GB/T14976 液体输送用不锈钢无无缝钢管，OD1020,ASTM304是什么意思

液相色谱是用填料紧密装填的，使用时压力很高，只能使用耐压的不锈钢材质，且由于配套系统的压力适用范围限制，尺寸不能太长，否则压力就会超出仪器的耐受范围。

气相色谱的柱子其实分两种，传统的填充柱有石英玻璃的也有不锈钢的，长度在数米范围，内部也是紧密装填填料，但因为通过柱子的是气体，压力远小于液体，所以柱子长度可以比较长。另外一种就是石英毛细管柱，它是中空的（！），分离作用是通过柱内壁交联的高分子聚合物膜来实现的，因此压力更低，长度可以长数十米甚至上百米，以达到非常高的分离效率。

岛津液相管路是0.3，因为检测池前管路细、短一是为了减小样品扩散，二是为了提高检测灵敏度。

泵前吸液管一般选择Ф3×Ф2或Ф4×Ф3，长度一般1.0-1.5m；

泵连接管路一般采用Ф1.6×Ф0.5或0.75，长度一般1m左右；

混合器到进样阀、进样阀到色谱柱、色谱柱到检测池的管路一般都是Ф1.6×Ф0.25，每段长度一般都0.3-0.5m；

检测池前后的管路一般选用Ф1.6×Ф0.18、0.13、0、08，长度一般都在0.3m左右；

手动进样阀废液管一般采用Ф1.6×Ф0.5或0.75不锈钢管，长度0.2m，也有用塑料管的，长度不定，有的直接接到废液桶；

泵柱塞清洗管一般采用Ф3×Ф2或Ф2×Ф1的塑料管，长度一般根据设计需要和使用需要而定；

泵废液管一般选用Ф2×Ф1或Ф1.6×Ф0.8，长度1.0-2.0m；

自动进样器

废液管一般较粗，内径大多都在Ф8-Ф12之间，长度大多都在1-1.5m之间；

检测器废液管一般都是Ф1.6×Ф0.25或0.5，长度在1.0-2.0m之间（示差折光检测器例外，管路细了，长了，背压大，该检测池耐不了高压，易坏，管路一般采用粗一点的，如Ф3×Ф2或Ф2×Ф1的）

这个太多了，我觉得最主要不要把柱子装倒，温度，流量太高太大把柱子弄坏就可以了。仪器不弄坏其他的大不了重做。

1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题：

不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。

2、色谱柱变干的问题：

另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。

3、使用PEEK（polyetheretherketone）管路和接头需要注意以下问题：

如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱，使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接；PEEK接头不仅无需工具，手拧即可固定，而且容易调节锥箍之外的管路长度，方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。

使用此类材料的管路需要注意的是：PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象，但PEEK遇到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力，但PEEK管只能耐受近4000psi（但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi）。

使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能，因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管，因而压力太高时，可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。

4、预防液相泵的故障：

处于良好操作状态的泵，应该能使色谱图上的基线平稳；保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施：

1）用高质量试剂和HPLC级溶剂；

2）过滤流动相和溶剂；

3）脱气；

4）每天开始使用时放空排气，工作结束后从泵中洗去缓冲液；

5）不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中；

6）定期更换垫圈；

7）需要时加润滑油；

8）查阅有关泵操作手册中的其它建议。

9）为了使故障发生后尽快排除，平时应常备密封、单向阀（入口与出口）、泵头装置、各式接头、保险丝等部件，以及更换工具。

楼上说的补充一下，超声完了之后，可以接在仪器上，输出端不连接，用适当的流动相冲冲，冲的时候低流速观察压力和输出口的情况，如果输出口有流动相流出，保持在仪器耐受压力范围内，调整流速，应该可以慢慢冲开，冲不开的话，就去备件包里找找，标配的1200里应该有几套接头和连接管，组装好了更换就行，连接管没有必要用一模一样的，管内径一致就可以，如果是连接进样针和计量泵的那根管线，要选用管线容积大于100微升的，不然可能造成自动进样器计量不准，重复性差。如果没有可以向厂家购买。

如果出现这种情况，最好还是更换备件。

没有什么特殊的叫法，就叫做管路接头。因为管路的内径是固定的，也没有什么型号可言。

主要看你的材质是什么了，如果是不锈钢的，就叫不锈钢接头，如果是那种感觉像是塑料的材质，就叫做peek头，管线就叫做peek管。

现在用peek头的比较多，因为密封性好，接上柱子不容易漏液。

高效液相色谱仪的使用

1.色谱柱它包括空柱和填料。空柱是内壁抛光的不锈钢管，内径为4～5mm，长100～250mm。按气相色谱法中洗涤空柱的方法洗净，用匀浆法填充固定相。将此柱装入仪器的管路中，用柱式机械往复泵输入新鲜脱气的流动相。等基线平直后可用苯、萘、菲的混合试液，用正己烷(含 0.05%甲醇)或甲醇：水(83：17)为流动相测定柱效及分离度塔板数在2～3万/ml以上及分离度在1.5以上者，柱效好。为防止柱污染，常用1个 50mm长，4~5mm内径，装有硅胶(40-50mm)或立柱相同填料的保护柱(预柱)接在主柱之前，以延长色谱柱的寿命。反相键合相柱用毕。必须用水充分流经，以洗去盐类、酸碱等杂质防止柱生锈及填料中杂质的积聚，再用甲醇流经洗涤使色谱柱获得再生。

