工业用冰乙酸国家标准 GB/T 1628-2008

车间中的各种气体的测定可以采用飞秒检测方法精确测定，其依据的标准如下：

GB 18529-2001 车间空气中乙醛职业接触限值

车间空气中乙酸卫生标准GB1633一1996

氨气根据国标TJ36-79规定，国标GB5044-83中规定。所以油化工企业可燃气体有毒气体检测报警设计规范不规定检测。《室内空气质量标准》规定：氨在室内空气中最高允许浓度为0.11mg/m3

食醋中醋酸含量的测定方法：

（1）用25.00mL移液管吸取食用醋试液一份，置于250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

（2）用移液管吸取25.00mL稀释后的试液，置于250mL锥形瓶中，加入0.2%酚酞指示剂1-2滴，用NaOH标准溶液滴定，直到加入半滴NaOH标准溶液使试液呈现微红色，并保持半分钟内不褪色即为终点。

（3）重复操作，测定另两份试样，记录滴定前后滴定管中NaOH溶液的体积。测定结果的相对平均偏差应小于0.2mL。

（4）根据测定结果计算试样中醋酸的含量，以g/L表示。

简介

醋是用各种酵后产生的酸味调味剂，化学式：CH3COOH，是弱电解质。酿醋主要使用大米或高梁为原料。适当的酵可使用含碳水化合物（糖、淀粉）的液体转化成酒精和二氧化碳，酒精再受某种细菌的作用与空气中氧结合即生成醋酸和水。

所以说，酿醋的过程就是使酒精进一步氧化成醋酸的过程。食醋的味酸而醇厚，液香而柔和，它是烹饪中一种必不可少的调味品，主要成分为乙酸、高级醇类等。

现用食醋主要有“米醋”、“熏醋”、“特醋”“糖醋”、“酒醋”、“白醋”等，根据产地品种的不同，食醋中所含醋酸的量也不同，一般大概在5~8%之间，食醋的酸味强度的高低主要是其中所含醋酸量的大小所决定。例如山西老陈醋的酸味较浓，而镇江香醋的酸味酸中带柔，酸而不烈。

1、色度的测定 色度的测定 2、乙酸含量的测定 乙酸含量的测定 3、甲酸含量的测定 4、乙醛含量的测定 5、水含量的测定 6、蒸发残渣含量的测定 7、铁含量的测定 8、高锰酸钾时间的测定 实验目的 了解冰乙酸需测得的各类物质， 1、了解冰乙酸需测得的各类物质，并掌握各 类测定方法 2、掌握分光光度计的特性和使用方法 掌握比色管、移液管、 3、掌握比色管、移液管、滴定管等实验室仪 器的使用方法和注意事项 第一项 ? 色度的测定：分光光度法 色度的测定： ? 原理：黄度指数可定量地描述式样的颜色，用分光光 原理： 度计或比色计测定并计算试样的黄变度，从标准比色液的 黄变度-铂钴色度号的标准曲线查得试样的色度号，以铂钴色号表示结果。 注：黄变度为标准比色液与水的黄度指数的差值。 试剂： 试剂：铂-钴标准比色液 于10个色号的标准比色液。 在0到30号范围内配制不少 比色计 仪器： 仪器：分光光度计 比色皿：厚度1cm 操作步骤： 操作步骤： （1）在1000ml容量瓶中将1.00g六水合氯化钴和1.245g铂酸 钾溶于水中，加100ml盐酸溶液，定容至刻度，混匀。 配制成标准比色母液。（500色度号） （2）用移液管将标准比色母液2ml，5ml，7ml，10ml，12ml， 15ml，17ml，20ml，22ml，25ml，27ml，30ml，分别 移于500ml的容量瓶中加水至刻度混匀，配成2， 5,7,10,12,15,17,20,22,25,27,30，铂-钴色度号的标 准铂-钴对比溶液。 （3）调整分光光度计（空皿放入参比池，水放入样品池） 使透光度为100%，测试并计算水、标准比色液及样品 的透光度和黄变度：以标准比色液的铂-钴色号为横坐 标，对应的黄变度为纵坐标，绘制标准曲线。根据式 样的黄变度，由标准曲线查出样品的色度号。 第二项 ? 乙酸含量的测定：滴定法 乙酸含量的测定： 试剂：酚酞指示液：5g/L 试剂： 氢氧化钠标准溶液：1mol/L 原理：以酚酞为指示液，用氢氧化钠标准滴定 原理： 溶液中和滴定，计算时扣除甲酸含量。 操作步骤： 操作步骤： 乙酸含量的测定：滴定法（GB/T1628-2008） 乙酸含量的测定：滴定法（GB/T1628-2008） 用具塞称量瓶称取约2.5g试样，（精确至0.0002g）， 置于250ml锥形瓶中，加50ml无二氧化碳水，并将称量 瓶盖摇开，滴加0.5ml 酚酞指示液，用氢氧化钠标准 滴定溶液滴定至微粉红色，保持5s不褪色为终点。 计算结果 乙酸的质量分数W1，数值以%表示，按式（1）计算： W % （ (V / 1000)cM 1 w1 = ×100 - 1.305w2 m …………….(1) 式中： 式中： V——试样消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位 为 ml ； C——氢氧化钠标准滴定溶液的浓度,单位 mol/L ； m——试样的质量的数值，单位 g ； M1——乙酸的摩尔质量，单位 g/mol（M1=60.05）； （ ）； 1.305——甲酸换算为乙酸的换算系数； ； W2——测得的甲酸的质量分数，数值以%表示。 。 取两次平行测定结果的算术平均值为 测定结果， 测定结果，两次平行测定结果的绝对差值 不大于0.15% 不大于 乙酸含量的测定 记录项目 第一份 第二份 第三份 第四份 氢氧化钠标准溶液滴定（V1/ml） 无二氧化碳水 酚酞指示剂 试样的质量/g 乙酸的含量W1/％ 50mL 2―3滴 2.5 W1的平均值/％ 备注： 第三项 ? 甲酸含量的测定（碘量法） 甲酸含量的测定（碘量法） ? 试剂：盐酸溶液：1+4 试剂： 碘化钾溶液：250g/L 次溴 酸钠溶液：c(1/2NaBrO)=0.1mol/L 溴化钾-溴酸钾溶 液：c(1/6KBrO3)=0.1mol/L 硫代硫酸钠标准滴定溶液： c（Na2S2O3）=0.1mol/L 10g/L的淀粉指示液 100ML容量瓶 （维持真空度1X104Pa以下） 真空泵或水流泵 ? 