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除了改良苯酚品红染色,还有哪些染色方法可以检测植物细胞程序性死亡,其原理是

老迟到的服饰
温柔的铃铛
2022-12-29 11:40:44

除了改良苯酚品红染色,还有哪些染色方法可以检测植物细胞程序性死亡,其原理是

最佳答案
能干的金鱼
追寻的朋友
2026-05-09 17:09:48

用台盼蓝染色,死细胞会被染成蓝色,而活细胞不着色,从而判断细胞死活

死细胞的鉴别一般通过DNA结合染料排除,利用死细胞膜通透性增大、不破膜的情况下DNA染料即可进入的特点区分出死细胞,但所用染料浓度、时间远远低于细胞周期所用的浓度,并且不需要固定。

常用的核酸结合死活鉴别染料包括:

碘化丙啶(propidium iodide,PI)

4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride,DAPI)

7-氨基 - 放线菌素D(7-amino-actinomycin D ,7-AAD)

DRAQ7

SYTOX

不过对于一些胞内抗原(细胞因子、转录因子),由于需要固定、破膜,所以上述染料中,除了一些胺类染料(如Live/Dead、Ghost等)和新型蒽醌类染料CyTRAK Orange外,其它染料不再适合此类标本的细胞死活鉴别。

这里,只向大家讲解一下用PI、7-AAD、DAPI的染色方法,其它商品化死活染料请按照说明书操作:

1. 用0.5ml 1×PBS重悬细胞。

2. 加入PI或DAPI或7-AAD,终浓度分别为PI(5 µg/ml)、DAPI(500-1000 ng/ml)、7-AAD(2.5 µM)

3. 加入上述染料后,尽快上机,一般不要超过5分钟(有些厂家说明书写着10分钟,可能与浓度有关,可按照说明书操作)。

PI检测通道:使用488 nm激发,用610/20 BP收集

DAPI检测通道:最好用355nm激发,用440/40BP收集;也可以用405nm激发,450/50BP收集

7-AAD检测通道:用488nm激发,用670/14BP收集

下图是用PI检测细胞死活的结果图:

1、细胞死亡:细胞死亡作为生物体的一种常见现象,在动物细胞中有三种方式:凋亡(apoptosis),自噬(autophagy)和坏死(necrosis)。前两种类型属于细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)。细胞坏死是细胞在遭受极度刺激时引起的细胞死亡,以细胞质膜的破裂为特征,造成内含物的炎性泄露,是一种非正常死亡。细胞的PCD是细胞的一种“主动性”死亡行为,从形态上和功能上都与细胞坏死有很大的不同。

2、植物中细胞程序性死亡(PCD):目前可依据液泡膜破裂后,是否在细胞质中发生快速降解将PCD分为两个大类。第一类为自溶性(autolytic)PCD,与液泡中的水解酶的释放有关,在液泡破裂后,导致细胞质的快速清除。第二种为非自溶PCD,(non-autolytic),即液泡膜破裂但是没有出现快速的细胞质的清除。目前鉴定细胞的PCD类型,还是以细胞形态学为主。

3、动植物细胞凋亡标准:动物:凋亡:凋亡小体,或者在细胞表面的水泡,感染病原体后在其他细胞中的降解。自噬:自噬小体,自溶酶体,和小的促进细胞溶解的液泡数目的增加坏死:没有上面的定义的标准。植物:自溶:植物膜破裂之后对细胞质的快速清理。非自溶:没有对细胞质的快速清理。其他:染色质浓缩细胞核破裂自我标记信号自食信号细胞膨胀,细胞器膨胀,质膜破裂染色质浓缩。液泡体积增加(细胞质体积减小)需要Ca2+的内流,细胞质皱缩,细胞器膨胀,小泡增多但体积不增加。

最新回答
清脆的铃铛
曾经的大侠
2026-05-09 17:09:48

改良苯酚品红溶液的作用是:对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。用改良苯酚品红染色液还能提高工效,简易节约的优点。

苯酚品红染液,又称石炭酸—品红染液。生物学上常用作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

改良苯酚品红染液配法顺序如下:

原液A:取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中,此液可以长期保存。原液B:取A液10毫升加入90毫升5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2周内使用)。原液C:取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛(可长期保存)。染色液:取C液10-20毫升,加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。放置2周后使用,染色效果显著,可普遍用于植物组织的压片法和涂片法,使用2-3年不变质。山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用。如果没有山梨醇,也能染色,但效果稍差。改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效,简易节约的优点。

饱满的高山
超帅的烤鸡
2026-05-09 17:09:48
改良苯酚溶液是碱性品红的70%酒精溶液(常称A液),加入9倍体积的5%苯酚(B液),之后加入冰醋酸和甲醛(C液),再与醋酸和山梨醇配,放置2周。

是用于观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。

相较于以前用的醋酸洋红染液,他不需要花大量时间煮沸配置随配染液,实验程序大幅简化,成本降低。

大气的茉莉
负责的中心
2026-05-09 17:09:48
卡宝染色解决方案目录

也被称为改良苯酚品红改良苯酚品红。

被称为前三种涂料,相映成染色液的制备方法。原液A:以:碱性品红克(长期保存)溶解在100毫升70%乙醇中。库存溶液B:采取原液A10ml,加入90ml的5%石炭酸水溶液(限2周)。原液C:取原液B45ml,冰乙酸和福尔马林(37%甲醛),6毫升(长期保存)。染色溶液:涂料C10??20ml中,90毫升加45%醋酸和80多个山梨醇1.8克,配成的10%至20%的苯酚品红溶液,一般两个星期后着色能力显著增强。淡染或延长染色浓度为2?10%的可用的,防污染色液的浓度可以根据需要改变,可使用的浓度为30%,然后45%的乙酸的分离。 (山梨糖醇辅助剂稳定的染色解决方案,而山梨糖醇也略差,但着色效果。)

