苯酚和重氮化盐阴离子反应可以用什么当溶剂?
下午好,重氮化反应可以考虑一些对质子迁移有催化作用显示极性的溶剂比如1,4-二氧六环和吡啶,也可以试试看THF和THP(四氢吡喃)。DMF和NMP也不错但是有可能对酚基产生一定空间位阻类似吡啶碱性较强不确定是否合适,希望以上建议对你有所帮助。我个人首选是1,4-二氧六环。
我从楼上说一下具体过程。
这里可以首先在酸性条件下使用二氢吡喃做羟基的保护基。
然后使用一些氧化剂把甲基氧化成羧基,注意需要从非酸性的条件下进行反应。
苯环甲基很容易变成羧基
之后用酸化加热条件,一个去保护,一个是把羧酸根离子变成羧酸,这样就反应完成了。
常见的羟基保护基有二氢吡喃或者丙酮。
常见的羰基保护基一般是乙二醇。
1.柴胡根含挥发油0.15%,内有:戊酸(pentanoic acid),已酸(hexanoic acid),庚酸(heptanoic acid),2-庚烯酸(2-heptenoic acid),辛酸(octanoic acid),2-辛烯酸(2-octenoic acid),壬酸(nonanoic acid),2-壬酸(nonanoic acid),苯酚(phenol),邻-甲氧基苯酚(o-methoxyphenol),γ-辛内酯(γ-octalactone),γ-癸内酯(γ-decalactone),丁香油酚(eugenol),γ-十一烷酸内酯(γ-undecalactone),甲苯酚(cresol),已基苯酚(ethyphenol),百里香酚(thymol),玛索依内酯(messoia lactone),已酸香苯醛酯(vanillin acetate)[1],还有:2-甲基环戊硐(2-methylcyclopentanone),柠檬烯(limonene),月桂烯(myrcene),右旋香荆芥酮(carvacrone),反式香苇醇(carveol),胡薄荷酮(pulegone),桃金娘醇(myrtenol),α-松油醇(α-terpineol),芳樟醇(linalool),牻牛儿醇(geraniol),正十三烷(n-tridecane),(E)-牻牛儿基丙酮[(E)-geranyl acetone],α-荜澄匣油烯(α-cubebene),ξ-荜澄匣烯(ξ-cadinene),葎草烯(humulene),反式丁香烯(caryophyllene),长叶烯(longifolene),努特卡扁柏酮(nootkatone),十六酸(hexadecanoic acid),六氢金合欢基内酮(hexahydrofarnesyl acetone)[2]。又含柴胡皂甙(saikosaponin)a、c、d、S1[3],柴胡皂甙S1就是3-O-α-L-吡喃阿拉柏糖基(1→3)β-D-吡喃葡萄糖醛酸齐墩果酸-28-β-D-吡喃葡萄糖酯[3-O-α-L-arabinopyranosyl(1→3)-β-D-glucuronopyranosyl oleanolic acid-28-β-D-glucopyranosylester][4];还含侧金盏花醇(adonitol)[5,6],α-菠菜甾醇(α-spinasterol)[6],另含多糖,命名为柴-Ⅲ-5311,系酸性多糖,相对分子质量约80 000,由半乳糖(galactose),葡萄糖(glu-cose),阿拉伯糖(arabinose),木糖(xylose),核糖(ribose),鼠李糖(rhamnose)及一未知成分组成,其中葡萄糖和核糖的含量较少[7]。茎叶含酮类成分:山柰酚(kaempferol),山柰酚-7-鼠李糖甙(kaempferol-7rhamnoside),山柰甙(kaempferitrin),山柰酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖甙-7-O-α-L-吡喃鼠李糖甙(kaempferol-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖甙-7-O-Αl-吡喃鼠李糖甙(daempferol-3-O-α-L-arabinopyranoside-7-O-α-L-rhamnopyranoside)[8,9]。2.