宁夏钜晶电子材料科技有限公司招聘信息,宁夏钜晶电子材料科技有限公司怎么样?
钉钉企典 数据来源:以下信息来自企业征信机构,更多详细企业风险数据,公司官网,公司简介,可在上面进行查询,更多公司招聘信息详询公司官网。
• 公司简介:
宁夏钜晶电子材料科技有限公司成立于2016-12-29,注册资本null,法定代表人是李飞,公司地址是银川经济技术开发区西区战略新兴材料加工区1号厂房,统一社会信用代码与税号是91641100MA75Y7Q98E,行业是其他非金属矿物制品制造,登记机关是银川高新技术产业开发区工商行政管理局,经营业务范围是高纯氧化铝粉体、高纯氮化物粉体及产品、氮氧化铝粉体及产品、多晶蓝宝石生瓷片、多晶蓝宝石薄板及印刷线路板、LTCC生瓷带、LTCC微波及射频元件、电子浆料、铝基碳化硅及铝硅基板及线路板的生产及销售;多晶蓝宝石生产技术转让;陶瓷线路板、陶瓷封装器件及相关产品的研发、技术咨询服务、技术成果转让;五金、有色金属、化学品(不含危险化学品)、电子元器件、机械设备设计、组装及销售(依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动),宁夏钜晶电子材料科技有限公司工商注册号是641100200077019
• 分支机构:
• 对外投资:
• 股东:
• 高管人员:
应聘文员的个人求职者要用真实准确的个人求职简历向招聘单位及招聘者展示其经历、 经验 、技能、成果,下面是我整理的应聘文员 个人简历 范文 ,以供大家参考。
应聘文员个人简历范文(一)基本资料
姓 名: 沈女士
性 别: 女
民 族: 汉族
出生日期: 19xx年x月x日
学 历: 中专
毕业 院校: 德清县职业高级中学
所学专业: 餐饮旅游服务与管理
工作年限: 8年
联系方式: 12345678
求职意向
工作类型: 全部
单位性质: 不限
期望行业: 媒体、影视制作、新闻出版、艺术、 文化 传播、旅游、酒店、餐饮服务、政府、公共事业、贸易、进出口
期望职位: 前台/总机、人力资源/行政/文职人员
工作地点: 杭州市
期望月薪: 不限/面议
教育 经历
19xx年x月--19xx年x月北代舍完全小学
19xx年x月--19xx年x月德清钟管中学
19xx年x月--19xx年x月德清职业高级中学
培训经历
20xx年x月--20xx年x月浙江武康劳动局 AuToCAD
工作经验
19xx年x月--20xx年x月工作于德清升华集团升华大酒店总服务台,主要负责每天的客房登记.客房部的帐务管理和每天对客人的业务受理。(家里的问题才不得已辞职)
20xx年x月--20xx年x月工作于德清升华集团绿康食品有限公司财务部,主要负责出纳的工作。(工资实在少的可怜才 离职 的)
20xx年x月--20xx年x月工作于升华集团三峰实业华源颜料有限公司财务部(本公司是全国500强企业),主要负责统计和成本核算管理的工作,以及各分厂员工工资计算和绩效考核。
工作业绩
在单位这几年里,虽没有太特别的职务和贡献,但在统计这岗位上除了做好本职工作之外还主动担了各分厂厂长经理和各车间主任的秘书的工作,帮他们整理一下文件,档案管理及日常事务.空闲时还帮着网管维护一下公司的网络系统.像我们办公室的一些大小事务都是我在管理
自我评价
性格开朗大方,形象气质好,对工作认真有冲劲,具有很强的责任感,一直一来和同事都相处的很好, 能相互探讨和帮助
应聘文员个人简历范文(二)基本信息
xxx(女,23岁,大专学历,1年工作经验)
婚姻状况: 未婚
民族: 汉
参加工作时间: 20xx-03
身高: 162cm
联系电话:12345678
求职意向
期望工作性质: 全职
期望工作地点: 不限
期望从事行业: 办公设备/用品、环保、房地产开发/建筑与工程、 广告 /会展/公关、通信
期望从事职业: 行政专员/助理、前台接待、经理助理/秘书/文员 到岗时间: 1周以内
教育经历
毕业学校: xx广播电视大学
