Folin酚测定蛋白质含量制定的标准曲线为什么不过原点
这是曲线制作过程：取12支试管，分别加入0, 0.2 , 0.4, 0.6, 0.8, 1.0毫升标准酪蛋白溶液（500微克/毫升）用水补足到1.0毫升，以上每种浓度各做一份重复，即平行做两份，按顺序向各管加入3毫升Folin—酚试剂甲，混匀，室温下放置10分钟，再依次向各管加入0.3毫升Folin—酚试剂乙，立即摇匀，在30℃保温（或室温下放置）30分钟，然后于500nm处比色。看两个平行管的光密度值是否接近，取其平均值，以光密度（0.D）为纵坐标，以酪蛋白溶液浓度为横坐标，绘制酪蛋白的标准曲线。
你看它的纵坐标为光密度，你的溶液里酪蛋白加入为0的时候，还是加入了Folin—酚试剂甲乙，所以溶液中存在溶质，就会存在一定的光密度，所以说标准曲线肯定就不过原点啦~
给你补充一下~
<科技编辑大辞典》对光密度的定义是：入射光强度与透射光强度之比值的常用对数值。专业书籍则这样解释“吸光度”：入射光和透射光的透过率之比值的常用对数值，也称光密度。分析可见，两个概念其实是一致的，“光密度”就是“吸光度”
而吸光度是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数，影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关。
这样你应该能理解为什么光密度不为零了吧~既然光密度不为零，那么这个曲线是不过原点的
【这是我个人的见解，你可以参考一下~】
原理，蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸，在碱性条件下，可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色(生成钼蓝和钨蓝化合物)。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比，可用比色法测定。
我国现行标准GB/T5009，5-2003《食品中蛋白质的测定》中的两种方法"凯氏定氮法"和杜马斯(Dumas)燃烧法是先将样品硝化后测出含氮量，然后根据氮元素与蛋白质换算系数计算蛋白质的含量，如果添加含氮量高的物质，如三聚氰胺，就可以测出较高的"蛋白质含量"。
4种直接测定蛋白质的方法：考马斯亮兰法、双缩脲法、Folin-酚试剂法和紫外吸收光谱法，可以避免上述由于添加违规化学物质造成测定蛋白质含量虚高的结果。
药检所里应该有这个依据。
看看血舒通注射液的标准里好像有这项。
试剂 碱性铜溶液 取氢氧化钠10g，碳酸钠50g，加水400ml使溶解，作为甲液；取酒石酸钾0.5g，加水50ml使溶解，另取硫酸铜0.25g，加水30ml使溶解，将两液混合，作为乙液。
临用前，甲液与乙液合并，并加水至500ml。
操作法 (1) 对照品溶液的制备 取牛血清白蛋白对照品，加水制成每1ml中含0.3mg的溶液。
(2) 供试品溶液的制备 照各药品项下的方法制备。
(3) 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml，分别置具塞试管中，各加水至1.0ml，再分别加入碱性铜溶液1.0ml，摇匀，各加入福林酚溶液(福林试液中的贮备液1→16)4.0ml，立即混匀，置55℃水浴中准确反应5分钟，置冷水中10分钟，在650nm的波长处测定吸收度；同时以0管作为空白。以测得的吸收度与对应的浓度计算回归方程。
(4) 测定法 精密量取供试品溶液1.0ml，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入碱性铜溶液”起，依法测定，从回归方程求得供试品溶液的浓度，并乘以稀释倍数，即为多肽含量。
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或者是：胸腺肽溶液国家药品标准附录二——福林酚测定法[10]
操作方法：1、标准曲线的制作：分别吸取0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml标准溶液于小试管中，分别加进不同量的蒸馏水，补足到1ml。各加入5ml试剂甲，混匀后于室温下(25℃左右)放置10min。再加入0.5ml试剂乙，立即混匀，于室温下反应30min。于500nm波长下测定光密度。以吸光值作为纵坐标，蛋白质含量为横坐标绘制标准曲线。
2、样品蛋白质含量的测定
取1ml样品溶液，加入5ml试剂甲，混匀，于25℃左右放置10min。再加入0.5ml试剂乙，立即摇匀，于25℃左右反应30min，测定吸光值，从标准曲线查出样品蛋白质含量。
生物帮上面有的，免疫组化染色试剂盒
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