用本磷酸二钠比色测土壤磷酸酶时 用的是什么酚绘制标准曲线?
土壤的磷酸酶测定主要是靠测定培养后溶液中的游离的酚来确定的,因此,标准曲线要求酚的精度较高。
一般来讲,我们都选择苯酚作为酚的标准物质,由于一般的苯酚是分析纯,纯度并不高,所以需要购买重蒸苯酚作为标准曲线贮备物质。
先买重蒸苯酚,然后配置成1g/L的贮备液,在冰箱里可以长期保存。临用时在依据标线稀释。一般多稀释成为10mg/L。
纯净的酚使用时不需要重蒸。市售的酚一般为红色或黄色结晶体,使用之前必须重蒸, 除去能引起DNA和RNA断裂和聚合的杂质。将苯酚置于65℃水浴中溶解,重新进行蒸馏,当温度升至183℃时,开始收集在若干个棕色瓶中,纯酚和重蒸酚都应贮存在-20℃。使用前取一瓶重蒸酚于分液漏斗中,加入等体积的lmol/LTris--HCl(pH8.0)缓冲液,立即加盖,激烈振荡,并加入固体Tris摇匀调pH(一般looml苯酚约加l克固体Tris)分层后测上层水相pH至7.6-8.0。从分液漏斗中放出下层酚相于棕色瓶中,并加一定体积0.lmol/LTris-HCl pH8.0)覆盖在酚相上,置4C冰箱贮存备用。酚是一种强腐蚀剂,能引起腐蚀性损伤,操作时应戴上眼镜和手套。如果皮肤上溅上了酚,应用大量水冲洗或用肥皂水冲洗。酚在空气极易氧化变红,要随时加盖,也可加入抗氧化剂0.1% 8一羟基喹啉及0.2%β-巯基乙醇。
又名石炭酸,酚苯酚石炭酸羟基苯phenolHydroxybenzene(性状与稳定性)。无色针状结晶或白色结晶,有特殊气味,遇空气和光变红,遇碱变色更快。分子式C6-H6-O。分子量94.11。相对密度1.071。熔点40.85℃(超纯,含杂质熔点提高)。沸点181.9℃。闪点79.44℃(闭杯),85℃(开杯)。自燃点715℃。蒸气密度3.24。蒸气压0.13kPa(40.1℃)
用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体
用80度左右的温水将其熔化,因为它的熔点应该是在四十多度。然后倒入圆底烧瓶中,置油浴或电热套中(查看其沸点,然后设置加热温度),加热使升华,上接冷凝管(可用空气冷凝,因为自来水温度太低会导致冷凝管堵塞,或者用自来水,但水流要很小才行)。
苯酚是一种具有特殊气味的无色针状晶体,有毒,是生产某些树脂、杀菌剂、防腐剂以及药物(如阿司匹林)的重要原料。也可用于消毒外科器械和排泄物的处理,皮肤杀菌、止痒及中耳炎。熔点43℃,常温下微溶于水,易溶于有机溶剂;当温度高于65℃时,能跟水以任意比例互溶。苯酚有腐蚀性,接触后会使局部蛋白质变性,其溶液沾到皮肤上可用酒精洗涤。小部分苯酚暴露在空气中被氧气氧化为醌而呈粉红色。
楼下不带你这样误导人的,自己不了解请不要乱讲好吗?
提问的同学要是不相信可以看这篇文章,百度文库的,我随便找了一篇,你可以对照一下实验方法一栏:http://wenku.baidu.com/view/de8e9c4ce45c3b3567ec8be2.html
实际上我认为小木虫这篇帖子也不错:http://emuch.net/html/200910/1634352.html
用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体
定义:
又名石炭酸,酚苯酚石炭酸羟基苯phenolHydroxybenzene(性状与稳定性)。无色针状结晶或白色结晶,有特殊气味,遇空气和光变红,遇碱变色更快。
用途:
生化研究,显微染色等。用作消毒、杀虫剂药品作为分析试剂,化工生产中间体;暴露在空气中和遇光易变红色(在碱性条件下更易促进这种变化)。
记得采纳啊
分析纯已经几乎没有杂质了..如果楼主硬是要提纯的话
一般仪器也是
实现不了的...
蒸馏就是先按投料比投料咯
再最后记得先加入沸石就是了!
希望对你有帮助
谢谢
苯酚溶液的制法:称取5g的苯酚,加入95ml蒸馏水,溶解。
反应液:分别取1ml的标准液,加入1ml的苯酚溶液,迅速加入5ml的浓硫酸,震荡摇匀。在沸水浴中加热15min后冷却到室温,在490nm波长下测定其吸光值。
我这两天刚做出来的,但是我的浓度是用的20ug/mg、40、60、80、100、120,其他的细节都是一样的。我只是按照我做的给你说的,你也可以灵活变通,比如沸水浴的时间,波长的选择都是按照自己的实验具体确定的,但是还是有些细节不能忽视的,比如苯酚要求用182℃蒸馏后得到的馏分,如果试验经费允许可以直接买重蒸酚,普通苯酚和重蒸酚价格相差有点大。具体我们可以讨论,我也是试验很多方法自己总结出来的,用苯酚测定糖是个技术活,而且冒着有毒的危险。