甲苯胺蓝的简介

甲苯胺蓝染色液染色方法

甲苯胺蓝 是常用的人工合成染料的一种属于醌亚胺染料类，是碱性染料， 甲苯胺蓝 中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。不推荐用于软骨、胃粘膜等难染组织的染色。

肥大细胞的染色:

（1）组织脱蜡至水。

（2）蒸馏水浸洗2-3次。

（3） 甲苯胺蓝染液 染20-30min。

（4）稍水洗，洗去多余染色液。

（5）95%酒精分色，在镜下控制分色效果。

（6) 用100%酒精脱水。

（7） 二甲苯 透明， 中性树胶 封片。

肥大细胞染色结果：肥大细胞颗粒呈红紫色，胞核呈蓝色。

细胞涂片染色 ：

（1）细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。

（2）滴加1～2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。

（3）后将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。

（4）无需干燥，直接镜检。

细胞涂片染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。

原位杂交染色 ：

（1）用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:10。

（2） 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。

（3） 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。

（4） 按需求进行压片固定。

神经元细胞的染色：

（1）将载有细胞的玻片取出放入4％多聚甲醛中固定1h左右；

（2）到时间后取出用PBS冲洗1～2次即可；

（3）然后加入提前预热的1％甲苯胺蓝溶液，在50度左右的气浴或水浴中染色20～30min；

（4）用梯度酒精已次脱水，分别为75％、90％、100％，也可自定梯度；

（5）在镜下控制分色效果，这一步不太好掌握；

神经元细胞染色结果：可见尼氏小体深蓝色颗粒，细胞核呈淡蓝色，背景基本无色。

北京索莱宝科技有限公司 自产产品 1%甲苯胺蓝染色液 ，货号为 G1220 ，主要用于生化实验中肥大细胞的检测。

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甲苯胺蓝染色，软骨呈鲜艳的紫色（紫红色），其他为浅蓝色，能够清楚地显示软骨形态潮线等结构，观察软骨组织是否有损伤。

甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种属于醌亚胺染料类，是碱性染料，甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色，可染细胞核使之呈蓝色。

注意事项

1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。样品数量很多时，可使用染色架和染色缸，以便于操作。

2、本产品为1%浓度水溶液，具体使用浓度可自行稀释。

3、由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响，若快速染色，当室温较低时，可以适当加温。

以上内容参考：百度百科-甲苯胺蓝

结构图 CAS: 3209-30-1 分子式: C28H20N2O10S2·2Na 中文名称: 甲苯胺蓝 2,2'-[(9,10-二氢-4,8-二羟基-9,10-二氧代-1,5-蒽二基)二亚氨基]双(5-甲基苯磺酸)二钠盐 英文名称: Toluidine blue Benzenesulfonic acid, 2,2'-[(9,10-dihydro-4,8-dihydroxy-9,10-dioxo-1,5-anthracenediyl) diimino]bis(5-methyl-, disodium salt Dimethyl toluth ionine, chloride 甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测，例如色素性荨麻疹 染色方法: (一)1.甲苯胺蓝液 甲苯胺蓝0.5g 蒸馏水定容至100ml 2.冰醋酸液 冰醋酸0.5ml蒸馏水定容至100ml 染色步骤 1.组织切片常规脱蜡至水 2.入甲苯胺蓝液30min 3.稍水洗 4.入冰醋酸液分化，直到胞核和颗粒清晰。 5.稍水洗，用冷风吹干 6.二甲苯透明，中性树胶封固 (二) ①切片脱腊至水。 ②蒸馏水浸洗3次。 ③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。 ④水洗，洗去多余染液。 ⑤各级酒精脱水。 ⑥二甲苯透明，中性树胶封固。 结果：在胃粘膜腺上皮表面，腺腔内均可见到幽并肩战斗让螺杆菌（HP），有的呈弯曲杆状或逗点状，HP可散在出现，也可成团聚集出现，这要根据不同病例而异。 试剂的配制：称取0.1g甲苯胺蓝，溶于100ml 0.1M醋酸盐缓冲液中，置室温5天后，即可使用染液于室温下可保存3个月，若放于4℃冰箱则可保存半年左右，但该液的染色效果在早期为最佳，若染液存放时间较长，则染色偏淡，应适应延长染色时间。 TOLUIDINE BLUE, 甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为硷性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测，例如色素性寻麻疹亚甲基蓝 基本信息英文名Methylene Blue别名3,7-Bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium chloride产品名称亚甲基蓝分子结构分子式C16H18ClN3S分子量319.85CAS 登录号122965-43-9 亚甲基蓝在好氧细菌检测方面的知识:好氧细菌经过进行有氧呼吸产生大量的二氧化碳,使环境(添加亚甲基蓝的培养液)变弱酸性,亚甲基蓝由氧化态的蓝色变成还原态的无色,所以可以检测好氧细菌的存在.同时也是一种PH指示剂。