时间: 20xx-09至 20xx-07
专业: 旅游管理
学历: 大专
专业核心课程与主要实践环节:旅游学概论、旅游经济学、旅游 市场营销 学、旅游资源学、旅游法规、旅行社经营管理、导游业务、导游基础知识、旅行社导游实习、毕业论文等,以及各校的主要特色课程和实践环节
工作经验
公司名称: xx设备有限公司
职位名称: 办公室文员
工作时间: 20xx-09至20xx-05
工作描述:
1. 接听、转接电话接待来访人员。
2. 负责办公室的文秘、信息、机要和__,办公室档案收集整理工作。
3. 负责公司公文、信件、邮件、报刊杂志的分送。
4. 负责办公室仓库的保管工作,做好物品出入库的登记。
5. 按照公司印信管理规定,保管使用公章,并对其负责。
6. 管理员工人事档案材料。
7.统计每月考勤并交财务做帐,留底。
8. 管理办公各种财产,合理使用并提高财产的使用效率,提倡节俭。
9. 接受公司其他临时工作。
公司名称: xx食品有限公司
职位名称: 前台文员
工作时间: 20xx-03至20xx-08
工作描述:
1、前台接待,日常事务的管理工作
2、考勤工作的监督,考勤机的管理工作
3、培训牌、工作牌的制作、发放以及保管
4、 请假条 的发放和统计,文件的打印
自我评价
本人性格开朗,乐于接受新事物,吃苦耐劳,善于与人沟通,能独立完成工作。在往日的工作中也使自己的判断力、组织能力有所提高。成功的企业必须要一直有效益并且有效率的团队,我深深明白要想成为这样团队中的一员,必须对工作负责、对团队负责,干预挑战任务,敢于承担责任。我期待着伯乐的出现,使自己可以投身优秀如您的团队,绽放青春的光彩!
应聘文员个人简历范文(三)基本情况.
姓 名:曾小姐
证 件: 出生年月:19xx年x月x日
性 别:女 婚姻状况:未婚
户 籍:广东 佛山市区 现所在地:广东 佛山市区
身 高:158CM 体 重:0Kg
民 族:汉族 工作经验:2年x月
求职意向
意向岗位: 文员
工作性质:全职
发展方向:
要求地区:佛山市区
月薪要求:20xx-2500
食宿要求:
语言能力
英语(熟练)
普通话(良好)
技能专长
职称:
计算机级别:初级
计算机能力:
兴趣/ 爱好 :
其它 能力:熟悉各种办公自动化等操作软件
系统掌握文秘专业的基础理论和专业技能
具有文秘实际操作能力、较好的职业判断能力
有较强的调查研究、综合分析、解决实际问题的能力
工作经历
【顺德*********公司】
职位名称:广告助理
公司行业:陶瓷·建材
公司性质:民营企业
公司规模:1000人以上
公司描述:佛山市顺德区乐华陶瓷洁具有限公司是生产“***箭牌”高品质卫浴、瓷砖及配套产品的大型现代化综合性科技企业,主要生产ARROW箭牌陶瓷卫生洁具、压克力浴缸、冲浪缸、淋浴房、蒸汽房、实木浴室柜、PVC浴室柜、全铜质镀铬龙头、不锈钢盆及五金挂件等卫生间全配套产品,以及瓷质饰釉砖、抛光砖、釉面砖、瓷片、外墙砖、广场砖等系列产品。
工作描述:主要负责广告报销,
【东莞*********公司】
职位名称:质检
公司行业:电子·微电子
公司性质:外资企业
公司规模:1000人以上
公司描述:东莞爱铭数码电子有限公司,是韩国爱铭株式会社在东莞市投资设立的外商独资企业,
工作描述:担任质检,主要负责产品的质量检测,产品是否完好,合格等职位。
【湖南*********公司】
职位名称:收银员
公司行业:旅游·酒店·餐饮
公司性质:私营企业
公司规模:500-999人
公司描述:是一家专业生产销售面包、西点、生日 蛋糕 等 烘焙 产品,兼营水吧、中西式快餐产品的综合性食品生产、销售、服务企业。
工作描述:主要担任收银员,主要负责收银及领班,一些日常事务的管理。
自我评价
性格开朗,诚实正直,谦和自信,乐于进取、乐于奉献。善于处于人际关系勤奋好学,积极上进,有较强的社会适应能力工作踏实,认真细致,具有强烈的事业心和工作责任心,具有极佳的团队合作精神。
应聘文员的个人求职信范文尊敬的贵公司领导:
您好!
