聚乙二醇融合法
具体操作过程如下:取等量、密度相近的两种不同原生质体悬浮液,在玻璃容器内混合均匀,取150μL左右的原生质体悬浮液滴在盖玻片上,缓慢加入450μL左右的PEG溶液,放在2030摄氏度条件保温培养0.51h,然后用原生质体培养介质将原生质体漂洗几遍以除去PEG,再将原生质体样品重新悬浮在培养介质中。
聚乙二醇法(PEG)为我国学者高国楠首创,是最成功的原生质体融合技术。PEG作为一种高分子化合物,由于PEG分子中醚键的存在使其分子末端带有微弱负电荷,能与水、蛋白质、糖等极性物质的正极形成氢键。当PEG分子足够长时,可作为邻近原生质表面之间的分子桥而使之粘连。PEG也能连接Casuperscript2+superscript等阳离子,Casuperscript2+superscript可在一些负极化基团和PEG之间形成桥,因而促进粘连。
在洗涤过程中,连接在原生质体膜上的PEG分子可被洗脱,这样将引起电荷的紊乱和再分布或使膜表面局部脱水,或改变构型使原生质类脂“液态”化而引起融合。PEG法已经广泛地用于原生质体融合,因为它能得到较高的异核体产率,对大多数细胞的毒性都很低,利于形成双核异核体。
PEG促融合是非特异的,因此对种间融合、基因间融合都是有用的。PEG法的缺点是对原生质体有一定毒害,而且融合率一般较低,不超过1%。
聚乙二醇(PEG)分子能改变各类细胞的生物膜结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用,从而使细胞发生融合,从而形成杂种细胞。聚乙二醇PEG具有强烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白质的作用,能够有效地促进植物细胞以及动物细胞的融合。
聚乙二醇法(PEG)为我国学者高国楠首创,是最成功的原生质体融合技术。PEG作为一种高分子化合物,由于PEG分子中醚键的存在使其分子末端带有微弱负电荷,能与水、蛋白质、糖等极性物质的正极形成氢键。当PEG分子足够长时,可作为邻近原生质表面之间的分子桥而使之粘连。PEG也能连接Casuperscript2+superscript等阳离子,Casuperscript2+superscript可在一些负极化基团和PEG之间形成桥,因而促进粘连。
在洗涤过程中,连接在原生质体膜上的PEG分子可被洗脱,这样将引起电荷的紊乱和再分布或使膜表面局部脱水,或改变构型使原生质类脂“液态”化而引起融合。PEG法已经广泛地用于原生质体融合,因为它能得到较高的异核体产率,对大多数细胞的毒性都很低,利于形成双核异核体。
PEG促融合是非特异的,因此对种间融合、基因间融合都是有用的。PEG法的缺点是对原生质体有一定毒害,而且融合率一般较低,不超过1%。
具体操作过程如下:取等量、密度相近的两种不同原生质体悬浮液,在玻璃容器内混合均匀,取150μL左右的原生质体悬浮液滴在盖玻片上,缓慢加入450μL左右的PEG溶液,放在2030摄氏度条件保温培养0.51h,然后用原生质体培养介质将原生质体漂洗几遍以除去PEG,再将原生质体样品重新悬浮在培养介质中。
聚乙二醇的单体为乙二醇;
聚乙二醇磷酸酯的单体为乙二醇磷酸酯;
单体的不同,导致聚合反应之后的高聚物结构不同。
聚乙二醇:无刺激性,味微苦,具有良好的水溶性,并与许多有机物组份有良好的相溶性。它们具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等,在化妆品、制药、化纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着极为广泛的应用。
聚乙二醇广泛用于多种药物制剂,如注射剂、局部用制剂、眼用制剂、口服和直肠用制剂。固体级别的聚乙二醇可以加入液体聚乙二醇调整黏度,用于局部用软膏;聚乙二醇混合物可用作栓剂基质;聚乙二醇的水溶液可作为助悬剂或用于调整其他混悬介质的黏稠度;聚乙二醇和其他乳化剂合用,增加乳剂稳定性。此外,聚乙二醇还用作薄膜包衣剂、片剂润滑剂、控释材料等。
在C4植物叶肉细胞的叶绿体中,在有关酶的作用下,一个CO2被一个PEP所固定,形成一个C4,C4进入维管束鞘细胞的叶绿体中,释放出1个CO2,并且形成一个含有3个碳原子的有机酸---丙酮酸。释放出来的CO2先被一个C5固定,很快形成2个C3。在有关酶的作用下,一些C3接受NADPH和ATP释放出来的能量并且被NADPH还原,然后经过一系列复杂的变化,形成糖类等有机物;另一些C3经过复杂的变化,又形成C5,从而使暗反应阶段的反应不断的进行下去!
注:PEP---磷酸烯醇式丙酮酸----一种三碳化合物
PEG:聚乙二醇,诱导细胞融合的诱导剂。
植物体细胞杂交是指用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,并且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。植物体细胞杂交的第一步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。去除细胞壁的常用方法是酶解法,即用纤维素酶和果胶酶等分解植物细胞的细胞壁。第二步是将两个具有活力的原生质体放在一起,通过一定的技术手段进行人工诱导实现原生质体的融合。常用的诱导方法有两大类:物理法和化学法。物理法是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合。化学法是用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂诱导融合。第三步是将诱导融合得到的杂种细胞,和植物组织培养的方法进行培育,就可以得到杂种植株。植物体细胞杂交的最大优点是可以克服植物远缘杂交不亲和的障碍,大大扩大了可用于杂交的亲本基因组合的范围。
1、用途不同
乙二醇主要用于制聚酯涤纶,聚酯树脂、吸湿剂,增塑剂,表面活性剂,合成纤维、化妆品和炸药,并用作染料、油墨等的溶剂、配制发动机的抗冻剂,气体脱水剂,制造树脂、也可用于玻璃纸、纤维、皮革、粘合剂的湿润剂;
聚乙二醇在化妆品、制药、化纤、橡胶、塑料、造纸、油漆、电镀、农药、金属加工及食品加工等行业中均有着极为广泛的应用。
2、性质不同
乙二醇是无色无臭、有甜味液体,对动物有毒性,人类致死剂量约为1.6 g/kg。乙二醇能与水、丙酮互溶,但在醚类中溶解度较小;
无毒、无刺激性,味微苦,具有良好的水溶性,并与许多有机物组份有良好的相溶性。它们具有优良的润滑性、保湿性、分散性、粘接剂、抗静电剂及柔软剂等。
3、沸点和闪点不同
乙二醇的沸点为197.3℃,闪点为111.1℃;
聚乙二醇的沸点>250℃,闪点为270℃。
参考资料:百度百科-聚乙二醇
参考资料:百度百科-乙二醇
植物的:物理方法,离心,震动,电刺激
化学,peg
动物:前两者和植物一样
多了生物方法,灭火的病毒
在细胞工程中普遍认为聚乙二醇(PEG)分子能改变各类细胞的生物膜结构,使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用,从而使细胞发生融合