仪器：500ML锥形瓶 仪器： 原理： 原理：总还原物的测定：过量的次溴酸钠溶液氧 化试样中的甲酸和其他还原物，剩余的次溴酸钠用 碘量法测定。 除甲酸外其他还原物的测定：在酸性介质中，过量 的溴化钾-溴酸钾氧化除甲酸外的其他还原物，剩余 的溴化钾-溴酸钾用碘量法测定。 甲酸含量由两步测定值之差求得。 步骤： 步骤： 1.总还原物的测定 1.总还原物的测定： 总还原物的测定 将100ml耐真空的滴液漏斗置于盛有80ml水的500ml耐真 空的锥形瓶上，打开滴液漏斗活塞，用泵抽取能吸入 200ml液体的真空度，关闭活塞，拔出连接泵的活塞， 通过滴液漏斗吸入用移液管吸取的25ml次溴酸钠溶液， 每次用5ml水冲洗滴液漏斗，洗两次，再通过滴液漏斗 吸入用移液管吸取的10ml试样，每次仍用5ml水冲洗滴 液漏斗，冲洗两次，混匀。在室温下静置10分钟，然后 通过滴液漏斗吸入5ml碘化钾溶液和20ml盐酸溶液，剧 烈振摇30s打开滴液漏斗活塞，取下滴液漏斗，加50ml 水于锥形瓶中，用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至溶液 呈浅黄色时，加约2ml淀粉指示液，继续滴定至蓝色刚 好消失为终点，同时做空白试验。 2.除甲酸外其他还原物的测定： 2.除甲酸外其他还原物的测定： 除甲酸外其他还原物的测定 移取25ml溴化钾——溴酸钾溶液于已盛有90ml水 的500ml锥形瓶中，将滴液漏斗置于锥形瓶上，用 泵抽取能吸入200ml液体的真空度，关闭滴液漏斗 活塞，拔出连接泵的活塞，通过滴液漏斗吸入用 移液管吸取的10ml试样，每次用5ml水冲洗滴液漏 斗，冲洗两次，再吸入10ml盐酸溶液，混匀。在 室温下静置10分钟，然后通过滴液漏斗吸入5ml碘 化钾溶液和50ml水混匀后打开滴液漏斗活塞，取 下滴液漏斗，用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定至 溶液呈浅黄色时，加约2ml淀粉指示液，继续滴定 至蓝色刚好消失为终点，同时做空白试验。 结果计算 第四项 ? 乙醛含量的测定（滴定法） 乙醛含量的测定（滴定法） ? 试剂:亚硫酸氢钠溶液：18.2 g/L 试剂: 称取1.66g 碘标准溶液：c(1/2I2)=0.02mol/L 硫代硫酸钠标准溶液：c(Na2S2O3)=0.02mol/L 粉指示液：10g/L 淀 操作步骤： 操作步骤： （1）移取10mL试样，置于已盛有10mL水的50mL容量 瓶中，加入50mL亚硫酸钠溶液，用水稀释至刻度， 混匀并静置30min，为试验溶液。 （2）移取50ml 碘标准溶液于碘量瓶中，并放到冰 水浴中静置。取试验溶液20mL于碘量瓶中，硫代 硫酸钠标准滴定溶液滴定至溶液呈浅黄色时，加 入0.5ml 10g/L 的淀粉指示液，继续滴定至蓝色 刚好消失为终点。 （3）在测定的同时，按与测定相同的步骤，对不加 试料而使用相同数量的试剂溶液做空白试验。 结果计算 乙醛含量的测定 记录项目 滴定硫代硫酸钠标液的体积/ml 碘标准液/ml 试验溶液/mL 空白值-V0/ml W(%) 平均W(%)1 相对极差 标准规定平行测定的相对极差 ≤0.2% 本次测定是 否符合平行 测定的要求 50 20 第一份 第二份 第三份 第四份 备注： 第五项 ? 水分的测定 操作步骤： 操作步骤： 向仪器中加入卡尔费休试剂（电解液），调节仪器，使仪器 进入工作状态，按要求进行标定。取50ul或适量样品，注 入水分测定仪中，待反应完毕后，在显示屏上读取水的质 量或质量分数值。 ? 用注射器称取试样3.5g，精确到0.001g。称样时，注射器 针头应用橡胶垫密封。 ? 取两次平行测定的算术平均值为测定结果，两次平行测定 结果之差不大于0.01%。 第六项 ? 蒸发残渣的测定（6324.2-2004） 蒸发残渣的测定（6324.2-2004） 操作步骤： （1）将150ml洁净的石英蒸发皿放入（110±2）℃ 的烘箱中加热2h取出，放入干燥器中冷却至室温， 称重，精确至0.1mg。