10×Tris-乙酸（TAE）缓冲液配制方法

1、使用液（0.5×）

0.045mol/L Tris-硼酸 0.001mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，溶液体积为1L。

2、浓贮存液（5×）

54gTris碱 27.5g硼酸 20ml 0.5mol/L EDTA 采用无菌水溶解混匀，NaOH调pH至8.0，溶液体积1L。

组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH最小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算：

此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远，缓冲能力愈小，甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系，存在有效缓冲范围，这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内。

弱酸及其盐（弱酸及其共轭碱）体系pH=pKaφ±1

弱碱及其盐（弱碱及其共轭酸）体系pOH=pKbφ±1

参考资料来源：百度百科-tbe

参考资料来源：百度百科-缓冲液

242g Tris碱

57.1ml冰乙酸

100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

是配置1L 50x的缓冲液

使用的时候取决于你的容器有多大，一般用一个2L的试剂瓶的话，就是40ml储存液+水补满到2L，然后拼命混匀就可以倒进电泳槽作电泳缓冲液或者配置agarose TAE胶了

TAE缓冲液组份浓度：2M Tris-醋酸,100mM EDTA

TAE缓冲液配方体积：1L

TAE缓冲液配制方法：

称量下列试剂,置于1 L烧杯中.

Tris：242g

Na2EDTA·2H2O：37.2g

向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解.

加入57.1 ml的醋酸,充分搅拌.

加去离子水将溶液定容至1 L后,室温保存.

242g TRIS碱

57.1ml 冰醋酸

100ml 0.05mol/LEDTA

称下列试剂，1L烧杯

tris 242g

Na2EDTA.2H2O37.2g

然后加入800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

加入57.1ml的醋酸，充分混匀。

加去离子水定容至1L，室温保存。

需要使用的时候，稀释为1*的，

例如：需要使用200ml的1*TAE，则量4ml的50*TAE，196ml的去离子水，混匀即可。

一、SDS-PAGE电泳所用溶液：

　    1）30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL)

丙烯酰胺 (Arc)                            29 g

N,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis)                  1 g

用双蒸水定容至100mL，过滤备用，4℃存放

丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。

　    2）5×Tris-甘氨酸缓冲液 (1 L)

Tris碱                                 15.1 g

甘氨酸(电泳级)                          94 g

10 %SDS                               50 mL

使用时稀释5倍使用

3）2×SDS凝胶加样缓冲液(10mL)

0.5 mol/L Tris-Cl  (pH 6.8)         2 mL

10％(W/V)SDS                  4 mL

甘油                           2 mL

β-巯基乙醇                    1.0 mL

(DTT（二硫苏糖醇）            0.31g)

溴酚兰                        0.02g

双蒸水                       0.5 mL

室温存放备用

4）考马斯亮蓝染色液

考马斯亮蓝R-250 （G-250）             1.0 g

甲醇                                 450 mL

冰醋酸                               100 mL

ddH2O                               450 mL

0.2g考马斯亮蓝R250+84mL 95％乙醇+20mL冰醋酸，定容至200mL，过滤备用

5）考马斯亮蓝脱色液（甲醇脱色液效果好，但有毒性）

甲醇                                 100 mL

冰醋酸                               100 mL

ddH2O                                800 mL

医用酒精：冰醋酸：水=4.5：0.5：5(V：V：V)

二、SDS-PAGE所需溶液:

A液——30％丙稀酰胺（W/V）：丙稀酰胺29.2g，N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g，加入去离子水定容至100mL，pH值不能超过7.0，过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。B液——1.5mol/L Tris·HCl，pH8.8：18.17g（9.09g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约3mL(1.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至8.8，定容至100mL（50mL）。C液——1.5mol/L Tris·HCl，pH6.8：12.1g（6.05g）Tirs碱，溶于80mL（40mL）去离子水中，加入约7mL(3.5mL)以上的浓盐酸调节pH值至6.8，定容至100mL（50mL）。D液——10％SDS：10g (2g)SDS溶于去离子水中，定容至100mL(20mL)，加热至68℃助溶。E液——10％过硫酸铵：5g(0.5g)过硫酸铵，溶于50mL(5mL)去离子水中；现配现用或分装至0.5mL离心管中冷冻备用。

F液——TEMED(N-N-N`-N`－四甲基乙二胺)原液，室温保存。

三、配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液

热塑性弹性体TPE（Thermoplastic Elastomer） 是一种具有橡胶的高弹性，高强度，高回弹性，又具有可注塑加工的特征，具有环保无毒安全，硬度范围广，有优良的着色性，触感柔软，耐候性，抗疲劳性和耐温性，加工性能优越，无须硫化，可以循环使用降低成本，既可以二次注塑成型，与PP、PE、PC、PS、ABS等基体材料包覆粘合，也可以单独成型。近十余年来，电子电器、通讯与汽车行业的快速发展带动了热塑性弹性体市的高速发展。

可分为（1）苯乙烯类TPE （2）烯烃类TPE （3）二烯类TPE

（4）氯乙烯类TPE （5）聚氨酯类TPE

第二种TPE：

磷酸三苯酯（TPE），与TAE、TBE是三种常用的电泳缓冲溶液，用来研究核酸、蛋白质生物大分子。一般有10×TPE （ Tris- 磷酸）电泳缓冲液，前边是个乘号，而不是你所写的字母X。

三种缓冲液的配制方法

Tris-乙酸（TAE）：50×浓贮存液（每升）：

242g Tris 碱

57.1ml 冰乙酸

100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

使用时再稀释50倍。

Tris-磷酸（TPE）：10×浓贮存液（每升）：

108g Tris 碱

15.5ml 85％磷酸（1.679g /ml）

40ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

使用时再稀释10倍。

Tris-硼酸（TBE）：5×浓贮存液（每升）：

54g Tris 碱

27.5g 硼酸

20ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

使用时再稀释10倍。

性能比较

核酸电泳常采用TAE、TBE、TPE三种缓冲系统，但它们各有利弊。TAE价格低廉，但缓冲能力低，必须进行两极缓冲液的循环。TPE在进行DNA回收时，会使DNA污染磷酸盐，影响后续反应。所以多采用TBE缓冲液。

缓冲液成分作用分析

在缓冲液中加入EDTA，可以鳌合二价离子，抑制DNase，保护DNA。

缓冲液pH常偏碱性或中性，此时核酸分子带负电，向正极移动。

根据你的题目，我想你所问的应该是第二种TPE。

另外，你发现没有，按照你的1X的配方EDTA是0.001mol/L,那么乘以50为0.05mol/L，而50×配方中是0.1mol/L。这两种配方都是正确的：分子克隆附录上面取的是0.05mol/L，takara的技术手册上用的是0.1mol/L，这个影响不大，主要是鳌合Mg，抑制DNase活性。

希望能够帮到你，有问题继续交流！