罗丹明是一种激光染料，生物染色。可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，呈黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位，也常用于细胞凋亡检测。可应用于铜离子探针，铁离子探针，汞离子探针

甲苯胺蓝可用于甲苯胺蓝纠正试验，甲苯胺蓝纠正试验是使用甲苯胺蓝纠正已经延长的凝血酶时间，以检测血液中是否含有肝素及类肝素物质的一个试验。

实验准备

（一）材料

人的口腔上皮细胞永久装片。

（二）用具

消毒牙签（一头钝、一头尖的），载玻片，盖玻片，吸管，滴瓶，滤纸。

（三）仪器

显微镜。

（四）药品

质量分数为0．9%的氯化钠溶液，染液（体积分数为2%～3%的蓝墨水或红墨水，体积分数为1%的伊红溶液，体积分数为2%的紫药水，质量分数为1%～5%的高锰酸钾溶液，体积分数为0．4%的碘酒溶液）。

方法步骤

（一）操作过程

用绸布擦净载玻片，滴一滴生理盐水于载玻片中央。用消毒牙签的钝端，在漱净的口腔任意一侧的颊部，轻轻刮几下，把牙签上附有口腔壁碎屑的一端，放在载玻片上的氯化钠溶液中涂几下，盖上盖玻片。在盖玻片的一侧加染液1～2滴（任一染液均可），用滤纸从盖玻片的另一侧吸引染液，使染液浸润到标本的全部。用低倍镜可观察到边缘不规则的扁平细胞，这就是人的口腔上皮细胞。在观察中能看到染色较深的细胞膜和细胞核，以及染色较浅的细胞质。

（二）应注意的问题

1．取材前，口腔一定要用凉开水漱净，去除口腔内的食物残渣。

2．用方签在口腔壁上轻轻刮动，不要刮在牙缝里，因为牙齿上刮下来的是食物碎屑，不是口腔上皮细胞。

3.盖盖玻片时，用镊子夹起盖玻片，让盖玻片的一侧先接触水滴，然后缓缓盖下，以防产生气泡。

（三）成功的关键

1．选择适宜的取材部位

人的口腔顶壁前部为硬腭，后部为软腭，两侧壁为颊部。口腔各壁都有黏膜覆盖。

本实验取材部位，以口腔两侧颊部为好。因为在这一部位能取到较多的口腔上皮细胞，而在口腔顶壁取得的上皮细胞数较少。 牙签要平贴在口腔内壁轻轻地刮，避免牙签尖损伤口腔内壁。