移取100ml试样于已恒重的 蒸发皿中，放于水浴上，维持适当温度，在通风 橱中蒸发至干，再将蒸发皿置于预先已恒温至 （110±2）℃的烘箱中加热2h取出，放入干燥器 中冷却至室温，称重，精确至0.1mg。重复上述 操作至恒重。 （2）取两次平行测定的算术平均值为测定结果， 两次平行测定结果之差不大于0.001%。 结果计算 蒸发残渣（质量百分数）： W=[（m－m0）/ρ.V]×100 式中： m------蒸发残渣加空蒸发皿的质量数值，g m0----空皿的质量数值，g ρ------试验温度下试样的密度，g/ml V------试样体积，ml 表格 V/mL m/g M0/g W(%) 第七项 ? 铁含量的测定 实验试剂和仪器 ? ? ? ? ? 水 盐酸溶液：1+1 铁标准溶液，0.01mg/mL：吸收铁标准溶液（0.1mg/mL） 用水稀释10倍。使用时配制乙炔：体积分数不小于99.5% ? 原子吸收光谱仪（附铁空心阴极灯） 步骤 ? 试样的制备 ? 移取100mL试样于150mL圆底瓷或玻璃蒸发皿中，在沸水 浴上蒸干，残渣用2mL盐酸溶液溶解，移入25mL容量瓶 中，稀释至刻度。 工作曲线的绘制 ? 试样的测定 ? 按照测定标准溶液吸光度的方法测定试样的吸光度。从工 作曲线中查得浓度值（或直接读取浓度值） 结果计算 表格一 V 试 样 0.00 /mL c 铁 /ug/mL A吸光度 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 表格二 试样1 V1/mL V/mL A吸光度 c铁/ug/mL W/% 试样2 试样3 第八项 高锰酸钾时间的测定 试剂：配制高锰酸钾溶液用水 高锰酸钾溶液:0.2g/L 标准比色溶液 仪器：比色管：50mL；长型、磨口、聚塞、光学透明。 恒温水浴 操作步骤： （1）取适量水加足量高锰酸钾煮沸30min，如褪色再补加高 锰酸钾使溶液成淡粉红色，冷却至室温制成配制溶液用水。 称取0.2g高锰酸钾精确至0.001g，用已制备的水溶解，在 1000ml棕色容量瓶中定容至刻度，混匀。避光保存2周。 称取190mg六水合氯化钴，加入16ml 500号铂钴标准溶液， 溶解后，用水定容至50ml混匀，该标准比色液的颜色为样 品溶液在高锰酸钾试验中褪色后的终点颜色。 （2）移取20ml试样，加入到50ml比色管中，再加6ml水置 于（15±0.5）℃的恒温水浴中，水浴的水保持距比色管 顶约25mm处，恒温15min，当样品达到规定温度后，用 移液管加入3.0ml高锰酸钾溶液，边加边计时，立即盖上 瓶塞，摇匀，放回水浴中，经常将比色管取出与同体积的 标准比色液比较。接近结果时，每分钟比较一次，记录两 种溶液颜色一致的时间。以分钟计时。（注意：避免试液 暴露在强日光下） 四、生产工艺 1、生产原理 、 主反应 2CH3CHO+O2→2CH3COOH 副反应 CH3CHO+O2 →CH3COOOH CH3COOH →CH3OH+H2O CH3OH+O2 →HCOOH+H2O CH3COOH+CH3OH →CH3COOCH3+H2O 3CH3CHO+O2 →CH3CH(OCOCH3)2+H2O CH3CH(OCOCH3)2 →(CH3CO)2O+CH3CHO 2、工艺条件 、 原料配比：乙醛与投氧量摩尔比为 ： 原料配比：乙醛与投氧量摩尔比为2：1 反应温度：343~353K 反应温度： 反应压力： 反应压力： 0.15MPa 催化剂： 催化剂： 醋酸锰 3、工艺流程图 、 理化性质 ? ? ? ? ? ? 相对密度（水为1）：1.050 凝固点(℃):16.7 沸点（℃）：118．3 粘度(mPa.s)：1．22 （20℃） 20℃时蒸气压（KPa）：1.5 外观及气味：无色液体，有刺鼻的醋味。 溶解性：能溶于水、乙醇、乙醚、四氯化碳 及甘油等有机溶剂。 相容性：材料：稀释后对金属有强烈腐蚀性， 316#和318#不锈钢及铝可作良好的结构材料。

