三氯乙酸沉淀蛋白质可逆吗
三氯乙酸沉淀蛋白质不可逆。
在酸性条件下,与蛋白质形成不溶性盐而沉淀下来;与蛋白质分子内部的疏水基团作用,使之暴露出来,造成蛋白质变性,从而相互凝聚沉淀下来。
随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显。
三氯乙酸沉淀蛋白原理:
① 在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐。
② 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。
③ 随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显。
硫酸锌和三氯乙酸沉淀蛋白质的原理不一样。
1、硫酸锌沉淀蛋白质原理是:加入硫酸锌沉淀蛋白质是因为蛋白质与重金属盐发生化学反应生成不溶于水的物质。
2、三氯乙酸沉淀蛋白质的原理是:在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐;作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀。