无水乙醇在叶绿素提取中有什么用?
无水乙醇的作用是溶解色素。
叶绿素a和叶绿素b均可溶于乙醇、乙醚和丙酮等溶剂,不溶于水,因此,可以用极性溶剂如丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等提取叶绿素。
叶绿素(Chlorophyl)是高等植物和其它所有能进行光合作用的生物体含有的一类绿色色素。叶绿素有多种,例如叶绿素a、b、c和d,以及细菌叶绿素和绿菌属叶绿素等,与食品有关的主要是高等植物中的叶绿素a和b两种。
其结构共同特点是结构中包括四个吡咯构成的卟啉环,四个吡咯与金属镁元素结合。叶绿素存在于叶片的叶绿体内。在叶绿体内,叶绿素可看成是嵌在蛋白质层和带有一个位于叶绿素植醇链旁边的类胡萝卜素脂类之间。
当细胞死亡后,叶绿素即从叶绿体内游离出来,游离叶绿体很不稳定,对光或热都很敏感。叶绿素是植物进行光合作用时必须的催化剂。叶绿素a为蓝黑色晶体,熔点150-153℃,叶绿素b为深色晶体,熔点120-130℃。
无水乙醇简介:
无水乙醇是无色澄清液体。有灼烧味。易流动。极易从空气中吸收水分,能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶。能与水形成共沸混合物(含水4.43%),共沸点78.15℃。相对密度(d204)0.789。熔点-114.1℃。沸点78.5℃。折光率(n20D)1.361。
叶绿素是一种酯,易溶于有机溶剂,还因为叶绿素a与叶绿素b结构中均有一个极性的“头部”,所以用有一定含水量的有机溶剂来提取叶绿素效果更好,植物干材料长用95%的乙醇,新鲜材料水分较高则用无水乙醇,若水分过多叶绿素范儿可能会因为溶解度下降而提取液浑浊。
无水乙醇可以提取叶绿素中的色素,而丙酮的作用是萃取色素。因为色素易溶于有机溶剂。
纸层析法提取叶绿素步骤:
①将新鲜菠菜叶片洗净擦干,去叶柄及叶脉.称取样品 8g,剪碎置研钵内,加入 8mL丙酮及少许固体碳酸钠,迅速研磨成匀浆;然后再加入 20mL丙酮充分研磨。
②在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉,将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有 20cm3石油醚的分液漏斗中,再用少量的丙酮冲洗叶片残渣及研钵,合并滤液。
③ 沿分液漏斗的壁小心加入 40cm3蒸镏水,轻轻摇动,使色素转移到上面的石油醚层静置数分钟,待分层清楚后弃去下面的丙酮一一水层.如发生乳化现象可加入 2-3cm3饱和NaCl 溶液.
④ 在分液漏中再加入 40cm3蒸镏水,轻轻摇动,以洗去石油醚中残留的丙酮,共洗两次.然后将叶绿素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中,置暗处或用黑纸包好备用.