Tris-HCl缓冲液的配制方法?
Tris-HCl缓冲液的配制方法:
使50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml即可配置成功。
三羟甲基氨基甲烷(Tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般简称为Tris)是一种有机化合物,其分子式为(HOCH2)3CNH2。
Tris为弱碱,在室温(25℃下,它的pKa为8.1;根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。
Tris碱的水溶液pH在10.5左右,一般加入盐酸以调节pH值至所需值,即可获得该pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。
扩展资料:由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸,则获得“TAE缓冲液”(Tris/Acetate/EDTA),而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”(Tris/Borate/EDTA)。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。
用途:有机合成中间体。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的PH值。在凝胶中也起到稳定PH的作用,只不过是Tris-HCl缓冲体系。
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。
参考资料:Tris-HCl-百度百科
Tris-HCl Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,25℃)
50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml
pH x/ml pH x/ml
7.10 45.7 8.10 26.2
7.20 44.7 8.20 22.9
7.30 43.4 8.30 19.9
7.40 42.0 8.40 17.2
7.50 40.3 8.50 14.7
7.60 38.5 8.60 12.4
7.70 36.6 8.70 10.3
7.80 34.5 8.80 8.5
7.90 32.0 8.90 7.0
8.00 29.2 9.00 5.7
注:三羟甲基氨基甲烷(Tris)
【性能参数】
分子式:C4H12ClNO3
分子量:157.60
CAS号:1185-53-1
性质:该品为白色结晶体。
用途:有机合成中间体。
三羟甲基氨基甲烷试剂,三羟甲基氨基甲烷(Tris)是一种应用非常广泛的有机试剂,它的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。它及其衍生物被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备,可用于制作药物、有机合成、生物缓冲剂等。
其中在生化实验中,许多蛋白质及核酸相关的实验都需要用Tris作为生物缓冲剂。它甚至有超过磷酸盐缓冲液的趋势,因为它有好的缓冲能力、毒性低、对生物反应的干扰极低,而且纯度很高。有超过磷酸盐的趋势,如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中都已开始实验TRIS缓冲液,很少再用磷酸盐。
TRIS(三羟甲基氨基甲烷)的应用
① 在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定P值;
② 在凝胶中使用TRIS-HCL缓冲体系稳定PH值;
③ 被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂;
④ TRIS缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成;
⑤ 在TRIS盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,可用于DNA的稳定和储存;
⑥ 将调节PH值的酸溶液换成乙酸,获得“TAE缓冲液”,换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种溶液常用于核酸电泳实中。
通用CAS :77-86-1
熔点:167-172℃ 沸点:219-220º℃(10mmHg或1.3kPa) 溶水性:550G/L(25ºC)
使用用途: 生物制药,体外诊断,个人护理及化妆品原料等
保存温度: 常温密封避光保存
性质描述:白色结晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯、不溶于乙醚、四氯化碳,对铜、铝有腐蚀作用,有刺激性。
Tris-HCl
熔点:167-172℃
沸点:219-220℃ (10 mmHg)
闪点:100℃
水溶性:550 g/L (25℃)
外观:白色结晶 水溶性:无色,澄清
Tris常用作生物缓冲液,常配成pH值为6.8,7.4,8.0,8.8。其pH值随温度变化很大。一般来说,温度每升高一度,PH值下降0.03。
1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是SDS-PAGE最常用的试剂。
而由Tris配成的TAE,TBE等是DNA电泳最常用的试剂,TE(pH8.0)主要用于溶解DNA。(TE为 Tris加EDTA合称。)
用途:Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。 作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,最好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
Tris可以由两步反应生成:先由硝基甲烷生成中间体三羟甲基硝基甲烷((HOCH2)3CNO2),然后再由该中间体还原得到Tris。
(来自百度百科)
生物缓冲试剂。
Tris缓冲液作为一种生物缓冲试剂,一直在生物化学研究中发挥着很大的作用。Tris生物缓冲液的用途非常广泛。
它可在凝胶中采用Tris HCl缓冲体系以更好的稳定pH值;也能与甘氨酸构成缓冲体系在电泳缓冲液里稳定PH值;而且能作为核酸和蛋白质的溶剂。
用途
Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C.elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。
Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。
以上内容参考:百度百科-三羟甲基氨基甲烷