作用原理

该解决方案的优势,方便醋酸洋红染色,但也Schiff试剂的优势,核和染色体染色,染色效果可靠。该解决方案是适用于各种大小的动物和植物的染色体染色体和减数分裂染色体,具备相当雄厚的染色性能,室温保存两年不变质。随着卡诺的解决方案通过类似的。

聪明的可乐
动人的热狗
2026-05-09 17:09:48

染成红色。

苯酚品红染色液与醋酸洋红有相似之处,生物学上也常用作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。染色体染色时用醋酸洋红染色液染色, 虽然染色效果较好, 但却存在着染色需时较长的问题。

改良苯酚品红染液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定。改良苯酚品红染液采用改良配方,加入衬染剂,使染色效果更佳。主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色,是很好的细胞核、线粒体染色剂。

扩展资料:

改良苯酚品红染液的制作:

原液A:取3克碱性品红溶于100毫升70%酒精中,此液可以长期保存。

原液B:取A液10毫升加入90毫升5%苯酚水溶液中(2周内使用)。

原液C:取B液55毫升加入6毫升的冰醋酸和6毫升38%的甲醛。

染色液:取C液10-20毫升,加入90-80毫升45%醋酸和1.5克山梨醇。放置2周后使用,染色效果显著,可普遍用于植物组织的压片法和涂片法,使用2-3年不变质。

参考资料来源:百度百科-苯酚品红染液

虚心的龙猫
天真的导师
2026-05-09 17:09:48
醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在“观察植物细胞有丝分裂”(即“观察根尖分生区组织细胞”)时,对染色体进行染色,需要用碱性染液,此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还能提高工效,简易节约的优点。

可以说没区别,化学本质不同,但是作用效果是一样的。

虚幻的盼望
害怕的诺言
2026-05-09 17:09:48
卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid or carnoys

fixative)适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力。

根尖材料固定15—20min即可。

花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h。

染色后多用于观察植物根尖细胞分裂状态。

改良苯酚品红,又称卡宝染色液(Carbol fuchsin),又称改良石炭酸品红,

此液适于动植物各种大小的染色体、体细胞染色体和减数分裂染色体,并具有相当牢固的染色性能,保存性好,室温下两年不变质。

本品与卡诺氏液作用相似。

望采纳~~

俏皮的蜡烛
潇洒的奇异果
2026-05-09 17:09:48
生物实验中颜色反应的总结

1.斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+菲林试剂→砖红色沉淀

注意:菲林试剂的甲液和乙液要混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件是需要加热。

应用:检验和检测某糖是否还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。

2.苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪

原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。

3.双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色

注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件不需要加热。应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。

4.碘液检测淀粉和观察动植物细胞的基本结构的染色剂原理:淀粉+碘液→蓝色;碘液能使动植物细胞着色。注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。

应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉;验证光合作用产生淀粉;在观察动植物细胞基本结构细胞膜、细胞质、细胞核时用碘液做染色剂,使细胞核染上颜色便于观察。

5.DNA的染色与鉴定

染色原理:DNA+甲基绿→绿色应用:可以显示DNA在细胞中的分布鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色

应用:用于DNA粗提实验的鉴定试剂

6.吡罗红使RNA呈现红色原理:RNA+吡罗红→红色

应用:可以显示RNA在细胞中的分布。

7.台盼蓝使死细胞染成蓝色

原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。

应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。

8.线粒体的染色

原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。

应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。

9.酒精的检测

原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。

10.CO2的检测

原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。

应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。

11.染色体(或染色质)的染色

原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液、醋酸洋红溶液、改良苯酚品红染液)染成深色。

应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂;观察低温诱导植物细胞染色体数目变化;植物花药离体培养时,可以通过染色镜检来确定其中的花粉是否处于适宜离体培养的发育期。

12.吲哚酚试剂与维C溶液呈褪色反应

原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维C具有还原性,能将其褪色。

维生素C溶液在中性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成无色,在酸性条件下可使吲哚酚试剂由蓝色变成粉红色。也可以用氯化铁溶液代替吲哚酚试剂,维生素C溶液可把黄色的氯化铁溶液还原成无色的氯化亚铁溶液。

应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C。

13.亚硝酸盐的检测出现玫瑰红

原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

14.脲酶的检测

原理:细菌合成的脲酶可以将尿分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红。

应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。

15.伊红美蓝检测大肠杆菌

原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈深紫色。

应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。

16.刚果红检测纤维素分解菌

原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

应用:筛选纤维素分解菌。

17.植物花粉细胞核的染色

原理:在做月季的花药离体培养实验时,选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素,一般在单核靠边期花药培养成功率最高。选择花药时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法有醋酸洋红法(花粉细胞核内有染色体,染色体主要由DNA和蛋白质组成,醋酸洋红为碱性染色剂,染色体易被碱性染料染色。通过染色,可以确定细胞核为单核期,还是双核期,还可以确定其花粉的发育是单核居中期还是单核靠边期)。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。

应用:月季花药离体培养时,通过染色镜检确定花粉是否处于适宜的发育期。

爱笑的铃铛
听话的酒窝
2026-05-09 17:09:48
A、改良苯酚品红染液的作用是染色,不是用于固定,A错误;

B、体积分数为95%的酒精可用于洗涤细胞固定过程中使用的卡诺氏液和解离细胞,B正确;

C、洋葱不定根在冰箱低温室内诱导36h,可抑制细胞分裂中纺锤体的形成,C错误;

D、经过解离、漂洗、染色和制片,在显微镜下观察,发现只有少部分细胞的染色体数目加倍,D错误.

故选:B.