2-氟苯酚比苯酚沸点低

方法提要

在酸性条件下，用GDX-502固相萃取柱吸附水中酚类化合物，乙腈解析柱中有机酚，高效液相色谱-紫外检测器检测。

方法适用于饮用水、地下水及湖库水中苯酚、对硝基酚、间甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚6种酚类的测定。对水中6种酚通常可检测到10～50ng/L水平。

仪器

高效液相色谱仪带紫外检测器，恒流梯度泵系统。

色谱柱WatersSymmetryC8，4.6mm×250mm，粒径5μm或性质相似的色谱柱。

GDX-502固相萃取小柱将使用过的SPE小柱填充物去掉并清洗干净，湿法加入约为0.5g纯化溶胀后的GDX-502树脂，打开活塞放出甲醇，直到液面刚好达到树脂床顶部。用10mL乙腈淋洗树脂，再用10mL水淋洗树脂，每次淋洗保持液面不低于树脂床。

针头过滤器孔径0.45μm，直径13mm，有机系。

固相萃取装置12管固相萃取装置。

真空泵。

采样瓶1L具磨口玻璃塞的棕色玻璃细口瓶。

氮吹仪。

微量注射器10μL、50μL、100μL、1000μL等气密性微量注射器。

K.D浓缩瓶25mL，带1mL定量管，须标定容积后使用。

试剂

空白试剂水去离子水蒸馏再经Millipore处理。

高效液相色谱流动相为水(含1%乙酸)和乙腈的混合溶液。

碳酸氢钠溶液c(NaHCO3)=0.05mol/L。

硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)。

乙腈，甲醇HPLC级。

丙酮(C3H6O)农残级。

乙酸。

盐酸。

标准储备溶液苯酚、对硝基酚、间甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚六种的混标，购自国家标准物质研究中心。保存在-18℃冰箱中。

GDX-502树脂使用前用丙酮浸泡数日，数次更换新溶剂到丙酮无色。再用乙腈回流提取6h以上。纯化后的树脂密封保存在甲醇中备用。

替代物标准2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚混标。

样品的采集与保存

1)水样采集。必须采集在玻璃容器中，在采样点采样及盖好瓶塞时，样品瓶要完全注满，不留空气。若水中有残余氯存在，要在每升水中加入80mg硫代硫酸钠除氯。

2)水样保存。避光、4℃下中保存。采样后7d内完成提取。40d内完成分析。

分析步骤

1)水样预处理。用孔径0.45μm的玻璃纤维滤膜，去除水中机械杂质。根据水中酚类化合物含量，取水样50～1000mL，加入2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚等替代物标准，用6mol/LHCl调至pH2。水样以10mL/min的流速流经已活化的GDX-502固相萃取柱。当水样完全流过柱子后，用0.05mol/L碳酸氢钠溶液10mL淋洗柱子。用N2或空气将柱中水分充分抽干。用4mL每次1mL乙腈淋洗小柱，前两次淋洗液需在柱中平衡10min，后两次平衡2min，合并淋洗液，最终用乙腈定容为1.00mL。0.45μm有机相滤膜过滤，HPLC分析。

2)校准曲线。

3)高效液相色谱分析条件。

紫外检测器:双波长检测，检测波长280nm和290nm。柱温35℃。

流动相组成:A泵，99%水+(1+99)乙酸B泵，100%乙腈。

流动相流量:1mL/min，恒流。梯度洗脱，洗脱程序，见表82.41。

表82.41 洗脱程序

4)色谱图的考察。见图82.13。

定性与定量分析

1)定性分析。以样品保留时间和标样保留时间相比较来定性。根据标准色谱图各组分的保留时间，确定出被测样品中目标物数目和名称。对有检出的样品需用其他方法确证，如GC-MS等技术。

图82.13 六种标准酚类样品在不同检测波长下的液相色谱图(2μg/mL)

2) 定量分析。每个工作日必须测定一种或几种浓度的标准溶液来检验校准曲线或响应因子。如若某一化合物的响应值与预期值间的偏差大于 10%，则必须用新的标准对该化合物绘制新的校准曲线或求出新的响应因子。使用紫外检测器时，6 种酚类的最大吸收波长不同，为提高分析灵敏度，苯酚、间甲酚采用 280nm 波长定量对硝基酚、2，4 -二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚采用 290nm 波长定量。计算公式参见式 (82.16) 。

方法性能指标

1) 精密度、检出限和线性范围。按实验方法，配制浓度为 0.5μg / mL 酚类混合标准样品，按选定的工作条件分析，重复检测 7 次，计算方法的精密度。检出限的测量是以相对于基线噪音 3 倍时组分峰高所对应的浓度。各组分的精密度、检测下限和线性范围见表82.42。

表82.42 方法精密度、检出限及线性范围

2) 准确度。分别将 50μL 浓度为 2μg / mL 的混合标准样品加入 0.25L 和 1.0L 试剂空白水中，用 502 树脂固相萃取柱吸附富集，洗脱后定容 1.0mL，HPLC 测定，计算加标回收率。结果见表82.43。

表82.43 方法的准确度

3) 基体加标回收率。从北京不同地区取护城河水过滤后，分别取 1L 水加入表82.44中不同量的标准样品，及未加入标准样品的 1L 水，经水样预处理，在 HPLC 上检测，得到加标回收率。