狭叶柴胡 根含挥发油,内有:β-松油烯(β-terpinene),柠檬烯,樟烯(camphene),β-小茴香烯(β-fenchene),胡薄荷酮,异龙脑(isoborneol),β-松油醇(β-terpineol),芳樟醇,α-(王古)(王巴)烯(α-co-paene),葎草烯,α-金合欢烯(α-farnesene),香橙烯(aromaden-drene),顺式的和反式的丁香烯,β-榄香烯(β-elemene),γ-及兰油烯(γ-muurolene),广蕾香烷(patchoulane),努特卡市民柏酮,喇叭茶醇(ledol)[2]。又含柴胡总甙0.15%,其中柴胡皂甙a0.05%,柴胡皂甙d微量,柴胡皂甙c0.10%[10,11]。地上部分含黄酮类化合性:山柰酚,山柰酚-7-鼠李糖甙[8],槲皮互(quercetin),异槲皮素(isoquercetin),异鼠李素(isorham-netin),芸香甙(rutin),水仙甙(narcissin)[12]。3.竹时素材胡 根含挥发油,内有:2-甲基环戊酮,柠檬烯,桃金娘醇,反式香苇醇,α-松油醇,正十一烷(n-undecane),5-甲基-5-已基癸烷(5-methyl-5-ethyldecane),(E)-牻牛儿基丙酮,α-荜澄茄油烯,ξ-毕澄茄烯,α-(王古)(王巴)烯,葎草烯,反式的β-金合欢烯(β-farnesene),顺式丁香烯,β-榄香烯,4,8-二甲基十三烷(4,8-dimethyltridecane),十四酸(tetradecanoic acid),十六酸,六氢金合欢基丙酮[2]。又含柴胡皂甙a、c、d3、e及6-O-已酰基柴胡皂甙(6-O-acetylsaikosaponin)a,前柴胡皂甙元(prosaidogenin)F,大叶柴胡皂甙(chikusaikoside)Ⅱ,柴胡皂甙(saikosaponin)d,3-O-β-D-吡喃岩藻糖基柴胡皂甙元(3-O-β-D-fucopyranosylsaikongin)F即去葡萄糖基柴胡皂甙(desglucosaikosaponin)a,6-O-已酰基柴胡皂甙(6-O-acetylsaikosaponin)b3,11α-甲氧基柴胡皂甙(11α-methoxaikosaponin)f[3,13]4.线叶柴胡 根含挥发油,内有:β-蒎烯,柠檬烯,β-侧柏烯(β-thujene),α-,β-及γ-松油醇,月桂烯,右旋葛缕酮(carvone),桃金娘醇,橙花醛(neral),正十一烷,龙脑烯(bornylene),正十三烷正十四烷(n-tetradecane),α-雪松烯(α-himachalene),α-(王古)(王巴)烯,葎草烯,反式金合欢烯(farnesene)β-榄香烯[2];根含柴胡皂甙a、d[10];种子中分得:α-檀萜烯(α-santene)罗勒烯(ocimene),α-松油烯,香豆精(cormarin),龙脑(borneol),已酸牻牛儿酯(geranyl acetate),已酸香茅醇酯(cytronelly acetate)[14]。5.银州柴胡 根含柴皂甙a、b2,2-O-已醇基柴胡皂甙(2-O-acetyl saikosaponin)b2。3-O-已酰基柴胡皂甙(3-O-acetyl-saikosaponin)b2[3];还含侧金盏花醇,芸香甙,异鼠李素-3-芸香糖甙(isorhamnetin-3-O-rutnoside),α-菠菜甾醇,α-蒎菜甾醇葡萄糖甙(α-spinasteryl-β-D-glucoside)[15]。6.锥叶柴胡 根含柴胡总甙10.85%,其中柴胡皂甙a0.25%,柴胡皂甙c0.6%,柴胡皂甙d0.54%[11];根、茎、花果产中含芸香甙,槲皮素,异槲皮素,异鼠李素,水仙甙[16]。7.小叶黑柴胡根含挥发油,内有:2-甲基环戊酮,奥(azu-lene),α-及β-蒎烯,α-及β-侧柏烯,柠檬烯,龙脑烯,α小茴香烯(α-fenchene),月挂烯,3-蒈烯(3-carene),2,6-二甲基辛烷(2,6-dimethyloctane),胡薄荷酮,桃金娘醇,4-松油醇(4-ter-pinen-4-ol),牻牛儿醇,正十一烷,正十三烷,α-荜澄茄油烯,γ-及ξ-荜澄茄烯,α-(王古)(王巴)烯,葎草烯,α-金合欢烯,β-甜没药烯,β-及γ榄香烯,十四酸[2];又含柴胡皂甙a0.35%,未检出柴胡皂甙c及d[11]。8.