实验中三氯乙酸,碘乙酸,硫酸肼三种试剂分别起什么作用
1.三氯乙酸:蛋白酶抑制剂,使酶失活。
碘乙酸:抑制剂,抑制3-磷酸甘油醛脱氢酶。
硫酸肼:稳定剂,防止3-磷酸甘油醛自然分解。
2.三氯乙酸的作用:主要用于有机合成和制备医药、也可用作化学试剂、杀虫剂。
碘乙酸的作用:用作分析试剂,染料制备,有机合成与酶的抑制剂。
硫酸肼的作用:用作分析试剂,如作沉淀剂、还原剂。还用于有机合成。
累积管颜色最深,即不加三氯乙酸,但是加入碘乙酸和硫酸肼的一支试管。因为三氯乙酸是蛋白酶抑制剂,使酶失活,碘乙酸是抑制剂,抑制中间产物磷酸丙糖继续酵解,硫酸肼是稳定剂,防止生成的磷酸丙糖转化为其他产物。于是,此试管中积累了大量的磷酸丙糖,在碱性条件下可与2,4-
二硝基苯肼发生成腙反应,生成相应的棕红色的苯腙。
糖酵解实验最后颜色累积管颜色最深。
因为三氯乙酸是蛋白酶抑制剂,使酶失活,碘乙酸是抑制剂,抑制中间产物磷酸丙糖继续酵解,硫酸肼是稳定剂,防止生成的磷酸丙糖转化为其他产物。
3-磷酸甘油酸重排生成2-磷酸甘油酸,2-磷酸甘油酸脱水生成磷酸烯醇式丙酮酸PEP(phospho-enol-pyruvate)。PEP将磷酸基团转移给ADP生成ATP,同时形成丙酮酸。
物质概述
生物在无氧条件下,从糖的降解代谢中获得能量的途径,也是大多数生物进行葡萄糖有氧氧化的一个准备途径。在此过程中,六碳的葡萄糖分子经过十多步酶催化的反应,分裂为两分子三碳的丙酮酸,同时使两分子腺苷二磷酸(ADP)与无机磷酸(Pi)结合生成两分子腺苷三磷酸(ATP)。
以上内容参考:百度百科-糖酵解
试管2,因为加入碘乙酸,对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的起抑制作用,使中间产物积累,因而与显色剂反应颜色最深,但是碘乙酸只是起到延缓作用,还是有少量葡萄糖酵解为水和二氧化碳。
试管3,因为步骤一中未加入三氯乙酸也未加碘乙酸,所以反应正常进行,中间产物没有积累,被酵母分解为水和二氧化碳,所以气泡最多。但是在终止发酵时仍有一部分的中间产物生成无法进一步反应,中间产物比试管1多而比试管3少,因此与显色剂反应颜色比试管1深而比试管2浅。
因为三只试管里面的3-磷酸甘油醛含量不同。
利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用,使3-磷激甘油醛不再向前变化而积累.硫酸肼作为稳定剂,用来保护3-磷酸甘油醛使不自发分解.然后用2,4-二硝基苯肼与3-磷酸甘油醛在碱怀条件下形成2,4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物,其棕色程度与3-磷酸甘油醛含量成正比。
糖酵解过程是从葡萄糖开始分解生成丙酮酸的过程,全过程共有10步酶催化反应:
1.葡萄糖磷酸化
糖酵解第一步反应是由己糖激酶催化葡萄糖的C6被磷酸化,形成6-磷酸葡萄糖。该激酶需要Mg2+离子作为辅助因子,同时消耗一分子ATP,该反应是不可逆反应。
2.6-磷酸葡萄糖异构转化为6-磷酸果糖
这是一个醛糖-酮糖同分异构化反应,此反应由磷酸己糖异构酶催化醛糖和酮糖的异构转变,需要Mg2+离子参与,该反应可逆。
3.6-磷酸果糖磷酸化生成1,6-二磷酸果糖
此反应是由磷酸果糖激酶催化6-磷酸果糖磷酸化生成1,6-二磷酸果糖,消耗了第二个ATP分子。
4.1,6-二磷酸果糖裂解
在醛缩酶的作用下,使己糖磷酸1,6-二磷酸果糖C3和C4之间的键断裂,生成一分子3-磷酸甘油醛和一分子磷酸二羟丙酮。
5.3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮的相互转换
3-磷酸甘油醛是酵解下一步反应的底物,所以磷酸二羟丙酮需要在丙糖磷酸异构酶的催化下转化为3-磷酸甘油醛,才能进一步酵解。
6.3-磷酸甘油醛的氧化
3-磷酸甘油醛在NAD+和H3P04存在下,由3-磷酸甘油醛脱氢酶催化生成1,3-二磷酸甘油酸,这一步是酵解中惟一的氧化反应。
7.1,3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸
在磷酸甘油酸激酶的作用下,将1,3-二磷酸甘油酸高能磷酰基转给ADP形成ATP和3-磷酸甘油酸。
8.甘油酸-3-磷酸转变为甘油酸-2-磷酸
在磷酸甘油酸变位酶催化下,甘油酸-3-磷酸分子中C3的磷酸基团转移到C2上,形成甘油酸-2-磷酸,需要Mg2+离子参与。
9.甘油酸-2-磷酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸
在烯醇化酶催化下,甘油酸-2-磷酸脱水,分子内部能量重新分布而生成磷酸烯醇式丙酮酸烯醇磷酸键,这是糖酵解途径中第二种高能磷酸化合物。
10.丙酮酸的生成
在丙酮酸激酶催化下,磷酸烯醇式丙酮酸分子高能磷酸基团转移给ADP生成ATP,是糖酵解途径第二次底物水平磷酸化反应,需要Mg2+和K+参与,反应不可逆。
扩展资料:
糖酵解的反应特点:
1、糖酵解反应的全过程没有氧的参与。
2、糖酵解反应中释放能量较少。糖以酵解方式进行代谢,只能发生不完全的氧化。
3、糖酵解反应的全过程中有3个限速酶。在糖酵解反应的全过程中。有三步是不可逆反应。这三步反应分别由己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶3个限速酶催化。
参考资料来源: 百度百科-糖酵解
三氯醋酸(TCA) 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐,这样可以尽量保证细胞中蛋白质等有效成分的流失,才会更有利于对细胞的研究。
选用新鲜肝脏:因为肝脏是生成酮体的主要器官。
15%三氯醋酸的主要作用应该是蛋白变性剂,沉淀蛋白。
扩展资料:
1、由醋酸氯化后分离以氯乙酸母液作原料,硫磺粉为催化剂,在90-100℃条件下继续氯化,然后再结晶,即得。
2、三氯乙醛法 由三氯乙醛与发烟硝酸共熔氧化而得,反应温度80~100℃。用硝酸或高锰酸钾氧化三氯乙醛、在碘或三氯化磷催化和光照下直接氯化乙酸可制得三氯乙酸。
3、以一氯乙酸母液用硫粉为催化剂进一步深度氯化,经结晶而得。
参考资料来源:百度百科-三氯醋酸
在Feulgen反应中设置对照组,用热的三氯乙酸处理固定后的样品,将样品中的DNA抽提去,因此能作为Feulgen反应的阴性对照.
具体的请参详《组织化学与免疫组织化学》邱曙东
肌糖原的实验中向空白管加入20%三氯乙酸。20%三氯乙酸的作用是使肌肉糜失活。
三氯醋酸一般指三氯乙酸。三氯乙酸,又名三氯醋酸,是一种有机化合物,化学式为C?HCl?O?,有刺激性气味,易潮解,溶于水、乙醇、乙醚。