表82.44 地表污水加标回收率

注: 2-氟苯酚、2，4，6-三溴苯酚为替代物，回收率均符合控制限要求。

中文名称

2,5-二氟苯酚

中文别名

2,4-二氟硝基苯

英文名称

2,5-Difluorophenol

英文别名

2,5-Difluorphenol3,6-difluorophenolPhenol,2,5-difluoro2,5-diflurophenol1,4-Difluoro-2-hydroxybenzene5-Difluorophenol2,5-difluoro-phenol

CAS号

2713-31-7

合成路线：

1.通过三甲氧基硼烷和1,4-二氟苯合成2,5-二氟苯酚

2.通过1,4-二氟苯合成2,5-二氟苯酚

更多路线和参考文献可参考http://baike.molbase.cn/cidian/4665

1、—氧化还原滴定法。供试品加水溶解，取适量置碘瓶中，精密加溴滴定液（0.05mol/L）后再加盐酸，立即密塞，振摇30分钟，静置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液，立即密塞，充分振摇后，加三氯甲烷，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算苯酚的含量。

2、碘化钾试液检测法。取碘化钾16.5g，加水使溶解成100mL，本液应临用新制。

3、淀粉指示液。取可溶性淀粉0.5g，加水5mL搅匀后，缓缓倾入100mL沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得，本液应临用新制。

中文名称

2,6-二氟苯酚

英文名称

2,6-Difluorophenol

英文别名

2,6-Difluor-phenol2,6-F2C6H3OH

CAS号

28177-48-2

合成路线：

1.通过2,6-二氟苯甲醚合成2,6-二氟苯酚

2.通过2-氯-6-氟苯酚合成2,6-二氟苯酚

更多路线和参考文献可参考http://baike.molbase.cn/cidian/25812

中文名称

6-溴-2,3-二氟苯酚

中文别名

2,3-二氟-6-溴苯酚

英文名称

6-Bromo-2,3-difluorophenol

英文别名

Phenol,6-bromo-2,3-difluoro6-bromo-2,3-diflurophenol6-bromo-2,3-difluoro-phenol

CAS号

186590-23-8

合成路线：

1.通过2,3-二氟苯酚合成6-溴-2,3-二氟苯酚，收率约89%；

更多路线和参考文献可参考http://baike.molbase.cn/cidian/1588378

中文名称

4-氨基-2,6-二氟苯酚

英文名称

4-Amino-2,6-difluorophenol

英文别名

2,6-difluoro-4-aminophenol3,5-Difluoro-4-hydroxyaniline

CAS号

126058-97-7

上游原料

CAS号

中文名称

658-07-1

2,6-二氟-4-硝基苯酚

28177-48-2

2,6-二氟苯酚

更多上下游产品参见：http://baike.molbase.cn/cidian/14517

中文名称

2,3-二氟-6-硝基苯酚

中文别名

6-硝基-2,3-二氟苯酚

英文名称

2,3-DIFLUORO-6-NITROPHENOL

英文别名

2-hydroxy-3,4-difluoro

nitrobenzene6-Nitro-2,3-difluorophenol2,3-difluor-6-nitrophenol2-nitro-5,6-difluorophenol2,3-difluoro-6-nitro-phenol2,3-difluoro-6-nitrophenole2,3-BUTANEDIONE-13C2phenol,2,3-difluoro-6-nitro

CAS号

82419-26-9

合成路线：

1.通过2,3,4-三氟硝基苯合成2,3-二氟-6-硝基苯酚，收率约85%；

2.通过2,3,4-三氟硝基苯和甲醇钠合成2,3-二氟-6-硝基苯酚

更多路线和参考文献可参考http://baike.molbase.cn/cidian/13591

中文名称

2-溴-6-氟苯酚

中文别名

2-氟-6-溴苯酚

英文名称

2-Bromo-6-fluorophenol

英文别名

2-Fluoro-6-bromophenol2-Brom-6-fluor-phenolPhenol,2-bromo-6-fluoro

CAS号

2040-89-3

上游原料

CAS号

中文名称

367-12-4

2-氟苯酚

38573-88-5

2,3-二氟溴苯

下游产品

CAS号

名称

2040-89-3

2-溴-6-氟苯酚

100-39-0

溴化苄

74-96-4

溴乙烷

更多上下游产品参见：http://baike.molbase.cn/cidian/102082

测定葡萄糖氧化酶(GOD,E.C.1.1.3.4)最广泛使用的方法,是利用葡萄糖氧化酶—辣根过氧化物酶—邻联茴香胺偶联反应,用分光光度法测定但邻联茴香胺是致癌物,有必要选择毒性较低、灵敏度较高的新染料代替之。国外曾有报道,邻联甲苯胺、邻甲苯胺及2,6-二氯苯酚等一些染料可作为邻联茴香胺的代用品,但前二种仍有致癌性。国内虽有利用GOD酶法、用4-氨基安替比林偶联酚测定血清中葡萄糖含量(Trinder反应)的报道,并指出Barham及Trinder1972年提出用2.4-二氯苯酚代替酚,灵敏度更高,但直接用以测定GOD活性的方法尚未见报道。本文根据Trinder反应原理,选用2,4-二氟苯酚和苯酚共同做为该偶联反应的氧供体。