乙醇沉淀多糖的同时会将单糖也沉淀出来吗

采用乙醇沉淀法除去水提取液中多糖等杂质,应使乙醇浓度达到：

80%的浓度有点小，应该大于85%，在这个条件下。

拓展内容：

1、多糖是多羟基的醛或酮，可溶于水，但是在多糖水溶液中加入乙醇会破坏多糖水溶液中的氢键，从而降低多糖在水中的溶解度，使多糖以沉淀的形式析出。

2、水提醇沉的原理是利用多糖不溶于乙醇的性质用乙醇来沉淀多糖；它是加热条件下以水为提取溶剂，提取液经过浓缩、醇沉、离心、干燥等步骤后即可得到。

多糖是多羟基的醛或酮，可溶于水，但是在多糖水溶液中加入乙醇会破坏多糖水溶液中的氢键，从而降低多糖在水中的溶解度，使多糖以沉淀的形式析出。不同浓度的醇沉淀的组分不一样，一般采取分级醇沉。醇沉的时候单糖也可以被醇沉出来，醇浓度越高单糖被沉淀出来的量也会越高。

就是利用溶解度，和盐析原理类似。

多糖如果参用分级醇沉，会分出来不同分子量的多糖，但是这仅仅是一个粗分，醇沉很容易包裹一些小分子，导致样品不纯，需要进一步做色谱层析，一般多糖用G25，或者S400（可加压）。

用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐.个人见解.

异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗.只有醋酸钠 乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐,乙醇浓度太高达不到脱盐效果,浓度太低DNA会溶掉

异丙醇沉淀以后有人用无水乙醇洗一遍,目的是加速DNA的干燥,因为异丙醇的挥发性没有乙醇好

主要目的还是为了除盐,前面沉淀DNA时加入的盐会影响你后续的克隆操作,如酶切和PCR.

是为了除去沉淀物之中的水分。由于水提醇沉法沉淀物多为多糖、蛋白质等大分子复合物，具有较强的吸水性。沉淀物单凭烘干无法除去其中的水分，会使沉淀产物含有较多的水分，影响产物性状（是产物呈胶状，而非粉末状固体）以及纯度是产物无法进行精确的定量分析。醇沉后用无水乙醇洗涤，除去一部分水分；再用可溶于水的丙酮洗涤，确保水分除净；最后用无水乙醚洗涤沉淀物，除去残存的乙醇、丙酮和溶于其中的水分。这样就可以得到较纯的多糖或蛋白质了。

用70%的酒精是因为这个浓度对沉淀DNA效果最好,并且异丙醇能溶于酒精,去除异丙醇,然后挥发酒精,似乎还能除盐.个人见解.异丙醇沉淀以后不必用70%乙醇洗.只有醋酸钠乙醇沉淀之后才需要70%乙醇洗,目的是洗去加入的盐,乙醇浓度太高达不到脱盐效果,

溶剂提取法

溶剂提取法是从植物中提取多糖的常用方法，溶剂提取法首先要考虑的因素是选择溶剂，一般应遵循相似相溶的原则，即极性强的有效成分选择极性强的溶剂，极性弱的成分选择极性弱的溶剂。多糖是极性大分子化合物，应选择水、醇等极性强的溶剂。在所有溶剂中，水是典型的强极性溶剂，对植物组织的穿透力

强，提取效率高，在生产上使用安全。它能用于各种植物多糖，被广泛应用。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提液可直接或离心除去不溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。刘青梅等在紫菜粗多糖提取方式研