2．选取适宜的染液浓度

只有选取了合适的染液浓度，才能将口腔上皮细胞的细胞质、细胞核和细胞膜较明显地显示出来。

共2张

人口腔上皮细胞

细胞结构

主要由细胞核与细胞质构成，表面有细胞膜。一般彼此相联成膜片状，被覆在机体体表。由内、中、外三个胚层分化形成。但主要来自外胚层和内胚层。

结构

①细胞间紧密结合，细胞外有一层细胞衣细胞衣就是组成细胞膜的糖蛋白外露的糖链，具有较强的粘着作用，细胞间隙中的钙离子，和细胞间特殊的细胞间连接对细胞的粘合也有重要作用。 　②明显的极性，细胞的两端在结构上和功能上有差别，一端表面朝向体表或体内管、腔、囊的腔面，叫游离面；与游离而相对的另一端，叫基底面。分布在不同部位的上皮组织的细胞游离面，常有不同的特化结构与其特定的功能相适应。如肠上皮有密集的微绒毛扩大了吸收面；呼吸道上皮有能摆动的纤毛，可以排出侵入的灰尘等异物。基底面一般借一层基膜与其深层的结缔组织相连。有些上皮细胞的基底面，还具有扩大细胞基底表面积的胞膜内褶或加强与基膜连接的结构。 　③一般没有血管，其营养由深层结缔组织中的毛细血管透过基膜供应。基膜在血液与上皮组织的物质交换中起着有选择性的分子筛作用。 　④上皮组织内神经末梢的分布较丰富，因此感觉较灵敏。例如，皮肤的表皮和支气管上皮就如此。

你好，阴虱很容易被患者忽略，而得不到正规的治疗，给患者带去诸多不便。其实诊断阴虱的方式有很多，所以，在遇到阴虱的时候，千万不要慌张，及早到到医院进行相关诊治非常关键。

正确检查阴虱的几种方法：

1、醋酸白试验：醋酸自试验是将3%～5%醋酸液涂抹或敷贴在可疑的损害上，外阴和阴茎损害在3～5分钟后变白，宫颈损害在1分钟内变白，而肛周损害可能需要15分钟，应用放大镜或阴道镜可更清楚显示醋酸白损害。典型的醋酸白损害呈圆形增厚区，边界清楚，色泽雪白、有光泽，边缘稍隆起。

2、甲苯胺蓝试验：可作为阴虱的辅助诊断，有资料介绍用此法诊断阴虱与病理诊断的符合率达95%。具体方法为：首先用纱布蘸蒸馏水清洁局部，待干燥后用棉签蘸1%甲苯胺蓝染液均匀涂在皮损及其周围的皮肤上，等到甲苯胺蓝染液干燥后，再涂1%醋酸脱色剂清擦。未清擦掉而留有蓝色者即为阳性。

3、阴道镜检查：阴道镜检查可通过观察阴道内点状血管襻来判断潜在的人类乳头瘤病毒感染。单独应用阴道镜或联用醋酸白试验有助于确定男女生殖器HPV亚临床感染及其范围。

4、细胞学检查：宫颈涂片做细胞学检查可发现凹空细胞是HPV感染的诊断依据。

5、组织病理检查：组织病理可见棘层上方及颗粒细胞层出现空泡化细胞，也称凹空细胞。

6、免疫组化检查：免疫组化可见表皮有凹空细胞，核内有棕褐色颗粒状沉着，阳性率为40%～60%。

预防阴虱病的方法

(1)搞好个人卫生，勤洗澡，勤换衣。

(2)出差旅行时，不用公用浴巾，不穿他人内裤，不与他人共用卧具。

(3)首先要避免不洁性交。因为本病的主要传播途径是由于不洁性交引起的。

(4)患病后夫妻二人同时治疗检查，要同时检查有否其他性传播性疾病的存在，以便同时治疗。

(5)如发现阴虱病人除及时治疗外，还应追踪传染来源，特别是对其性伴侣，应予以检查治疗。

(6)患病以后治疗时剃除的阴毛，并用火烧掉。用热水肥皂洗涤，勤洗澡。内衣裤、床单、被子全部用开水煮沸消毒或用熨斗熨烫。这也属于阴虱的预防方法。