作业场所职业卫生检测，乙酸乙酯的排放限值： 时间加权平均容许浓度(PC-TWA)为:200 mg/m3 短时间接触容许浓度（PC-STET）300mg/m3, 乙酸丁酯和乙酸乙酯的排放限值一样 。注意是职业卫生上面的排放限值 可以查看国标：GBZ2.1-2007

目录1 拼音2 英文参考3 醋酸药典标准 3.1 品名 3.1.1 中文名3.1.2 汉语拼音3.1.3 英文名 3.2 分子式与分子量3.3 CAS号3.4 来源及含量3.5 性状 3.5.1 相对密度 3.6 鉴别3.7 检查 3.7.1 氯化物3.7.2 硫酸盐3.7.3 甲酸与易氧化物3.7.4 还原物质3.7.5 乙醛3.7.6 不挥发物3.7.7 重金属 3.8 含量测定3.9 类别3.10 贮藏3.11 版本 4 醋酸说明书 4.1 醋酸的别名4.2 外文名4.3 性状4.4 醋酸的作用与特点4.5 醋酸的药理及应用4.6 用法与注意 5 参考资料附：* 醋酸相关药品说明书其它版本 1 拼音

cù suān

2 英文参考

acetic acid [2010年版药典]

3 醋酸药典标准3.1 品名3.1.1 中文名

醋酸

3.1.2 汉语拼音

Cusuan

3.1.3 英文名

Acetic Acid

3.2 分子式与分子量

C2H4O2    60.05

3.3 CAS号

[64197]

3.4 来源及含量

本品含C2H4O2应为36%～37%（g/g）。[1]

3.5 性状

本品为无色澄明液体，有 *** 性特臭和辛辣的酸味。

本品能与水、乙醇或甘油混溶。

3.5.1 相对密度

本品在25℃时的相对密度（2010年版药典二部附录Ⅵ A）为1.04～1.05。

3.6 鉴别

（1）本品能使蓝色的石蕊试纸变红。

（2）本品加氢氧化钠试液中和后，显醋酸盐的鉴别反应（2010年版药典二部附录Ⅲ）。

3.7 检查3.7.1 氯化物

取本品1.0ml，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ A），与标准氯化钠溶液7.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.007%）。[1]

3.7.2 硫酸盐

取本品2.5ml，加水稀释使成20ml，精密量取5ml，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅷ B），与标准硫酸钾溶液1.5ml制成的对照液比较，不得更浓（0.024%）。[1]

3.7.3 甲酸与易氧化物

取本品5.0ml，加硫酸6ml，混匀，放冷至20℃，加重铬酸钾滴定液（0.01667mol/L）2.0ml，放置1分钟后，加水25ml，再加碘化钾试液1ml，淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗滴定液不得少于1.0ml。

3.7.4 还原物质

取本品5.0ml，加水20ml与高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.2ml，摇匀，放置1分钟，粉红色不得完全消失。[1]

3.7.5 乙醛

取本品5ml，精密称定，置10ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，取2.5ml，置顶空瓶中，加3.2mol/L氢氧化钠溶液2.5ml，立即密封，摇匀，作为供试品溶液；另取乙醛对照品适量，精密称定，用1.6mol/L醋酸钠溶液稀释制成每1ml中约含0.05mg的溶液，精密量取5ml，置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法（2010年版药典二部附录Ⅷ P第二法）测定，以聚乙二醇聚硅氧烷为固定液的毛细管柱为色谱柱；柱温35℃维持5分钟，以每分钟30℃的速率升温至120℃，维持2分钟；进样口温度200℃；检测器温度250℃；顶空平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟。取供试品溶液和对照品溶液分别顶空进样，按外标法以峰面积计算，含乙醛不得过0.02%。[1]

3.7.6 不挥发物

取本品20ml，置105℃恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得过1mg。

3.7.7 重金属

取本品10ml，水浴蒸干，残渣加水20ml使溶解，分取15ml，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）1.5ml与水适量使成25ml，依法检查（附录ⅧH第一法），含重金属不得过百万分之二。[1]

3.8 含量测定

取本品约4ml，精密称定，置锥形瓶中，加新沸放冷的水40ml[1]，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（1mol/L）滴定。每1ml氢氧化钠滴定液（1mol/L）相当于60.05mg的C2H4O2。