缘于对贵公司的向往和发展自我、成就自我的渴望,作为一名即将走向社会的大学生,我由衷地期盼自己的事业之帆能从这里顺利启航。下面,我就自己的实际情况向您作简单的个人 自我介绍 :
思想是切行动的指南。专业课的学习不仅使我更坚定了社会主义方向,而且使我更深刻地认识到敏锐地把握时代政治气息对一个公司企业的发展至关重要。尤其是在建立现代企业制度过程中,人们几乎达成共识:强大的思想动力是企业无形资产的组成部分之一。我愿意用自己的专业所学和公司同仁一起致力于企业思想建设,增强公司凝聚力、战斗力。
管理是现代企业的重要内容。在进入以人为核心的管理阶段,研究“企业如何做人的工作”不可缺少。尽管做人的工作很复杂,可其中也有成就感。除了掌握有关思想教育专业的大量知识外,我还自修了不少 企业管理 之类的课程,经常翻阅此方面的杂志,很有兴趣在此方面实践一下,把理论用于实际生活中。
法律是保障权益的有效武器。商战中,企业难免会陷入经济纠纷,为了排除阻碍公司发展的不利因素,有必要诉诸于法律来维护合法的权益。虽说是搞思想教育的,但我还用心学习了大量的法律法规,如有机会,希望能成为贵公司的一名法律服务工作者,为公司分忧解难尽力。
人无完人,故在积极改正缺点的同时,我一直把“活到老,学到老”作为自己的座右铭,不知贵公司可否给我一个继续学习的机会?
随信附个人简历表,感谢您的关注,至于我是否是千里马,需您伯乐来裁定,渴望着您手中的幸运神箭会射向我!
此致
敬礼!
XXX
XXXX年XX月XX日
看过“应聘文员个人简历范文”的人还看了:
1. 应聘文员简历的自我评价
2. 文员求职简历范文
3. 文员个人简历范文
4. 文员求职简历范文
5. 办公室个人简历范文
代理品牌:马可波罗瓷砖
联系电话:查看联系电话
官网权威信息(来自官网)
推荐指数:
关注指数:101人关注
管理情况:暂无人员管理>>信息纠错>>
网点类型:商铺店面销售
联系地址:陕西省 咸阳市 三原县 丹尼尔后街马可波罗瓷砖专卖店
马可波罗瓷砖咸阳三原县专卖店自开业以来始终坚持“互赢互利,携手共进”的经营理念,不断拓宽经营产品领域,加强与知名企业合作,店内规模日渐增大、实力不断增强,且逐步建立了系统完整的产品销售链。未来,我们将继续奉行“垂直整合,同步并行,协调发展,系统优化”的经营宗旨,为客户提供更加优质便捷的产品与服务。形成更加稳定的消费群体,赢得更多客户的认可与支持。
瓷砖/地板砖产品推荐
1东鹏瓷砖 全抛釉客厅砖600x1200 简约现代卧室地板砖
¥169评论:1000+
东鹏品牌旗舰店
2蒙娜丽莎瓷砖厨卫灰色瓷片300600不透水大理石纹内墙砖 SDJ2573
¥28评论:25+
蒙娜丽莎瓷砖品牌旗舰店2店
3宏宇陶瓷全抛釉瓷砖现代简约大理石墙砖客厅磁砖卧室地板砖800x800广东灰色防滑地砖HPG80159 HPG80159
¥85评论:200+
宏宇陶瓷品牌旗舰店
4金意陶瓷砖 仿古马赛克150x150 客餐厅厨卫阳台墙地砖 K0154003
¥3评论:9+
金意陶家装建材品牌旗舰店
5新中源 新款瓷砖客厅全抛釉地砖防滑耐磨欧式灰色地面砖3DMC8973
¥89.9评论:100+
新中源旗舰店
6鹰牌陶瓷 厨卫地砖防滑釉面砖 仿古小墙砖TD0D9-T02E
¥6.6评论:100+
鹰牌陶瓷品牌旗舰店
瓷砖和地砖与瓷砖的差异在于,瓷片用在墙上、瓷砖和地砖用在地面上。下面从进行分析:
瓷片指的是墙面用的表面有次面的薄层贴片,而瓷砖则是指有瓷面的地砖。两者最明显的差异就是厚薄程度不一。
