三氯乙酸的作用及原理
三氯乙酸与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:
①在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.
②作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀.
③随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显; 在电泳时使用TCA对蛋白质样品的浓缩或除盐时,对于分子质量大的蛋白质,要慎重选择TCA.对小分子量蛋白质的浓缩,采用TCA时也有两点需要注意:一是用TCA沉淀后,尽量用丙酮彻底抽提TCA二是样品处理后要尽快进行电泳分析,以免发生聚集及断裂,造成结果分析的不准确。
1.三氯乙酸:蛋白酶抑制剂,使酶失活。
碘乙酸:抑制剂,抑制3-磷酸甘油醛脱氢酶。
硫酸肼:稳定剂,防止3-磷酸甘油醛自然分解。
2.三氯乙酸的作用:主要用于有机合成和制备医药、也可用作化学试剂、杀虫剂。
碘乙酸的作用:用作分析试剂,染料制备,有机合成与酶的抑制剂。
硫酸肼的作用:用作分析试剂,如作沉淀剂、还原剂。还用于有机合成。
1、三氯乙酸,有机化合物,又名三氯醋酸 ,无色结晶,有刺激性气味,易潮解 ,溶于水、乙醇、乙醚 。主要用于有机合成和制医药、杀虫剂。2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,三氯乙酸在2B类致癌物清单中。
2、由醋酸氯化后分离以氯乙酸母液作原料,硫磺粉为催化剂,在90-100℃条件下继续氯化,然后再结晶,即得。
3、三氯乙醛法 由三氯乙醛与发烟硝酸共熔氧化而得,反应温度80~100℃。用硝酸或高锰酸钾氧化三氯乙醛、在碘或三氯化磷催化和光照下直接氯化乙酸可制得三氯乙酸。
4、以一氯乙酸母液用硫粉为催化剂进一步深度氯化,经结晶而得。
5、以四氯乙烯为原料,于120℃在紫外线照射下通氧氧化或以四氯乙烯为原料,钛为催化剂,在40~120℃进行水解,均可得到三氯乙酸。
在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐. 这样可以尽量保证细胞中蛋白质等有效成分的流失。 才会更有利于我们对细胞的研究。
三氯乙酸,有机化合物,又名三氯醋酸 ,无色结晶,有刺激性气味,易潮解 ,溶于水、乙醇、乙醚 。主要用于有机合成和制医药、化学试剂、杀虫剂。
由三氯乙醛与发烟硝酸共熔氧化而得,反应温度80~100℃。用硝酸或高锰酸钾氧化三氯乙醛、在碘或三氯化磷催化和光照下直接氯化乙酸可制得三氯乙酸。
扩展资料:
TCA与蛋白质在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐。作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团,使之聚集沉淀。
随着蛋白质分子量的增大,其结构复杂性与致密性越大,TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去,在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片,而且随时间的延长这一作用愈加明显。
在电泳时使用TCA对蛋白质样品的浓缩或除盐时,对于分子质量大的蛋白质,要慎重选择TCA.对小分子量蛋白质的浓缩,采用TCA时也有两点需要注意:一是用TCA沉淀后,尽量用丙酮彻底抽提TCA二是样品处理后要尽快进行电泳分析,以免发生聚集及断裂,造成结果分析的不准确。
参考资料来源:百度百科——三氯乙酸
在Feulgen反应中设置对照组,用热的三氯乙酸处理固定后的样品,将样品中的DNA抽提去,因此能作为Feulgen反应的阴性对照。
具体的请参详《组织化学与免疫组织化学》邱曙东
化学式 CCl 3 COOH ,分子量 163.39 ,无色晶体,有刺激气味,易潮解,熔点 163.40 ℃,易溶于水或乙醇等有机溶剂,一种很强的有机酸,化学性质活泼,用于有机合成,并可用作蛋白质沉淀剂,它的钠盐,铵盐是除草剂。
三氯乙酸,用途很广,农药医药化工领域均有大量应用,可做三氯乙酸甲酯,乙酯,三氯乙酰氯,三氯乙酰胺等.
2.测定硒、甲氧基、乙氧基的分析试剂以及某些物质的溶剂。
3.还原剂(单独使用或与红磷一道使用),还原烯基硅醚,从α-三甲硅基环氧化合物合成α-三甲硅基酮。分裂醚。使多环酮或酚环化成多环芳烃。
4.用于合成碘化物、杀菌剂及用作药物原料。