电泳缓冲液 528 电泳缓冲液是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液,用以稳定体系酸碱度。 目录电泳缓冲液配制方法电泳缓冲液造价信息电泳缓冲液概述电泳缓冲液常见问题电泳法电泳缓冲液缓冲液案例核酸电泳分类展开 4
凝胶电泳是为了分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子加入缓冲溶液是为了调节合适的离子浓度和PH值,保持分离物质分子构象不变缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变
电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有001-004mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化
电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀
不对。
DNA和蛋白质都是用上样缓冲液(loading buffer)处理,而不需要用电泳缓冲液处理。
上样缓冲液中主要是缓冲盐离子、甘油(利于样品沉降)和溴酚蓝或考马斯亮蓝(指示溶液前沿)。
蛋白的上样缓冲液中还加入了SDS变性剂,使蛋白带上负点,利于电泳。
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