瓷片越光滑越好,而瓷砖要求表面有一定的防滑性。最佳的瓷片内部不存在一星半点气泡,否则很容易受冻碎裂,而瓷砖对内部是否存在气泡要求不高。
瓷片应当属于通体陶瓷,但不属于砖,而属于片;瓷砖是瓷,是由瓷土烧制而成的。
地砖是用来铺地面的砖,地砖分为3类:釉面砖、瓷质砖、拼花砖。
扩展资料:
瓷质地砖
就是吸水率在0.5%以下的瓷砖。
材质:粘土、石英、长石烧制而成。
生产工艺:生产工序一般为选料、配料、粉碎、沉浆、喷雾干燥、压坯成型、干燥、烧结、检验及包装等步骤。
计算公式:需要数量=总面积/瓷砖的长度/瓷砖的宽度
瓷片保养除污
瓷片日常清洗可选用洗洁精,肥皂等清洗:用肥皂加少量氨水与松节油的混合液,清洗磁砖可使磁砖更有光泽。
在生活中如果不小心把茶水或者其它日常生活用品附着在磁砖上面,应及时擦洗干净,必要时应用相应清洁用品清洗;抛光砖应定期对其打蜡处理,时间间隔为2~3个月为宜。
当砖面如出现划痕,可在划痕处涂抹牙膏,用干布擦拭可修复。砖与砖缝隙处可不定期用去污膏去污垢,再在缝隙刷一层防水剂可防霉菌生长。
瓷片常用的除污方法:茶水、咖啡、啤酒、冰淇淋、油脂等污染物用氢氧化钠或碳酸氢钾溶液;墨水、水泥等污染物用盐酸、硝酸等稀溶液;油漆、涂料等污染物请使用专用清洁剂。
参考资料:百度百科--瓷片
参考资料:百度百科--地砖
古瓷片价值昂贵,成为很多收藏爱好者的新宠,那么你知道瓷片有哪些收藏的价值吗?下面为您精心推荐了瓷片收藏图片,希望对您有所帮助。
瓷片收藏图片
瓷片收藏价值
古瓷片有传世完整器所不具备的优势:凡历史上生产过的瓷器,都会因最终破碎而产生瓷片,而传世完整瓷器因为改朝换代、兵荒马乱,有些器皿已不存世。如景德镇前些年在施工中,掘出了大量的官窑瓷片。因当时是集中掩埋,今日拼出器型后,发现无论是造型、纹饰还是发色,仍发现很多迄今为止,世人所从未见过的东西,甚至,有的制瓷技艺早已失传。如以往一直认为孔雀绿釉制品以明宣德朝为早,近年景德镇陶瓷考古研究所在元代遗址中发现了基本可复原的元代孔雀绿地青花研盒等古残片,证实了印度尼西亚苏拉威西中部出土的孔雀绿釉玉壶春瓶是元代制品的推断确实可信。而2005年北京西城区毛家湾1号发掘出全国最大瓷器坑,瓷器残片近百万片。瓷片显示当时有些器皿采用不施釉手法,此种技术目前已失传。
故此,古瓷片有作为历史“标本”的意义。初学者拾捡不同年代、窑口、图案纹饰等的古瓷片,通过观察、对比,再结合《中国陶瓷》等理论书籍,学习瓷器鉴定长进就会很快。一些资深瓷器藏家,多年来也是“瓷片不离手”。北京藏家白明,收集的古瓷片不仅量多且来自全国不同的窑口,还建起了“睦明堂瓷片标本博物馆”。其中有些珍稀的瓷片,当初得来的价格,皆高于一般完整器。笔者所在的浙江湖州,个人或群体古瓷片展览也不时举办。如,今年2月20日,湖州8位藏家联合展出了他们收藏的500余件精美古瓷片,既有“瓷之源”的德清窑原始青瓷,也有唐代长沙窑,五代越窑,宋代的定窑、汝窑、官窑等“五大名窑”以及明代的青花等。一枚枚“文明的碎片”,带有先民使用的“文化体温”,闪耀着作为原始瓷发祥地之一的湖州及国内各地民窑先民的智慧和创造,也以独特的载体传播着中国的瓷器文明。5月10日,“积微居”收藏明清青花古瓷片也在湖州衣裳街古城区展出。
古瓷片收藏在近年来的一个“命运转机”,不仅是收藏群体扩大而带来的标本之需,更在于它因为精致小巧,蕴含货真价实的文化价值,从而被制成时尚的“工艺品”。