3.9 类别

药用辅料，pH值调节剂和缓冲剂等。

3.10 贮藏

置玻璃瓶内，密封保存。

3.11 版本

《中华人民共和国药典》2010年版

4 醋酸说明书4.1 醋酸的别名

醋酸，乙酸

4.2 外文名

Acetic Acid

4.3 性状

醋酸为无色澄明液体；有强烈的特臭，味极酸。

4.4 醋酸的作用与特点

有抗细菌和真菌作用。可引起接触性皮炎，避免与眼睛接触，面部勿用醋酸治疗。治疗甲癣时，不要接触甲沟，否则引起甲沟炎。

4.5 醋酸的药理及应用

0.1％～0.5％溶液用于 *** 滴虫；1％～3％溶液用于绿脓杆菌感染，0.3％溶液50～200ml加温口服，用于缓解胆道蛔虫病的疼痛；食醋薰蒸（2ml/m3）预防流感及感冒。10%冰醋酸溶液，用于治疗手足癣。30%冰醋酸用于治疗甲癣。510%冰醋酸用于治疗花斑癣，体癣。0.22%冰醋酸用于灌洗创面。

4.6 用法与注意

4

试验方法本试验方法中所用滴定分析用标准溶液、杂质测定用标准溶液和试验方法中所用制剂及制品按GB

601、GB

602、GB

603之规定制备，实验用水应符合GB

6682中三级水规格。

4.1

乙酸乙酯（CH3COOC2H5）含量测定

按GB

9722之规定测定，其中：4.1.1

试验条件检测器：热传导检测器；载气及流量：氢气，60mL/min；柱长：2m；固定相：10%聚乙二醇己二酸酯涂于经石油醚浸泡、丙酮洗涤过的401有机担体[0.18～0.28mm(60～80目)]，于150℃老化4h；柱温度：120℃；汽化室温度：170℃；检测器温度：150℃；进样量:

8µL色谱柱有效板高：Heff≤20mm乙酸乙酯不对称因子：f≤2.3。各组分相对主体的相对保留值：r水，乙酸乙酯

=0.18；r甲醇，乙酸乙酯

=0.27；r乙醇，乙酸乙酯

=0.42；r乙酸甲酯，乙酸乙酯

=0.72。4.1.2

定量方法按GB

9722中8.2条之规定测定，需校正组分水、甲醇和乙醇相对于乙酸乙酯的质量校正因子分别为f水/乙酸乙酯

=0.55,

f甲醇/乙酸乙酯

=0.65,

f乙醇/乙酸乙酯

=0.74。4.2

密度测定按GB

611中5.1条之规定测定。4.3

色度测定量取50mL试样，注入100mL比色管中，按GB

605之规定测定。4.4

杂质测定

试样量取须精确至0.1mL。4.4.1

蒸发残渣量取222.2mL(200g)试样[化学纯取55.5mL(50g)]，按GB

9740之规定测定。4.4.2

水分同4.1条。4.4.3

酸度量取10mL95%乙醇，加2滴酚酞指示液(10g/L)，摇匀，用氢氧化钠滴定分析用标准溶液[c(NaOH)=0.02mol/L]滴定至溶液呈粉红色，并保持30s。加11mL(10g)试样，用氢氧化钠滴定分析用标准溶液[c(NaOH)=0.02mol/L]滴定至溶液呈粉红色，并保持30s。

目的探索工作场所空气中乙醇的气相色谱检测法.方法用洁净100

ml注射器在工作场所常规采样,在给定的色谱条件下,24

h内分析完毕.结果工作场所中乙醇浓度在39.5～3

850

mg/m3(参照美国工作场所最高容许浓度1

900

mg/m3[1])之间时,方法的相对标准偏差(RSD)为1.3%～4.3%,回归方程式Y=32857X-21.3,相关系数r=0.9990,方法检测限为2.0

mg/m3,样品放置24

h损失＜10%.本法的精密度、回收率、稳定性都能达到样品分析的要求,在此分析条件下,样品中共存的甲醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇不干扰测定[2.3],与共存物分离良好.结论本方法建立了一种采样方法简便,分析快速准确,完全可应用于工作场所空气中乙醇浓度测定.