2.流动相的洗脱方式配好经脱气的流动相放于贮液瓶中，经过有滤过头、内径2mm的聚四氟乙烯管流入高压泵进入色谱柱，最后自检测器流出或收集或作废液回收。用流动相洗脱的方式有恒溶剂脱洗法(isocratic dlution)，即自洗脱开始到结束，溶剂的配比恒定。另一类为梯度洗脱法(gradicnt clution),即使溶剂的极性强度在色谱过程中逐渐增加。须按一定程序不断改变流动相的浓度配比，从而使同一个试样中组分性质相差较小的及较大的都能在一次色谱过程中很好分离，而整个色谱过程缩短。必须注意，梯度洗脱法不能用于分子排阻色谱及用电化学检测的反相高效液相色谱法中。

3.检测器适用于血药浓度的检测器有紫外线吸收，荧光发射和电化学三种。紫外检测器应用于对紫外光有吸收的药物，大多数药物分子对紫外光有吸收，故能较普遍采用，检测限有0.1μg左右。紫外检测器有固定波长型、可变波长型及扫描器，既能使流动相停流作组分的定性定量检测，又能提高测定灵敏度，重现性较好。荧光发射检测器对能产生荧光的药物才能使用。80年代应用激光替代氙灯光源，光强度增加了3~4倍，对某些药物的检测限可达pg级。电化学检测器是由一个碳糊或破碳做成的蒲层电解池。常用于检测儿茶酚胺类及有酚类基团的各种药物和代谢物。流出组分进入2μl的薄层电解池，在一暄电压下电解产生电流，放大后检测，检测限pg级。

4.数据处理现代高效液相色谱仪带有数据处理系统，除记录谱外，还能自动记录峰的保留时间，能自动积分求算峰面积，并能按照预定的程序作有关计算，报告分析结果。

高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法

1 液相色谱仪系统

液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成(如图1所示)。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件，同时也是容易出事故的主要场所。

2 常见问题及解决方法

2.1 针对柱压问题(表1)

柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值，而是指压力波动范围在50PSI之间。压力过高、过低及波动较大都属于柱压问题，但柱压的高低与色谱柱的种类、品牌、液相系统本身及使用的流动相种类相联系。值得注意的是在使用梯度洗脱时，进柱压的平稳缓慢的变化是允许的。

在实际应用中柱压过高可从以下几个方面来考虑[1]。首先考虑柱子是否被堵，此时可更换一根新柱子进行检测。

2.2 针对保留时间漂移的问题 [2，3] (表2)

保留时间的改变是很多液相色谱使用者常碰到的问题，其包括了保留时间增大和减小。它的产生与很多原因有关。

2.3 针对异常色谱峰问题[2-4]

异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。具体情况与原因分析如表3。

3 高效液相色谱仪的保养[5-7]

3.1 HPLC的日常操作条件

工作温度10～30℃相对湿度<80%最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。

3.2 泵的保养

使用流动相尽量要清洁进液处的沙芯过滤头要经常清洗流动相交换时要防止沉淀避免泵内堵塞或有气泡。

3.3 进样器的保养

每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。

3.4 柱的保养

柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净要注意流动相的脱气避免使用高粘度的溶剂作为流动相进样样品要提纯严格控制进样量每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。

3.5 检测器(UV)的保养

紫外灯的保养要在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器在分析完成后，马上关闭检测器。同时样品池要保养。

4 结语

在高效液相色谱使用过程中故障排出时要遵守以下原则：一次只改变一个因素，从而确定假定因素与问题之间的联系如果通过更换组件来排查故障时要注意将拆下的完好组件装回原位，从而避免浪费养成良好的记录习惯，一个良好的记录是成功地进行故障排除的关键。

总之，在使用高效液相色谱时一定要注意样品的前处理与仪器的正确操作和保养，仪器系统的干净是用好仪器和维护维修仪器的关键。

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流动相流干后泵中进入空气，形成气压，一般来说常规的排空操作无法排除气泡，此时应该拆掉单向阀，用带peak连接头的软管，连接注射器，注射器内用流动相或10%甲醇填满后进行推注，辅助排除气泡。推注同时开启泵头辅助排气。

如果是themo或woters的仪器，会有一个排空阀，黑色旋钮中心带一个圆管接口的装置。旋开排空阀开启泵排气，同时用针筒接到阀上的接口辅助抽气即可排空。

前面所述的软管PEAK头和注射器一般来说购买液相时都会配备，如果没有，就用连接柱头的peak头和peak管（或不锈钢头不锈钢管）连接注射器针头或针筒。