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三氯乙酸沉淀蛋白质可逆吗

丰富的导师
喜悦的蓝天
2022-12-22 05:17:58

三氯乙酸沉淀蛋白质可逆吗

最佳答案
害怕的鸭子
幸福的月饼
2026-01-30 02:34:38

三氯乙酸沉淀蛋白质不可逆。

在酸性条件下,与蛋白质形成不溶性盐而沉淀下来;与蛋白质分子内部的疏水基团作用,使之暴露出来,造成蛋白质变性,从而相互凝聚沉淀下来。

随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显。

三氯乙酸沉淀蛋白原理:

① 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐。

② 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。

③ 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显。

最新回答
自由的洋葱
自觉的火龙果
2026-01-30 02:34:38

硫酸锌和三氯乙酸沉淀蛋白质的原理不一样。

1、硫酸锌沉淀蛋白质原理是:加入硫酸锌沉淀蛋白质是因为蛋白质与重金属盐发生化学反应生成不溶于水的物质。

2、三氯乙酸沉淀蛋白质的原理是:在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐;作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀。

玩命的招牌
着急的眼睛
2026-01-30 02:34:38
正常沉淀蛋白用的是15%三氯乙酸溶液,样品与15%三氯乙酸溶液体积比、沉淀温度、沉淀时间、离心时间都会影响蛋白质含量的测定,最佳的试验参数是样品与15%三氯乙酸溶液的体积比1:3,沉淀温度35℃,沉淀时间10 min,离心时间30 min。

痴情的航空
善良的狗
2026-01-30 02:34:38
变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响,改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏,都是变性的结果。能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、尿素、乙醇、丙酮等;能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。三氯乙酸是强酸,铅离子是重金属,这2者均可以使蛋白质变性沉淀。