最早是在2010年以前,笔者就曾在江苏扬州文物商店内,看到了诸多晚清浅绛或民国新粉彩的人物瓷片,被机器切割、打磨出更完满的“画片”,通过包银制成种种挂件或饰品,既可佩在胸前,又可挂钥匙串。如此,这种古瓷片饰品,很好地诠释了“传统与现代”完美而经典的结合。而其时的售价,也只在数百元之内。
事实上,以古瓷片做饰品,很多年前就在日本风行。佩戴它,不但风雅、时尚,而且也很有“文化”。日本人对中国古代文化包括陶瓷很推崇,宋五大名窑的单色釉瓷片,本身很珍贵,“输入”日本的就更少。他们以金银包裹镶嵌,在市场上可以卖到很高的价格。而在更早的清代、民国,以钧窑、汝窑瓷片嵌入黄花梨或酸枝木内之挂屏,也时有所见。玩家马未都称其第一件上档次的藏品,就是一组钧窑瓷片挂屏。
近一两年,笔者在长三角很多城市的古玩店、文物商店,开始更多地发现此类古瓷片“工艺品”的显现。一些高古瓷如宋五大名窑或龙泉窑等,瓷片按原来“出土”的模样见售明清有文字、图案的青花粉彩或单色釉的瓶底碗底盘底,被打磨后售卖一些人物、山水、花鸟的瓷片,尽可能地“撷取”完整图案而制成挂件、饰品硕大的残件被镶框做成更大的上墙悬挂“工艺品”……古瓷片获得了“新的生机”。来来去去的购置顾客,不仅有收藏爱好者,也有时尚的年轻男女。
在保证具文物级价值的古瓷片发现后,能上交国家的前提下,古瓷片制成“工艺品”的潜力很大。相对于一般的创意产品、现代文化产品,具有资源不可再生、积淀深厚历史文化信息特性的古瓷片“工艺品”,还有待更深入广泛的开掘。可以毫不夸张地说,随着国民文化修养的进一步提高,对民族传统文化的弘扬更加深入,此类古瓷片“工艺品”必将在市场上“更红”,更时尚、风雅、体面。而散落街巷、乡野的古瓷片,必会有更多人在业余时间去搜罗、找寻。古瓷片的春天,会因此而更灿烂,散发出浓郁、盎然而深远的文化馨香。
瓷片收藏的现状所谓“瓷片”,就是瓷器破碎后产生的瓷器残片。产生瓷片的原因很多,中国制瓷历史悠久,历代瓷窑在烧制瓷器的过程中,都会产生出大量的残次品,这些残次品的命运就是被打碎埋入地下。特别是古代官窑瓷器,生产时都有专门的官员监督制作,不论成品多少,只要选出官家所定数量,其余瓷器都要全部打碎深埋。另外,我们的先人由于陪葬及日常生活中的损坏等原因,也都给我们留下了许多瓷片。瓷片虽然残缺,但它的制作、绘画艺术等一如完整瓷器,代表着一个时期的瓷器工艺水平,因而也有着比较高的收藏价值。而且,瓷片往往还是瓷器收藏者学习鉴定的依据,有许多民间的瓷器收藏家都是从玩瓷片开始的。
藏界收藏瓷片者历来不乏其人,但一直没有形成“规模”。改革开放后,我国建筑施工高潮迭起,很多深埋地下的瓷片被从地里挖出,被一些有心人发现,于是出现了“瓷片一族”,瓷片收藏遂成为古瓷收藏的一个热点。从上世纪90年代中后期开始,我国各地逐步出现了古瓷片交易场所,而其中尤以北京、南京、郑州等一些古城为胜。北京的报国寺、潘家园也是瓷片交易的重要场所。不少大中城市还开设了专门鉴赏、研究瓷片的沙龙。北京甚至还有专门收藏和展览古瓷片的睦明唐瓷片标本博物馆。当今,江河之畔、工地上下,乃至遗址周围,处处可见“瓷片族”们忙碌的身影。
电容的基本单位是:F (法),此外还有μF(微法)、pF(皮法),另外还有一个用的比较少的单位,那就是:nF(),由于电容 F 的容量非常大,所以我们看到的一般都是μF、nF、pF的单位,而不是F的单位。
它们之间的具体换算如下:
1F=1000000μF
1μF=1000nF=1000000pF
电
容器,通常简称其容纳电荷的本领为电容,用字母C表示。定义1:电容器,顾名思义,是‘装电的容器’,是一种容纳电荷的器件。英文名
