醋酸菌液体培养的目的
醋酸菌液体培养的目的是:在发酵工程中常用来酿醋。醋酸菌是重要的工业用菌之一。醋酸菌的细胞为椭圆至杆状,一般在乙醇或其它可氧化物的酵母煮液或酵母消化液培养基上生长旺盛。
发酵指人们借助微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体本身、或者直接代谢产物或次级代谢产物的过程。发酵有时也写作酦酵,其定义由使用场合的不同而不同。通常所说的发酵,多是指生物体对于有机物的某种分解过程。
醋酸菌斜面培养基:葡萄糖 1克,酵母膏1克,碳酸钙1克,琼脂2.5克,水100毫升。
.斜面培养斜面制作:培养基按配方调配好(碳酸钙先不加入),分装试管,灭菌备用。碳酸钙按比例分装、灭菌。摆斜面前将培养基和碳酸钙混合,用手搓均匀,然后摆斜面,备用
安瓿管开启:酒精棉球擦抹三次,用重器撞击,打开,注入0.5mL无菌水,将菌球溶解,全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内,30℃培养72h,每2h摇动—次
菌体生长:培养基变混浊后,颜色变浅,对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液,30℃培养48h,每2h摇动—次。
三角瓶三级扩培,三角瓶中培养基的装量为50%,每级按种量在10%左右,在转换振荡器上恒温培养,培养温度均为30℃,时间依次缩短为36、36、24h,
种子罐培养基配料后种子罐夹套加热灭菌100℃保持15min,冷却后,先加入4%食用酒精,无菌操作接入菌种。接种量为10%~12%,温度保持在30℃±1℃,通无菌空气,菌体生长时间为24~36h.视菌体生长情况及镜检结果而定
接种的方式进行发酵。由于醋酸菌种类不同,其对酒精的氧化能力也有差异。在实际生产中,选择菌种是很重要的工作,最好选用氧化酒
精速度快、不再分解醋酸、耐酸性强、产品风味好的菌种。在食醋生
产中,常见的有纹膜醋酸菌(A.aceh
)、许氏醋杆菌
(A.sc/iMi;zen6ac/uV)、奥尔兰醋酸杆菌(A.orZeaweme)、胶膜醋酸杆
菌(A.
)、恶臭醋杆菌(A.
rawcem
)、混池变种(中科AS1.41)、巴氏醋酸菌(A.扣对eMriam«)、巴氏亚种(沪酿1.01)
等,采用纯醋酸菌种发酵的,目前使用最多的是恶臭醋杆菌、混浊变种、巴氏醋酸菌、巴氏亚种这4种醋酸菌。1
.奥尔兰醋酸杆菌(A.
or/eanense)法国奥尔兰地区用葡萄酒生产醋的主要菌株是奥尔兰醋酸杆菌。
它能产生少量的酯,产醋酸的能力弱,但耐酸性较强,能由葡萄糖产5.
26%葡萄醋。2.
许氏醋酸杆菌(scfeHfze/ifcac/iiV)许氏醋酸杆菌是国外有名的速酿醋菌种,也是目前制醋工业较重要的菌种之一,产酸可高达115g/L
(以醋酸计)。最适生长温度25〜27.
5°C,在37°C即不再产醋酸,对醋酸没有进一步的氧化作用。3.
恶臭醋杆菌(A.ra/icens)这是我国食醋生产使用的菌种之一。它在液面形成皱褶的皮膜,
菌膜沿容器壁上升,液不混浊。一般能产酸60〜80g/L,有的菌株能产20g/L葡萄糖酸,能把醋酸进一步氧化为二氧化碳和水。4.攀膜醋杆菌(A.asce/idens)酿造葡萄酒、葡萄醋的有害菌。在醋醅中常能分离出,在液面形成
易破碎的菌膜,沿容器壁上升得很高,液很混浊,不适于酿醋使用。5.
