加入无水乙醇后dna 为什么会沉淀

1.DNA不溶于乙醇

2.乙醇可以吸附水分子（极性相同）,使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.

3.附：乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间的斥力,才能沉淀完全.

酶切后片段直接用无水乙醇沉淀的方法

把酶切体系先加入等体积氯仿抽提，然后离心去掉氯仿，取水层，加入2倍体积的冷乙醇，混匀放入低温冰箱进行醇沉。然后再离心吸掉乙醇晾干，用纯水溶解就行了

需要注意的就是醇沉之后的离心，因为连接体系一般都是很小的10ul左右，所以沉淀下来的DNA是肉眼根本看不到的，所以可以在离心的时候记住EP管放的方向，那样就能猜出沉淀在管的什么位置.吸乙醇的时候要小心避开。

这个问题太笼统了，由于糖蛋白中糖含量可以由90%以上到1%以下，只要含有糖和蛋白且以共价键连接都可以叫糖蛋白，糖含量较多的当然性质就像糖，蛋白含量占主要的就和蛋白的性质相近。无水乙醇是可以沉淀蛋白的，在我们具体操作中，也可以用乙醇来沉淀多糖，所以，原理上说，无水乙醇是可以沉淀糖蛋白的，但是大多是大分子的，分子量过小的话很难沉淀下来

乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。

换句话就是DNA这个比较娇贵。

乙醇比较柔和，所以用乙醇。

我做乙醇沉淀的时候按以下步骤：1）酶切、去磷酸产物用dd水稀释至100ul，2）加入100ul酚氯仿，1，3000rpm离心5min3) 将上清取出，置于另一个0.5ml的EP管中，加入10ul 3M NaAc,200ul 无水乙醇，－20度放置1hr4) 1,3000rpm离心10min5) 倒掉上清，用pippet吸掉残余的乙醇，加入100ul75％乙醇，震荡，1，3000rpm离心5min6) 倒掉上清，用pippet吸掉残余的乙醇,空气中放置15min，待乙醇挥发干净，加入20－30ul ddH2O 溶解DNA.请问，在不降低纯化的质量和回收率的情况下，以上步骤那些地方可以节省时间？小于多少bp的DNA不能用乙醇沉淀法？我在第4、5步离心完毕，从来没有看到过管子底部有白色的DNA,不管是PCR产物还是质粒，但跑电泳是可以看到的，但不亮。请问，裸眼可以看到的DNA，量至少要多少ug?双酶切质粒的多克隆位点时，要切下一小段DNA（5－50bp）,这段DNA在乙醇沉淀时是不是也要沉淀下来？因为后续的操作可能是连接，它的存在对连接的效率是又影响的

正常现象，这是由于在氯仿异戊醇(或苯酚)抽提过程中植物色素等杂质没有完全抽提干净，可以由以下几个措施避免：一、用专用的植物DNA提取试剂盒，杂质会比较少一点；二、尽量使用幼嫩的植物组织提取，减少样品中色素含量；三、用氯仿异戊醇多抽提几次，将色素蛋白多糖等杂质萃取干净；四、加乙醇冷冻沉淀后不要离心，用枪头挑出其中的絮状DNA，可以减少杂质残留。话说有褐色其实影响也不大，做普通的PCR还是能用的。

作用：

乙醇沉淀是利用大部分水溶性物质不溶于乙醇的原理。无水乙醇做洗涤剂除掉其他有机杂质，达到纯化的目的。无水乙醇洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用和保存。再有无水乙醇易挥发，干燥过程的损失少。

无水乙醇：又称无水酒精，指浓度大于99％(质量)的乙醇。主要作为溶剂，用于化妆品、制药等工业。是无色澄清液体。有灼烧味。易流动。极易从空气中吸收水分，能与水和氯仿、乙醚等多种有机溶剂以任意比例互溶。