称:capacitor。电容器是电子设备中大量使用的电子元件之一,广泛应用于电路中的隔直通交,耦合,旁路,滤波,调谐回路,
能量转换,控制等方面。定义2:电容器,任何两个彼此绝缘且相隔很近的导体(包括导线)间都构成一个电容器。
电容与电容器不同。电容为基本物理量,符号C,单位为F(法拉)。
通用公式C=Q/U平行板电容器专用公式:板间电场强度E=U/d ,电容器电容决定式 C=εS/4πkd
随着电子信息技术的日新月异,数码电子产品的更新换代速度越来越快,以平板电视(LCD和PDP)、笔记本电脑、数码相机等产品为主的消费类电子产品产销量持续增长,带动了电容器产业增长。
1 基本概念
基因芯片(gene chip)也叫DNA芯片、DNA微阵列(DNA microarray)、寡核苷酸阵列(oligonucleotide array),是指采用原位合成(in situ synthesis)或显微打印手段,将数以万计的DNA探针固化于支持物表面上,产生二维DNA探针阵列,然后与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号来实现对生物样品快速、并行、高效地检测或医学诊断,由于常用硅芯片作为固相支持物,且在制备过程运用了计算机芯片的制备技术,所以称之为基因芯片技术。
2 技术基本过程
2.1 DNA方阵的构建
选择硅片、玻璃片、瓷片或聚丙烯膜、尼龙膜等支持物,并作相应处理,然后采用光导化学合成和照相平板印刷技术可在硅片等表面合成寡核苷酸探针(2)或者通过液相化学合成寡核苷酸链探针,或PCR技术扩增基因序列,再纯化、定量分析,由阵列复制器(arraying and replicating device ARD),或阵列机(arrayer)及电脑控制的机器人,准确、快速地将不同探针样品定量点样于带正电荷的尼龙膜或硅片等相应位置上,再由紫外线交联固定后即得到DNA微阵列或芯片(3)。
2.2 样品DNA或mRNA的准备。
从血液或活组织中获取的DNA/mRNA样品在标记成为探针以前必须进行扩增提高阅读灵敏度。Mosaic Technologies公司发展了一种固相PCR系统,好于传统PCR技术,他们在靶DNA上设计一对双向引物,将其排列在丙烯酰胺薄膜上,这种方法无交叉污染且省去液相处理的繁锁;Lynx Therapeutics公司提出另一个革新的方法,即大规模平行固相克隆(massively parallel solid-phase cloning)这个方法可以对一个样品中数以万计的DNA片段同时进行克隆,且不必分离和单独处理每个克隆,使样品扩增更为有效快速(4)。
在PCR扩增过程中,必须同时进行样品标记,标记方法有荧光标记法、生物素标记法、同位素标记法等。
2.3 分子杂交
样品DNA与探针DNA互补杂交要根据探针的类型和长度以及芯片的应用来选择、优化杂交条件。如用于基因表达监测,杂交的严格性较低、低温、时间长、盐浓度高;若用于突变检测,则杂交条件相反(5)。芯片分子杂交的特点是探针固化,样品荧光标记,一次可以对大量生物样品进行检测分析,杂交过程只要30min。美国Nangon公司采用控制电场的方式,使分子杂交速度缩到1min,甚至几秒钟(6)。德国癌症研究院的Jorg Hoheisel等认为以肽核酸(PNA)为探针效果更好。
2.4 杂交图谱的检测和分析