醋，味酸性温，不但是一种传统的调味品，还有广谱的医疗保健功能。食醋中含有大量的有机酸，其中含量较高的是醋酸和乳酸，它们是主要的功效成分和标志性成分。关于有机酸的测定方法，目前，大都采用液相色谱法，相关的国家标准是GB/T5009,157《食品中有机酸的测定》，其适用范围为果蔬及其制品、饮料等食品。我们在测定食醋中的醋酸和乳酸时，采用上述文献报道的方法，结果均不适用；又未见食醋中有机酸测定方法的相关国家或行业标准。本文介绍一种食醋和醋粉中醋酸、乳酸的高效液相色谱测定方法。该方法样品预处理简便有效，测定结果准确，可作为食醋及醋粉质量控制的分析方法。

分析仪器

食醋中醋酸和乳酸含量的检测-液相色谱法

APSH-6510四元高压液相色谱仪

仪器简介

APSH-6510四元高压液相色谱仪，黑科技惊艳首发，真正实现色谱分析自动化，德国品质 整机质保2年。含二元高压优势，弥足四元低压不足。四个高压流动相通道，精准、温度控制，全自动操作，更高效；

2 >应用领域 化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

色谱条件：

色谱柱

APS-C18（4.6mm×150mm，5um）

流动相

2.5%磷酸二氢铵用磷酸调节pH2.65

流速

1.0mL/min

进样量

5μL

检测波长

210nm

检查结果

食醋中醋酸和乳酸含量的检测-液相色谱法

【实验步骤】

1.NaOH溶液的标定

（1）在电子天平上,用差减法称取三份0.4-0.6g邻苯二甲酸氢钾基准物分别放入三个250mL锥形瓶中,各加入30-40mL去离子水溶解后,滴加1-2滴0.2%酚酞指示剂.

（2）用待标定的NaOH溶液分别滴定至无色变为微红色,并保持半分钟内不褪色即为终点.

（3）记录滴定前后滴定管中NaOH溶液的体积.计算NaOH溶液的浓度和各次标定结果的相对偏差.

2.食醋中醋酸含量的测定

（1）用25.00mL移液管吸取食用醋试液一份,置于250mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀.

（2）用移液管吸取25.00mL稀释后的试液,置于250mL锥形瓶中,加入0.2%酚酞指示剂1-2滴,用NaOH标准溶液滴定,直到加入半滴NaOH标准溶液使试液呈现微红色,并保持半分钟内不褪色即为终点.

（3）重复操作,测定另两份试样,记录滴定前后滴定管中NaOH溶液的体积.测定结果的相对平均偏差应小于0.2mL.

（4）根据测定结果计算试样中醋酸的含量,以g/L表示.

丙酮酸检测试剂盒可测各种动物血清（浆）、组织以及培养细胞、细胞培养上清液等样本中丙酮酸含量。丙酮酸与显色剂反应，反应产物在碱性溶液中显红棕色，颜色深浅与丙酮酸含量成正比，通过比色可以测定出丙酮酸的含量。

原理：丙酮酸盐检测试剂盒提供了一种简单、直接和可自动化操作的程序来测量不同生物学标本中丙酮酸的含量。适用标本类型包括：食物、细胞、培养基和发酵培养基。丙酮酸盐检测试剂盒基本原理如下：丙酮酸盐被丙酮酸酶氧化，在酶反应过程中产生颜色（λ=570 nm）或者荧光（Ex/Em=535/587 nm），可使用酶标仪或荧光计检测到。光的强度与丙酮酸含量是成正比的，因此通过检测光的强度即可精确的得到丙酮酸的含量。试剂盒检测范围为1-10 uM丙酮酸。