窄竹叶柴胡 根含挥发油,内有:2-甲基环戊酮,β-蒎烯(β-pinene),柠檬烯,3,3,5-三甲基庚烷(3,3,5-trimethyl-heptane),反式行苇醇,桃金娘醇,α-松油醇,蓄谋樟醇,正十一烷,α-荜澄茄油烯,葎草烯,香橙烯,广藿香烷,γ-广藿香烯(γ-patchoulene),β-甜没药烯(β-bisabolene),努特卡扁柏酮,草薄二烯(acoradiene)[2]。又含柴胡皂甙a、c、d、b3、b4[15,16],3-O-已酰基柴胡皂甙(3-O-acetylsaikosaponin)a,6-O-已酰基柴胡皂甙(6-O-acetylsaidosaponin)a,3-O-已酰基柴胡皂甙(3-O-acetylsaikosaponin)d,6-O--已酰基柴胡皂甙(6-O-acetylsaikosaponin)d,大叶柴胡皂甙Ⅰ及Ⅱ,11α-甲氧基柴胡皂甙f[3,13]。9.兴安柴胡 含柴胡总甙1.678%,其中柴胡皂甙a0.16%,柴胡皂甙d0.36%[10];还含6,7,3,8-双藁本内酯(Z,Z-6-7-3a,6-diligustilide)[17,18],顺式二羟基藁本内酯(cis-6,7-di-hydroxyligustilide),娠烯醇酮(pregnenolone)[17]。10.柴首 根含挥发油,内有:2-甲基环戊酮,3-庚酮(3-heptanone),柠檬烯,3-荜烯,2-戊基呋喃(2-pentylfuran),香荆芥酚(carvacrol),右旋葛缕酮,马鞭草烯酮(verbenone),小茴香酮,反式香苇醇,胡薄荷酮,橙花醛,正十一烷,对异丙基苯甲酸(p-isopropylbenzoic acid),5-甲基-5-已基癸烷,3-甲基十二烷(3-methyldodecane),正十四烷,α-荜澄茄油烯,γ-荜澄茄烯,β-古芸烯(β-gurfunene),α-(王古)(王巴)烯,香橙烯,顺式丁香烯,α-愈创木烯(α-guaiene),α-及β-榄香烯,γ衣兰油烯,正十五烷(n-pentadecane),努特卡扁柏酮,喇叭茶醇,金合欢基丙酮(farnesylacetone)[2];又含柴胡总甙1.83%,其中柴胡皂甙a0.30%,柴胡皂甙c0.82%,柴胡皂甙d0.71%[11]。11.长白柴胡 根含柴胡皂甙a、b1、b2、c、d[19,20]。空心柴胡根含挥发油,内:环已酮(cycolhexanone),辛醛(octanal),薁,β-蒎烯,α-及γ-松油醇,柠檬烯,月桂烯,3-荜烯,百里香酚,香荆芥酚,胡薄荷酮,异松樟酮(isopinocamphone),龙脑,异胡薄荷醇(isopulegol),薄荷酮(menthone),1,8-桉叶素(1,8-cineole),芳樟醇,橙花醇(nerol),正十一烷,α-荜澄茄油烯,γ-荜澄茄烯,α-金合欢烯,顺式和反式的丁香烯,β-芹子烯(β-selinene),β-柏木烯(β-cedrene),γ-广藿香烯(γ-patchoulene),正十五烷[2];又含柴胡总甙1.03%,其中柴胡皂甙a0.48%,柴胡皂甙c0.11%,柴胡皂甙0.44%[11]。12.小柴胡 根含挥发油,内有:戊酸,2,6-二甲基辛烷,胡薄荷酮,α-松油醇,薄荷酮,芦藜醇(veratryl alcohol),菖蒲二烯,广藿香烷,柏木烯醇(cedrennol),α-桉叶醇(α-eudesmol),十六酸[2];又含柴胡总甙0.05%,其中柴胡皂甙a0.05%,柴胡皂甙c及d均微量[11]。13.汶川柴胡 根含挥发油,内:2-甲基环戊酮,正庚醛(n-heptanal),4-甲基-3-庚酮(4-methyl-3-heptanone),樟烯,3-荜烯,2-戊基呋喃,胡薄荷酮,2-甲基癸烷(5-methyldecane),正十一烷,对异丙基苯甲酸,正十三烷,7-甲基十三烷(7-methyltridecane),正十四烷,α-荜澄茄油烯,ξ-毕澄茄烯,β-古芸烯,α-(王古)(王巴)烯,葎草烯,α-金合欢烯,β-柏木烯,4,8-二甲基十三烷,2-甲基十六烷(2-methylhexadecane),六氢金合欢基丙酮,以及橙花叔醇(nerolidol)的同分异彩构体[2];又含14个皂甙成分:柴胡皂甙a、b2、d,2-O-及-已酰基柴胡皂甙a,2-O-β-D-吡喃木糖基柴胡皂甙(2O-β-D-glucopyranosyl saikosaponin)b2,6-O-已酰基柴胡皂甙(6-O-acetylsaikosaponin)b2,3,6-O,O-二已酰基柴胡皂甙(3,6-O,O-diacetylsaikosaponin)b2,2-O-已酰基柴胡皂甙(2-O-acetylsaikasaponin)d,3-O-已酰基柴胡皂甙d,6-O-已酰柴胡皂甙d,16-表大叶柴胡皂甙(16-epichiku-saikoside),前柴胡皂甙元(prosaikogenin)G[21]。