用激光激发芯片上的样品发射荧光,严格配对的杂交分子,其热力学稳定性较高,荧光强;不完全杂交的双键分子热力学稳定性低,荧光信号弱(不到前者的1/35~1/5)(2),不杂交的无荧光。不同位点信号被激光共焦显微镜,或落射荧光显微镜等检测到,由计算机软件处理分析,得到有关基因图谱。目前,如质谱法、化学发光法、光导纤维法等更灵敏`、快速,有取代荧光法的趋势。
3 应用
3.1 测序
基因芯片利用固定探针与样品进行分子杂交产生的杂交图谱而排列出待测样品的序列,这种测定方法快速而具有十分诱人的前景。Mark chee等用含135000个寡核苷酸探针的阵列测定了全长为16.6kb的人线粒体基因组序列,准确率达99%(7)。Hacia等用含有48000个寡核苷酸的高密度微阵列分析了黑猩猩和人BRCA1基因序列差异,结果发现在外显子11约3.4kb长度范围内的核酸序列同源性在98.2%到83.5%之间,提示了二者在进化上的高度相似性(8)。
3.2 基因表达水平的检测。
用基因芯片进行的表达水平检测可自动、快速地检测出成千上万个基因的表达情况。Schena等采用拟南芥基因组内共45个基因的cDNA微阵列(其中14个为完全序列,31个为EST),检测该植物的根、叶组织内这些基因的表达水平,用不同颜色的荧光素标记逆转录产物后分别与该微阵列杂交,经激光共聚焦显微扫描,发现该植物根和叶组织中存在26个基因的表达差异,而参与叶绿素合成的CAB1基因在叶组织较根组织表达高500倍。(9)Schena等用人外周血淋巴细胞的cDNA文库构建一个代表1046个基因的cDNA微阵列,来检测体外培养的T细胞对热休克反应后不同基因表达的差异,发现有5个基因在处理后存在非常明显的高表达,11个基因中度表达增加和6个基因表达明显抑制。该结果还用荧光素交换标记对照和处理组及RNA印迹方法证实(10)。在HGP完成之后,用于检测在不同生理、病理条件下的人类所有基因表达变化的基因组芯片为期不远了(11)。
3.3 基因诊断
从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱。从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱。通过比较、分析这两种图谱,就可以得出病变的DNA信息。这种基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点,将成为一项现代化诊断新技术。例如,Affymetrix公司,把P53基因全长序列和已知突变的探针集成在芯片上,制成P53基因芯片,将在癌症早期诊断中发挥作用。又如,Heller等构建了96个基因的cDNA微阵,用于检测分析风湿性关节炎(RA)相关的基因,以探讨DNA芯片在感染性疾病诊断方面的应用(12)。现在,肝炎病毒检测诊断芯片、结核杆菌耐药性检测芯片、多种恶性肿瘤相关病毒基因芯片等一系列诊断芯片逐步开始进入市场。基因诊断是基因芯片中最具有商业化价值的应用。
3.4 药物筛选
如何分离和鉴定药的有效成份是目前中药产业和传统的西药开发遇到的重大障碍,基因芯片技术是解决这一障碍的有效手段,它能够大规模地筛选、通用性强,能够从基因水平解释药物的作用机理,即可以利用基因芯片分析用药前后机体的不同组织、器官基因表达的差异。如果再用m RNA 构建c DNA表达文库,然后用得到的肽库制作肽芯片,则可以从众多的药物成分中筛选到起作用的部分物质。或者,利用RNA、单链DNA有很大的柔性,能形成复杂的空间结构,更有利与靶分子相结合,可将核酸库中的RNA或单链DNA固定在芯片上,然后与靶蛋白孵育,形成蛋白质-RNA或蛋白质-DNA复合物,可以筛选特异的药物蛋白或核酸,因此芯片技术和RNA库的结合在药物筛选中将得到广泛应用。