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车道板和水平板
这就要看设置的层高或是怎样调整的标高,两者是不能有重叠的。
聚丙烯酰胺凝胶电泳原理是什么
聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺单体和交联剂甲叉...
怎样把三点定义斜板快速恢复成水平板?
还是选中再重新三点定义标高,定义的一样就成水平的了
电泳如何计算 使用多少阳极板 还有一块阳极板电泳面积多少 一根阳极管电泳多少
阳极板/阳极管的大小或数量是根据你电泳槽体大小、需要电泳的工件大小来核算的,比如简易电泳槽的阳极板面积一般是电泳槽单面面积大小的1/2--1/3左右,一般采用不锈钢316板,外...
什么叫电泳漆
电泳漆又叫电泳涂料。 早期以阳极电泳涂料为主,目前逐渐被阴极电泳涂料取代。 电泳涂料又可分为单组份和双组份两种,目前以双组份为主。 从颜色可分:黑色、灰色、白色和彩色。 从原料...
聚丙酰胺凝胶电泳
中性聚丙烯酰胺凝胶电泳
安装电泳装置和配制凝胶溶液
1.将0.8%的琼脂糖在0.25×TBE中熔化后冷却至50~60℃,立即注入凝胶框架中,并插入梳子。
2.凝胶固化后小心地拔出齿梳,用2把无菌手术刀将DNA凝胶块上样。若用不同内切酶消化凝胶块,则取不同样品时应将手术刀片烧灼后冷却。将DNA大小标志物上样至凝胶的两旁。
3.用1%液态低熔点琼脂糖凝胶(0.25×TBE配制)密封狭槽。
4.若有气泡存在,用注射器驱赶气泡。
5.一旦密封的低熔点琼脂糖已固化(大约10min),可将凝胶搁入腔室,并用电泳缓冲液覆盖过胶面。
6.应设定合适的电压及转换时间(参考《分子医学技术》84页表8.1)并开始电泳。两个不同电泳方向的电流应相等。
7.电泳结束后,凝胶用0.25×TBE配制成的EB(0.4μg/ml)染色。
8.用泵自槽中排除缓冲液,续以双蒸水冲洗电泳槽。
9.凝胶成像:DNA在曝光的过程中可能会形成缺口。
10. 用0.25mol/L HCl漂洗凝胶30min,让DNA脱嘌呤,并有利于转移。
11. 凝胶用碱(变性溶液中)变性20min,两次,续以中性溶液1~5min。
12. 采用标准Southern印迹方案将DNA转印至尼龙膜上。一般来说,印迹PFGE凝胶的时间较普通凝胶印迹时间长(约48h)。
以凝胶(如聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶
等)为支撑物的区带电泳。