丙酮酸检测试剂盒

丙酮酸分子式CH3COCOOH，原称焦性葡萄酸(德Brenztr-aubensure)，是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一。丙酮酸可通过乙酰CoA和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化，因此，丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。

丙酮酸是糖无氧代谢的产物，研究工作者将丙酮酸和乳酸一同测定，并用二者的比值推测循环衰竭的严重程度；此外，它还对维生素B1缺乏有一定的研究意义，同时作为一种重要的精细化工中间体,广泛应用于医药、农药、食品等领域,尤其是作为医药中间体,具有良好的发展前景。

应用[4][5]

用于大肠杆菌丙酮酸代谢途径改造及丙酮酸高产菌株培育

丙酮酸作为最重要有机酸之一,在医药、食品、化工等领域以及科学研究中都具有广泛的用途。目前高质量的丙酮酸在国内市场缺口较大,丙酮酸工业化生产的前景十分广阔。

从野生型大肠杆菌K-12 MG1655菌株出发,利用CRISPR/Cas9技术敲除了乳酸脱氢酶基因（ldh A）,截断了乳酸合成途径敲除了丙酮酸氧化酶基因（pox B）、磷酸转乙酰基酶基因（pta）和乙酸激酶基因（ack A）,截断了乙酸合成途径敲除了丙酮酸-甲酸裂解酶基因（pfl B）,截断了甲酸合成途径敲除了磷酸烯醇丙酮酸合成酶基因（pps A）,减少了丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸敲除了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（ppc）,减少了磷酸烯醇式丙酮酸的消耗通过敲除延胡索酸还原酶复合体基因（frd BC）,削弱了三羧酸循环途径。最后得到了一株可以初步积累丙酮酸的基因工程改造菌株MG1655-GP7（E.coli K-12 MG1655Δldh AΔpfl BΔack AΔptaΔpox BΔppcΔfrd BCΔpps A）,这株菌在使用5 L发酵罐发酵68小时后丙酮酸产量达到32.07 g/L。

这表明只利用基因工程的手段是可以使大肠杆菌积累丙酮酸的。大肠杆菌利用葡萄糖作为碳源时,葡萄糖经糖酵解途径会产生过量的ATP与NADH从而抑制丙酮酸的积累,使用氧化程度较高的葡萄糖酸作为碳源可解决此问题当葡萄糖进入细胞后不经EMP途径而是进入Entner-Doudoroff（ED）途径,产生的ATP与NADH的量只有前者的一半,会相应的促进丙酮酸的积累。为了进一步提高产量,作者又敲除磷酸葡萄糖异构酶基因（pgi）以抑制糖酵解途径同时敲除6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因（gnd）以抑制磷酸戊糖途径,并减少6-磷酸-葡萄糖酸的消耗还在敲除磷酸葡萄糖转移酶基因（pts G）和磷酸烯醇丙酮酸葡萄糖转移酶基因（pts I）的基础上敲入运动发酵单胞菌中葡萄糖转运蛋白基因（glf）来改良葡萄糖转运系统,减少大肠杆菌细胞转运葡萄糖时磷酸烯醇式丙酮酸的消耗。

并计划上调葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因（zwf）、葡萄糖酸-6-磷酸脱水酶基因（edd）和2-酮-3-脱氧葡萄糖酸-6-磷酸醛缩酶基因（eda）的表达以强化ED途径,平衡ATP和NADH的水平,引导碳流更多的流向丙酮酸合成方向。

目前通过基因编辑的方法得到了一株生产丙酮酸能力理论上较MG1655-GP7菌株有所提高的MG1655-GP12（E.coli K-12 MG1655Δldh AΔpfl BΔack AΔptaΔpox BΔppcΔfrd BCΔpps AΔgndΔpgiΔpts GΔpts I::glf）菌株,该菌株的生产能力正在评估中。但经多次基因改造后,基因工程菌株MG1655-GP12出现了较野生型菌株生长缓慢的现象,本实验对该菌株进行了实验室适应性进化,经多次传代后筛选到一株生长速度恢复到野生型菌株75%的MG1655-GP12-1菌株。