胶膜醋杆菌(A.x_yri/iM7n)一种特殊的醋酸菌,在液面上形成一层皮革状的类似纤维素的厚
膜。在酒类的醪液中繁殖,可引起酒酸败、变黏,生酸能力弱,又能再分解醋酸,是酿醋的有害菌。6.
中科AS
1.41醋酸菌该菌对培养基要求粗放,在米曲等培养基中生长良好,专性好
气,能氧化酒精为醋酸,于空气中能使酒精变混浊,表面有薄膜,有醋酸味,也能氧化醋酸为二氧化碳及水,繁殖的适宜温度为31°C,
发酵温度一般控制在36〜37°C。7.
沪酿1.
01醋酸菌沪酿1.
01醋酸菌属于巴氏醋酸杆菌的巴氏亚种。该菌是在1972
年从丹东速酿醋中分离而得的,在上海酿造科学研究所实验工厂及上海醋厂投产使用,现已被全国许多醋厂用于液体醋生产。其细胞
0.3〜0.55Mm,专性好气菌,在酵母膏葡萄糖淡酒琼脂培养基上的菌
落为乳白色;酒精静置培养表面形成不透明的薄膜。主要作用是氧化酒精为醋酸,可氧化葡萄糖形成少量葡萄糖酸,并氧化醋酸为二氧化碳及水,繁殖适温为30°C,发酵适温为32〜35°C。醋厂选用的醋酸菌,最好应是氧化酒精速度快,不再分解醋酸,
耐酸性强,制品风味好的菌。目前,国外有些工厂用混合醋酸菌生产食醋,除能快速完成醋酸发酵外,尚能形成其他有机酸等组分,能增
加成品香气和固形物成分。总之,选用优良的醋酸菌是酿醋过程取得
好效果的很主要的一项措施。8.
LB2001醋酸菌LB2001是2000年从西老陈醋成熟醋醅中分离所得的菌种。该菌细
胞形态为杆状,单个或呈链,为好气性细菌,在通气条件下生长良好。在液体培养基或浅层盘式培养时,菌液表面形成灰白色菌膜、有皱褶、
易碎、菌膜沿容器壁上升,发酵液不混浊。繁殖适温为28〜31°C,发
酵适温为28〜33°C,能耐38〜40°C高温,最适pH值为3.5〜6。
醋塔法也称速酿法,是以稀酒液不原料,在塔内流径附着大量醋酸菌的填充料,使酒精很快氧化成为醋酸。丹东白醋就是用这种工艺生产的。
制作方法: 1.酒液制备:碎米经浸泡、磨浆、液化、糖化及液态发酵,酒精浓度以7~8°为好。
2.醋酸发酵:将酒液一次加入醋塔内,再接入醋酸菌液10%,然后定时,定温循环回淋,约每隔90分钟回淋一次。品温控制35~42℃之间。根据品温变化情况控制回淋次数及空气入口,经50多小时,酒精耗尽,测定淋出液酸度不再上升,即为成品。
原料出品率≈7.5公斤(醋酸含量5克/100毫升)/每公斤主粮。
主要生产设备 速酿塔(高2~5米,直径1~1.3米,圆桶形,塔顶封盖,有排气孔,内有假底,塔内置一层处理过的填充料一桦木刨花、芦苇秤或玉米芯等——上铺厚约15厘米的粗谷糠),回淋管、泵等。
制作方法2 我国北方及中南地区采用的醋塔法还有按以下工艺进行生产的(塔中的填充料一般用桦木刨花及木炭)。
1.淋液制备:取原醋加入白酒及温水稀释,再加酵母液1%,配成的淋液含醋酸6.5~7.5%、酒精2.5%,液温要求为33~35%℃。
2.淋醋操作:以淋液从塔顶喷入,每塔每小时1次,每塔每次5公斤,塔底流出液即为原醋。
醋塔法制醋特点 1.塔内填充料能连续使用,可以节约麸皮等原料,并不需要出渣,减轻了劳动强度;
2.原料出品率较高;
3.填充料来源广泛;
4.口味比较单调。
参考资料:数据库