNA继而达到浓缩DNA的目的,70%的乙醇是用来洗涤DNA的,进一步去除杂质。

在除去蛋白质沉淀后,要加入无水乙醇使质粒沉淀,离心除去上清,再加入70%乙醇清洗DNA沉淀,清洗两次左右。最后要把DNA沉淀溶于TE或ddH2O中。

扩展资料:

1、 测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。

2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。

参考资料来源:百度百科-质粒DNA纯化

最新回答
顺心的心锁
微笑的冬天
2026-05-07 03:07:40

在DNA提取时,用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。

DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙醇,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用o.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。

落寞的乌龟
清秀的大树
2026-05-07 03:07:40
溶解的原理是被溶解溶质的分子分散到溶解该物质的溶液分子间隙的过程,这个原理同样适用于DNA溶于水的过程,即DNA分子同水分子相互结合。乙醇分子和水的结合力大于DNA与水的结合力,故乙醇分子会抢占原来已经溶于水的DNA分子的位置,DNA分子因此被析出。为保证所形成的乙醇溶液的浓度,要加两倍以上体积的乙醇,这样能形成60%以上浓度的乙醇溶液,不一定是两倍,但是一定要高于这个值,否则DNA不容易析出。DNA提取的下一步加70%洗涤也是这个原理,其实量多量少不重要,关键是达到一定的条件。

任性的往事
疯狂的钢笔
2026-05-07 03:07:40
在DNA的粗提取与鉴定中,酒精必须用预冷的95%的酒精,其作用是:

1.抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;

2.降低分子运动,易形成沉淀;

3.低温有利于增加DNA柔韧性,减少断裂。

故意的期待
激昂的寒风
2026-05-07 03:07:40
因为DNA和杂质(主要是Pr)的耐受性不同,加入酒精后,DNA会析出。而且要是等体积、冷却的酒精溶液。作用:1.抑制核酸水解

2.降低分子运动,易于形成沉淀

3.增强DNA分子柔韧性,防止DNA断裂。

陶醉的大树
俭朴的橘子
2026-05-07 03:07:40
提核酸要在低温下进行,尽量减少DNA的降解。用冷酒精,是要保持温度4度左右,因为这个温度下,在酒精的盐溶液里,DNA-组蛋白复合体的溶解度最小,可以相对较纯净的提取DNA。另外,95%的酒精冻乙醇的作用还有沉淀DNA。=========答案满意的话别忘了采纳哦!

怕孤独的棉花糖
外向的舞蹈
2026-05-07 03:07:40
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无水乙醇可以将DNA-阳离子盐沉淀下来,但这样一来,DNA中就含有较多的盐离子,这势必会影响下一步实验的进行,所以要用70%乙醇洗涤DNA沉淀(因为在70%乙醇里DNA是不溶的,而盐离子却可溶),用无水乙醇则达不到这个目的!OK?

搞怪的篮球
繁荣的自行车
2026-05-07 03:07:40
95%的乙醇是用来溶解其他的杂质,因为DNA不溶于酒精,所以过滤后就只把DNA滤掉,一部分能溶于酒精的杂质就留在酒精里了.

核酸酶在体外适宜的条件也可以降解DNA,因此提核酸要在低温下进行,尽量减少DNA的降解.

酷酷的心情
沉默的高山
2026-05-07 03:07:40

在质粒DNA的制备中,无水乙醇起到沉淀DNA继而达到浓缩DNA的目的,70%的乙醇是用来洗涤DNA的,进一步去除杂质。

在除去蛋白质沉淀后,要加入无水乙醇使质粒沉淀,离心除去上清,再加入70%乙醇清洗DNA沉淀,清洗两次左右。最后要把DNA沉淀溶于TE或ddH2O中。

扩展资料:

1、 测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。

2、 每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。

参考资料来源:百度百科-质粒DNA纯化