究中，热水提取控制条件为：温度为20~100℃，水与紫

菜的液固质量比为50:1，提取时间30~180min，经多次

试验最终得率为2.05%。周峙苗得到热水浸提羊栖菜

多糖的最佳因素：浸提温度为煮沸(102℃)，ph为3.0，

浸提时间为3h，液固质量比为40:1。李战对三种紫球

藻的提取工艺研究表明，三种紫球藻的最佳提取工艺

各不相同。铜绿紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度

5%，乙醇用量为3倍体积，醇沉时间为1.5h。氯仿与正

丁醇的比例4:1，样液与sevag试剂的比例1:2，作用时

间为15min。淡色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度

75%，乙醇用量为2倍体积，醇沉时间为1h，氯仿与正

丁醇的比例3:1，样液与sevag试剂的比例1:2，作用时

间为45min。血色紫球藻的最优提取工艺为乙醇浓度

50%。乙醇用量为1倍体积，醇沉时间为0.5h，氯仿与

正丁醇的比例4:1，样液与sevag试剂的比例2:1，作用

时间为45min。

酸碱提取法

有些多糖适合用稀酸或碱溶液提取，才能得到更

高的提取率。但酸碱提取法有其特殊性，因多糖类的不

同而异。只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，而

且即使有优势，在操作上还应严格控制酸碱度。因为

某些多糖在酸性或者碱性较强时，可能引起多糖中糖

苷键的断裂。另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅

速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。赵宇等对海篙

子多糖的提取方法研究发现，从硫酸根含量及粗多糖

产率看酸提方法好于水提方法。具体方法为：100g海

篙子干粉，加入1000ml 0.1mo1/l hcl溶液提取。室温

搅拌1h后过滤，重复操作三遍，合并滤液；滤液减压浓

缩至总体积的1/5，再加入95%乙醇至乙醇浓度达

30%，沉淀，离心除去沉淀中的褐藻酸，继续向上清液

中加入乙醇至乙醇浓度达7%。室温放置过夜使沉淀

完全，离心，沉淀干燥得海篙子粗多糖，多次试验算得

平均产率为3.35%。

孟宪元等在茜草多糖提取研究中发现酸提相对

多于水提，以稀酸提取茜草多糖，产品纯度较高。具体

方法如下茜草根粗粉1000g 5%hcl浸泡、离心、取上

清液加入etoh并调节至浓度为7%，静置，2500rpm

离心，收集棕色沉淀物，95%etoh洗涤3次，用45%

hcl溶解。加1%活性炭脱色，真空抽滤，滤液4℃过

夜，弃去容器底部少许沉淀物。溶液置透析袋内，逆水

法透析3d，冷冻干燥，得白色粉末状多糖约10g。

hayashi katsuhiko发明了一种从绿色藻类中提取酸

性多糖的方法，而这种多糖用常规的热水法是无法得到的。具体过程为：将干燥的绿藻粉末制成悬浮液，热

水浸泡提取或将含水绿藻直接用热水提取后离心分

离，取粘稠的固状物，加入碱水，在ph≥10的条件下

再进行搅拌提取，碱水提取液在搅拌的同时加入酸水

调节ph值为3.0~4.0，静置沉降后离心得酸性多糖。

1.3生物酶提取法

酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一

项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取

条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的

释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果

胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果

胶酶等。孟江研究不同酶对大枣渣多搪提取效果的

影响，根据多糖得率、多糖含量及蛋白质含量进行综合

评分得到最适合的酶为复合酶2(先胰蛋白酶提取，后

木瓜蛋白酶提取)，接下来依次是木瓜蛋白酶、复合酶、

(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶

(ph=7.0)、胃蛋白酶(ph=2.0)。复合酶2作用条件温

和，多糖得率及含量较高，且蛋白含量较低，实为一种

理想的酶提取剂。通过进一步正交实验考察得出最佳

工艺：先用胰蛋白酶3%，40倍体积在ph=7.0，65℃温

浸1.5h后，再加木瓜蛋白酶2.5%，在ph=7.0，50℃水

温浸1h，过滤残渣加40倍体积水，迅速升温至80℃，

然后温浸1.5h。

此外，植物多糖的提取方法还有超滤法，超声波强

化法，微波法等等。植物多糖的提取方法和技术在不断

改进和创新，但对于同一种方法和技术又需在不同植

物多糖的提取中研究考察。在选取提取分离方法的同

时，应当根据目标多糖的特点、物理化学性质，综合比

这个问题太笼统了，由于糖蛋白中糖含量可以由90%以上到1%以下，只要含有糖和蛋白且以共价键连接都可以叫糖蛋白，糖含量较多的当然性质就像糖，蛋白含量占主要的就和蛋白的性质相近。无水乙醇是可以沉淀蛋白的，在我们具体操作中，也可以用乙醇来沉淀多糖，所以，原理上说，无水乙醇是可以沉淀糖蛋白的，但是大多是大分子的，分子量过小的话很难沉淀下来。判断糖蛋白首先确定是一个纯净的化合物，即不是混合物，然后再分别用检测蛋白和检测糖的方式检测二者的存在，这个比较土。高级一点的方法就是用质谱了

刚整糖蛋白的时候我也挺困惑的，现在看开了好多，呵呵，还有问题可以给我发信，呵呵欢迎探讨

除多糖常用的方法就是醇沉 （乙醇沉淀） 向溶液中加入95%的乙醇至乙醇浓度达到80%以上 多糖会沉淀下来 再用离心的方法将多糖去除 我不知道你除多糖的目的是什么 如果为了分离有机酸 醇沉过后还涉及到乙醇和有机酸的分离