14、马尔康柴胡 根含挥发油,内有:2-甲基环戊酮,3-甲基-3-异丙基苯-5-已基癸烷,β-古芸烯,α-(王古)(王巴)烯,β-甜没药烯,4,8-二甲基十三烷[2]。
1.孢子萌发测定法
其原理是在载玻片或平板上,通过滴加或喷施等方法将药液施于其上,然后滴加一定浓度的孢子悬浮液,经过一定时间培育后,在显微镜下观察孢子的萌发率。毒力越大的药剂,孢子萌发抑制率也越大。
2.抑菌圈法
先将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与培养基混匀,待混合物冷却后,放入吸有不同浓度药液的纸片,经过一定时间培育后,观察以纸片为圆心的抑菌圈的大小。有的试验用圆环中加药液来代替吸药的纸片。毒力越大的药剂,抑菌圈也越大。
3.生长速率测定法
原理是趁热在培养基中加入药液,混合均匀后冷却,然后在无菌条件下将病原菌接入装有培养基的培养皿中央,经过一定时间培育后,观察病原菌菌丝的生长情况。毒力越大的药剂,菌丝的生长越缓慢。
4.对峙培养法
多用在天然源农药的筛选中。方法是将天然提取物及病原菌同时放在同一有培养基的培养皿的两边,经过一定时间培育后,观察菌丝生长的情况。如果提取物有抑菌作用,则病原菌的生长会受到一定的限制。
对峙培养法
5.高通量筛选方法
(1)活体筛选方法:
①以各种病原物为筛选靶标的直接筛选方法:首先将一定浓度样品用移液器移至微量滴定板上,再用另一移液器将均匀的供试菌菌丝体或孢子悬浮液接种到每一孔上,混匀后用分光光度计测定混合液的初始光密度值I,然后置适宜条件下振荡培养一定时间,再测定光密度值Ⅱ,且将光密度值Ⅱ与光密度值I比较,即可评价药剂是否有活性。如果二者相等或光密度值Ⅱ降低,说明菌体不能生长,判定被测物有活性,否则无活性。
②以酿酒酵母菌为模型菌的筛选方法:在控制条件下,将酿酒酵母菌与待测化合物相互作用,一定时间后,观察化合物对酵母菌生长的抑制情况。通过有效中浓度EC50判断化合物是否有活性。研究表明,虽然不是所有的有潜力的杀菌剂都能抑制酿酒酵母菌的生长,但酿酒酵母菌仍不愧为一个实用的筛选杀菌剂的模型菌。
(2)离体筛选方法:
①靶标酶的测定方法:例如,测定NADH(还原辅酶I)的变化,可筛选线粒体呼吸作用中电子传递链上复合体I和复合体Ⅲ的抑制剂。将菌体悬浮液与牛心线粒体及待测化合物分别加入微量滴定板孔中,混匀,控制条件下反应一定时间后,在340nm下测定光密度值,计算NADH的含量,如果NADH含量降低,说明待测物抑制了电子传递过程,化合物有活性。
②全细胞测试:用于筛选真菌甾醇生物合成抑制剂可用此方法。
甾醇途径的最终产物是麦角甾醇。该物质对乙酰乙酰辅酶A硫解酶(acetoactyl-coathiolase)的启动基因有反馈控制作用,即它的存在能抑制启动基因的表达。而如果Acetoactyl-CoaThiolase启动后,经过一系列生理反应,会产生p-半乳糖苷(β-gal)酶。β-gal酶可与氯苯酚作用,产生红色的氯苯酚红-β-吡喃半乳糖苷,没有β-Gal酶时的氯苯酚是橘黄色的。因此,基于以上原理,试验的前期工作是构建报告基因(reportergene),将乙酰乙酰辅酶A硫解酶的启动基因融合到酿酒酵母全细胞中编码p-半乳糖苷(β-gal)酶的基因上,使该启动子也具有能活化β-gal基因的能力。然后将待测化合物与经上述基因修饰的酿酒酵母全细胞及氯苯酚等在微量滴定板上混匀,在控制条件下反应一定时间,最后通过分光光度计检测。如果甾醇生物合成途径受阻,就没有甾醇结合到上述报告基因的受体结合蛋白上,β-gal基因被启动,产生β-gal酶,显示化合物有活性。如果化合物无活性,甾醇合成正常,β-gal基因不会被启动,就不能产生β-gal酶,只能显现橘黄色。