硫乙醇酸盐流体培养基的培养温度是多少

硫乙醇酸盐流体培养基的培养温度是30-35℃。

液体硫乙醇酸盐培养基(FT)

成分

胰酶消化酪蛋白胨　15.0gL－胱氨酸　

0.5g

无水葡萄糖　5.0g酵母膏　5.0g

氯化钠　2.5g硫乙醇酸钠　0.5g

新配置的0.1%刃天青(Resazurin)　1.0ml琼脂　0.75g

蒸馏水　1000mL

制法

除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解

，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH，使灭菌后在25°C的pH值为7.1

土0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的

1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100°C水浴加热至粉红色消失（不

释

过

2

0

分钟），迅速冷却，只限加热

一次，并防止被污染。除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置30〜

35°C培养。

制作硫乙醇酸盐流体培养基时，需要注意以下问题:

(1）硫乙醇酸盐流体培养基有少量的的琼脂，在灭菌后，培养基应呈现无浑浊状态，如果放置一段时间，出现轻微浑浊，尤其是放入冰箱后，浑浊现象更加明显。浑浊程度一方面可能与培养基用的琼脂质量有关，另一方面也可能与灭菌是否彻底有关，应具体分析。如果是前者可考虑更换培养基厂家或批号、或者更换琼脂，如果是后者则应检查仔细灭菌操作和灭菌设备。

(2)培养基在灭菌后至使用过程中取放应避免摇晃，以免培养基因振动而进入氧气，影响培养基的使用，接种操作应动作迅速、敏捷,否则暴露在空气中过长,培养基被氧化。

配方：

胰酶消化酪蛋白胨——15g

L－胱氨酸——0.5g

葡萄糖——5g

酵母膏——5g

氯化钠——2.5g

硫乙醇酸钠——0.5g

刃天青(Resazurin)—— 0.001g

琼脂——0.75g

蒸馏水——1000mL

pH7.1

各成分作用：

酪胨和酵母出粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长；氯化钠维持均衡的渗透压；硫乙醇酸钠和L—胱氨酸能有效降低氧化还原电位，防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性，同时其硫氢基团有钝化含砷、汞及其它重金属防腐剂的抑菌作用；少量琼脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散；刃天青是氧化还原指示剂，氧化状态呈粉红色，还原状态无色。

2.分装的时候要边搅拌边分装。

3.灭菌好后使用前发现红色层过多（超过整个层高的1/5)，可在沸水浴中加热一次（仅一次，时间不得过20分钟）。

二、原理：硫乙醇酸盐流体培养基的主要成分：胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化钠、 L-胱氨酸（半胱氨酸盐酸盐）、硫乙醇酸钠（硫乙醇酸 0.6 mL）、琼脂、刃天青等。

其中胰酪蛋白胨、酵母浸出粉提供氮源以及供合成蛋白质必须的各种氨基酸和生长因子，葡萄糖提供碳源及能源；氯化钠维持均衡的渗透压；胱氨酸、硫乙醇酸盐、葡萄糖均可降低氧化还原电位的作用，防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性，有利于厌氧菌的生长，另外，硫乙醇酸盐有钝化含砷和汞类药物及其他金属防腐剂的有害作用；刃天青作为氧化还原的指示剂，氧化时呈红色，以此指示培养基的氧化还原电位；琼脂可以防止液体对流，即防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散，有利于厌氧环境的形成。

三、硫乙醇酸盐流体培养基的特点：从硫乙醇酸盐流体培养基的成分分析可以总结出该培养基的特点主要有：

含有较全面的营养，能满足绝大多数细菌的营养需求；

培养基的不同深度上层、中层、下层部位可以分别模拟提供有氧、弱氧至无氧不同氧含量的梯度环境，使厌氧细菌、兼性厌氧细菌、好氧菌均可在此培养基中生长；

成份相对简单，制作简便；

含少量琼脂，流动性与普通液体培养基有区别。

四、使用时的注意事项：制作硫乙醇酸盐流体培养基时，需要注意以下问题：

硫乙醇酸盐流体培养基有少量的的琼脂，在灭菌后，培养基应呈现无浑浊状态，如果放置一段时间，出现轻微浑浊，尤其是放入冰箱后，浑浊现象更加明显。浑浊程度一方面可能与培养基用的琼脂质量有关，另一方面也可能与灭菌是否彻底有关，应具体分析。如果是前者可考虑更换培养基厂家或批号、或者更换琼脂，如果是后者则应检查仔细灭菌操作和灭菌设备。

培养基在灭菌后至使用过程中取放应避免摇晃，以免培养基因振动而进入氧气，影响培养基的使用，接种操作应动作迅速、敏捷，否则暴露在空气中过长，培养基被氧化。

在接种前，氧化层的颜色 (粉红色) 如果超过培养基深度的 1/5，须经水浴煮沸加热至粉红色消失（不超过 20 min），并迅速冷却。培养基加热只限一次，以免培养基质量下降。

刃天青应以新鲜配制为准，否则影响判断。

1，瓶子上部空间不够，氧气不足以形成氧化层

2，指示剂失效（有可能是产品质量问题或灭菌过度造成）

3，瓶子高度不够或流体粘度不够，导致氧化层过深，使得培养基整体变色，看不出氧化层。

时间长了以后还是要出现的，很薄的一层氧化层的。如果一直都没有的话，或者说你在使用时接触空气都没有变色的话，那就要考虑是不是试剂、配制方法等方面是不是有问题了

养基内部的氧气，造成良好的厌氧环境。少量的琼脂能增加培养基的粘度，使空气

中的氧气不易侵入到培养基中，该培养基中还含有厌氧指示剂刃天青，在培养基含

氧的情况下指示剂显红色，使用前若发现培养基粉红色氧化层的高度＞培养基管高

度的1/5时， 应将培养基置100℃水浴中加热除去氧化层 （至培养基无红色氧化层） ，

并迅速冷却备用，但每次加热的时间不得超过 20min，只能加热 1 次。

某些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨水中的色氨酸生成吲哚，当加入吲哚试剂后形成红色的玫瑰吲哚。

氧化酶试验原理

氧化酶使细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌，使细胞色素C氧化，再由氧化型细胞色素C是对苯二胺氧化，生成有色的醌类化合物。

姐姐你要的也太多了，我把我的专业书给你好了。我这两天考试，考完了，慢慢给你打