在寻找HIV药物中,Jellis等用组合化学合成及DNA芯片技术筛选了654536种硫代磷酸八聚核苷酸,并从中确定了具有XXG4XX样结构的抑制物,实验表明,这种筛选物对HIV感染细胞有明显阻断作用。(13)生物芯片技术使得药物筛选,靶基因鉴别和新药测试的速度大大提高,成本大大降低。基因芯片药物筛选技术工作目前刚刚起步,美国很多制药公司已开始前期工作,即正在建立表达谱数据库,从而为药物筛选提供各种靶基因及分析手段。这一技术具有很大的潜在应用价值。
3.5 给药个性化
临床上,同样药物的剂量对病人甲有效可能对病人乙不起作用,而对病人丙则可能有副作用。在药物疗效与副作用方面,病人的反应差异很大。这主要是由于病人遗传学上存在差异,如药物应答基因,导致对药物产生不同的反应。例如细胞色素P450酶与大约25%广泛使用的药物的代谢有关,如果病人该酶的基因发生突变就会对降压药异喹胍产生明显的副作用,大约5%~10%的高加索人缺乏该酶基因的活性。现已弄清楚这类基因存在广泛变异,这些变异除对药物产生不同反应外,还与易犯各种疾病如肿瘤、自身免疫病和帕金森病有关。如果利用基因芯片技术对患者先进行诊断,再开处方,就可对病人实施个体优化治疗。另一方面,在治疗中,很多同种疾病的具体病因是因人而异的,用药也应因人而异。例如乙肝有较多亚型,HBV基因的多个位点如S,P及C基因区易发生变异。若用乙肝病毒基因多态性检测芯片每隔一段时间就检测一次,这对指导用药防止乙肝病毒耐药性很有意义。又如,现用于治疗AIDS的药物主要是病毒逆转录酶RT和蛋白酶PRO的抑制剂,但在用药3-12月后常出现耐药,其原因是rt、pro基因产生一个或多个点突变。Rt基因四个常见突变位点是Asp67→Asn、Lys70→Arg、Thr215→Phe、Tyr和Lys219→Glu,四个位点均突变较单一位点突变后对药物的耐受能力成百倍增加(14)。如将这些基因突变部位的全部序列构建为DNA芯片,则可快速地检测病人是这一个或那一个或多个基因发生突变,从而可对症下药,所以对指导治疗和预后有很大的意义。
此外,基因芯片在新基因发现、药物基因组图、中药物种鉴定、DNA计算机研究等方面都有巨大应用价值。
4 基因芯片国内外现状和前景
自从1996年美国Affymetrix公司成功地制作出世界上首批用于药物筛选和实验室试验用的生物芯片,并制作出芯片系统(15),此后世界各国在芯片研究方面快速前进,不断有新的突破。美国的Hyseq公司、Syntexi公司、Nanogen公司、Incyte公司及日本、欧洲各国都积极开展DNA芯片研究工作;摩托罗拉、惠普、IBM等跨国公司也相继投以巨资开展芯片研究。98年12月Affymefrix公司和Molecular Dynamics公司宣布成立基因分析协会(Genetic Analysis Technology Consortium)以制定一个统一的技术平台生产更有效而价谦的设备,与此相呼应,英国的Amershcem Pharmacia Biotechnology公司也在同一天宣布将提供部分掌握的技术以推动这项技术的应用(16)。美国关于芯片技术召开了两次会议,克林顿总统在会上高度赞赏和肯定该技术,将基因芯片看作是保证一生健康的指南针(17)。预计在今后五年内生物芯片销售可达200-300亿美元;据《财富》杂志预测(97.3),在21世纪,生物芯片对人类的影响将可能超过微电子芯片。
参考资料: