电泳缓冲液是指在进行分子电泳时所使用的缓冲溶液，用以稳定体系酸碱度。常见的核酸电泳缓冲液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。 作用 缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时阳极与阴极都会发生电解反应，阳
电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成， 是电泳场中的导体，也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率，应避免与被分离的样 品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子，防止电泳时激 活DNA酶及Mg离子与核酸生成沉淀。
＊样品制备
样品必须完全溶解于上样缓冲液，否则不能在凝胶中移动。样品太浓可能产生假相。
样品缓冲液包含盐类（维持样品）、甘油（增加重量从而使样品下沉至点样孔）、以及示踪染料（以便监测电泳进程）。
样品缓冲液可以分装成小部分冻存。
缓冲液加到凝胶上之后才能点样。
样品缓冲液中的示踪染料可以指示什么时候终止电泳。两种最常用的染料是漠酚蓝(BPB) 与二甲基苯青FF 。
＊标准分子质量
标准分子质量应同时电泳，用来检测电泳进展以及分析结果。
使用相适应的标准分子质量。
胶连同分子质量标准物一起拍照。标上各条带的大小。
标准分子质量有带标记的与不带标记的两种。标记可以是荧光、发光体或者放射性元素。如果手边没有带标记的标准物，可以将染色后的胶与事后标记的印迹相比较。
在每一块胶的同一泳道点上标准物。把标准物加在第一个泳道，就能知道胶的方向。
点上正对照与负对照。
＊样式
琼脂糖凝胶一般以水平方向进行电泳，而聚丙烯酰胺凝胶则是以垂直方向进行电泳。潜水型胶是一种水平方向胶，凝胶被浸淹在电泳槽的底部。
凝胶可以制成多种大小。测序胶必须制成大胶，但是对于大多筛选与转移用胶，甚至包括双向凝胶来说，只要不是把分子量相近的条带区分割，小型胶就可以了。
毛细管电泳利用开口狭小的毛细管来进行DNA 、蛋白质和其他小分子的自动高效分离。分离是与检测分析相连，就像色谱仪器一样。只有专门实验室才有毛细管电泳设备。
＊凝胶
聚丙烯酰胺VS
琼脂糖。尽管凝胶电泳可以在滤纸、醋酸纤维素、淀粉或者其他基质上进行，大多数研究者还是只采用聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶。两种都是多孔性胶，像分子筛样起作用（聚丙烯酰胺或者琼脂糖的百分比越高孔越小）。理论上，任何一种都可以用来分离DNA
、RNA 或者蛋白质。但是，聚丙烯酰胺在低百分比浓度时很软，难以用手操作。一般采用高百分比浓度，用以分析蛋白质和小核苷酸。
低百分比琼脂糖凝胶相对较硬，易于操作，用来分离目的分子，如DNA和RNA或者巨大的蛋白质和蛋白质复体。
胶的浓度必须与片断大小相适应。
每次切去胶的同一小角。这样，万一胶掉落、翻转或在转移过程中放置凝胶，都能给定位做参考。
＊缓冲液
大多数电泳缓冲液配成高浓度母液，在电泳前稀释。
每一种缓冲液在某一电流时会有特定的电压。要认识每一种缓冲液的特性，这样，出错时，就马上可以注意到。
＊电源
电源输出有几种模式：稳压(mV) 、稳流（安培，或者简称安）以及稳功率（瓦特，瓦） 。许多型号允许设定程序，在各种模式之间自动转换。这样可以使用最佳的电压（ 在电泳过程中可能发生变化）同时不超出容量。
不是所有的电源输出装置都相同，所以不能简单地将电泳装置接到任意装置上。要清楚你需要什么电流或者电压，然后找出需要的装置。
大多数实验室都有不止一个电源装置用于测序胶（要求高电压）、电泳转移（要求高电流）以及用于琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳（使用大范围的电压）的装置。很少有电源装置能同时满足所有的要求。
变性蛋白胶与DNA和RNA胶中的样品会从负极（阴极）移到正极（阳极） 。用红色导线接正极（＋），黑色导线接负极（一）。可以用同一个电源输出装置同时进行几块胶的电泳，但是没问过其他人前不要这样做，因为电泳条件会发生变化。
设置闹钟提醒自己察看胶。特别是当你要察看低分子质量的分子时，样品很容易跑出胶进入缓冲液中。
接触任何东西前，确信电泳装置必须处于断电状态。如果电源没被切断，不要进行任何操作！
电流效应
电流（mA）效应
交流电直流电
≤15没有感觉
1~8 电击感觉， 不疼
8~15 疼痛性电击，个别人可以摆脱紧握
15~2075肌肉控制丧失，不能摆脱紧握
20~50 肌肉收缩，呼吸困难
50~100300~500可能会出现心室纤维颤动
100~200 心室纤维颤动
≥200 严重灼伤，肌肉收缩严重以致心跳停止
＊固定
凝胶是否需要固定取决于用途。需要染色的胶一般需要固定，而用于转移的胶则不需要固定。
＊干燥
通过出去胶上的水，胶基质变薄。干燥之后的胶在放射自显影后条带更清晰。
在凝胶干燥仪上干燥一块胶不需1小时。凝胶干燥仪可以加热，从而加快干燥过程。
＊染色
DNA与RNA的染色可以通过在电泳前把染料加到样品中完成，也可以在事后染色。
蛋白质胶在电泳后染色。
＊记录
凝胶经溴化乙锭染色后的Polaroid照片与蛋白质凝胶的35 mm照片是最常用的记录方式。
数字记录与分析系统最常使用，所有数据可以直接用来演示。
各种转移的记录方式取决于体系与实验。例如，放射自显影与化学发光结果可以记录在X射线胶片上，而信号可用光密度计定量。
＊确定分子质量
蛋白质的分子质量可用SDS-PAGE确定，而DNA与RNA的分子质量可以由琼脂糖凝胶电泳来确定。对某一分子而言，其分子质量的对数与其Rf（相对迁移距离）存在线性关系。以标准物的迁移距离对其分子质量的对数作图，得到标准曲线，而样品的Rf 值一也就是分子质量一可以由图外推得到。
1制胶，胶的浓度应最适宜分离分子质量相近的分子。同时电泳分子质量标准物，其范围涵盖有目的分子的大致大小。
2跑胶，防止染料前沿跑出胶的边际。
3胶染色，拍照。如果样品是放射性标记的，你可以使用放射性标记的标准物或者把胶与放射自显影胶片相比较。4测定从样品孔到每一标准条带的距离。计算每个数值的对数，画到常规图纸的Y 轴上。X 轴上是迁移的距离（以厘米计最方便）。对大多数标准物条带应该得到一条盲线。
5把样品迁移距离画到图上。外推标准曲线，确定分子质量。
目录 1 拼音 2 英文参考 3 概述 4 血红蛋白电泳的医学检查 41 检查名称 42 分类 43 取材 44 血红蛋白电泳的测定原理 45 试剂 451 微量血红蛋白电电泳： 452 醋酸纤维膜电泳染色比色法： 46 操作方法 461 微量血红蛋白电电泳： 462 醋酸纤维素膜电泳染色比色法： 463 蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法 47 正常值 48 化验结果临床意义 49 相关疾病 1 拼音
xuè hóng dàn bái diàn yǒng
2 英文参考HE
hemoglobin electrophoresis
3 概述各种血红蛋白具有不同的等电点，在一定pH值的缓冲液中可带不同电荷。在堿性缓冲液中带负电荷，反之带正电。在一定的电场中带有不同电荷的Hb分子可分别向正极或负极移动，其移动速度随Hb分子所带电荷的强弱而不同，结果形成各种区带——电泳图谱。从电泳图谱中可初步鉴别出各种异常血红蛋白，经光电比色或扫描的方法求其含量。
4 血红蛋白电泳的医学检查 41 检查名称血红蛋白电泳
42 分类
临床血液检查 > 红细胞
43 取材血液
44 血红蛋白电泳的测定原理（1）微量血红蛋白电电泳：血红蛋白中的各组分由于其分子表面所带电荷性质与数量不同而等电点各异。在不同pH的电场中，因其所带电荷差异而泳动速度不同。由此可将血红蛋白的各组份分开。异常血红蛋白分子如果有电荷的改变，则会在正常电泳图形的其他部位出现异常区带，以达到分离鉴定的目的。
在电泳法中，因所用支持物不同，有纸上电泳、琼脂电泳、淀粉胶电泳、淀粉板电泳、醋酸纤维素膜电泳等。所用的电泳缓冲液有pH86或89的巴比妥缓冲液，pH91、90、89及85的TEB缓冲液。pH168和70的磷酸缓冲液等。
目前临床实验室首选的是醋酸纤维素膜堿性电泳。该方法操作简易、电泳时间短，分辨率高，常用于异常血红蛋白的筛选。必要时再用pH65或pH6～62缓冲液的酸性电泳进一步进行异常血红蛋白的鉴别。
（2）异常肽链鉴定（尿素解离法）：将巯基乙醇与尿素加入血红蛋白溶液后，可使血红蛋白分子中二硫键还原，空间结构被破坏，珠蛋白被裂解为肽链亚单位。不同肽链的等电点不同，迁移率各异，可用电泳将肽链分开。异常血红蛋白的异常肽链也可用此法分开，并根据其位置判断属何种异常。
45 试剂 451 （1）微量血红蛋白电电泳：①TEB缓冲液（pH85，浸膜用）：
三羟甲基氨基甲烷 （Tris） 102g EDTA 06g
硼酸（boric acid） 32g 蒸馏水 加至1000ml
②BB缓冲液（电泳槽用）：
硼砂 687g 硼酸 556g
蒸馏水 加至1000ml
③血红蛋白溶液：按前法制备的血红蛋白溶液稀释成30～50g/L。
④丽春红染液：
丽春红S染料 18g 三氯醋酸 268g
磺柳酸 268g 蒸馏水 加至1000ml
此为贮存液。最好用安瓿分装，每支2ml。用前按每毫升贮存液加蒸馏水19ml稀释。
⑤脱色液3%醋酸溶液。
⑥透明液：
无水乙醇 70ml 冰醋酸 30ml
452 （2）醋酸纤维膜电泳染色比色法：①TEB缓冲液及BB缓冲液同微量血红蛋白电电泳。
②染色液：
氨基黑10B 05g 甲醇 50ml
冰醋酸 10ml 蒸馏水 40ml
溶解后贮存于棕色瓶内。
③漂洗液：
乙醇（或甲醇） 45ml 冰醋酸 5ml
蒸馏水 50ml
④浸出液 NaOH 04mol/L。
（3）异常肽链鉴定（尿素解离法）：
①解离液：
尿素54g β巯基乙醇 20ml
TEB缓冲液（血红蛋白电电泳用，pH85）加至10ml
置于冰箱备用。
②浸膜液：
尿素 48g Tris 114g
EDTANa2 012g 硼酸 032g
蒸馏水 加至100ml
③电泳缓冲液（同血红蛋白电电泳BB缓冲液）。
④丽春红染液（同血红蛋白电电泳）。
⑤冼脱液（同血红蛋白电电泳）。
46 操作方法 461 （1）微量血红蛋白电电泳：①浸膜：将醋酸纤维素膜漂浮于TEB缓冲液表面，待其均匀浸透沉下后，至少20min才可使用。这样可防止产生气泡。
②点样：取出醋酸纤维薄膜用滤纸吸去多余的水份。用微量吸管吸取血红蛋白溶液置于多标本加样器的凹型槽内,以多标本加样器蘸取血红蛋白液，点样于醋酸纤维素膜无光泽面。距阴极端15～2cm处，点样量约3～5μl同时平行地点上正常血红蛋白溶液作对照。
③电泳：在微型电泳槽两侧缓冲液槽内分别加入等量的BB缓冲液，以二层滤纸做盐桥搭在醋酸纤维薄膜支架上。将膜无光泽面向下，点样端接负极，平衡5min。接通电源。电压180V，电流量约为02mA/cm膜宽，电泳时间20～30min。槽中缓冲液可在倒换电极后再用1次。
④染色：电泳后的薄膜放在丽春红染色液中染色10min左右取出，用3%醋酸漂洗数次，至背景呈白色，阴干。
⑤透明：将醋酸纤维素膜置透明液中浸湿，贴于洁净玻璃板上，用玻棒赶去二者之间的气泡。于一层析缸内倒少量冰醋酸，将玻璃板反盖在层析缸上（有薄膜面向内）。以挥发的冰醋酸熏10～20min，待膜透明即可取下。
462 （2）醋酸纤维素膜电泳染色比色法：①将TEB缓冲液浸泡过的4cm×6cm的醋酸纤维素膜取出，用滤纸吸干多余水分。于无光泽面距阴极端15cm处，用血红蛋白吸管直线状均匀整齐地滴加50g/L Hb溶液约5μl，待血红蛋白液渗入膜内后，将膜翻转置电泳槽支持板的滤纸桥上。
②电泳：电压180V,时间30～40min，以Hb各区带完全分离为准。电泳后交换电极，电泳缓冲液可多次使用。
③染色：将膜浸入染色液中，冬天需染2h,夏天或将染缸置25～30℃．可只染30min左右。注意如染色不透（如时间太短或血红蛋白溶液过浓），或电压过高使HbA带过于集中，易致色带剥脱，均影响定量的准确性。染毕用漂洗液洗数次，至背景漂净为止。
④定量：将漂净的膜取出，分别剪下各区带，及相当于HbA2大小的对照区带，各自放在相应的试管中。于HbA管中加浸出液10ml，其余各管加浸出液2ml，浸泡20min，时时振摇。使色带完全洗脱（注意在气温较高时，洗脱时间不可过长，否则洗脱液蓝色减退，并逐步变为紫红色）。将洗脱液混匀，用721分光光度计，波长620nm，以空白调零，测各管吸光度。
⑤计算：同直接比色法。
463 蜡酸纤维薄膜电泳直接比色法试剂：同醋酸纤维素膜微量血红蛋白电电泳。
操作：
（1）将醋酸纤维素膜作1/3切开（4cm×8cm）漫于TEB缓冲液中，10min以上。
（2）取出醋酸纤维素膜用滤纸吸去多余的水份。以Hb吸管吸取100g/L溶血液10μl均匀涂于玻璃推片下缘，在距薄膜阴极端15～20cm处于无光泽面点样。每个标本同时做两份。
（3）电泳：缓冲液同微量血红蛋白电电泳。电压180V，时间40min～1h。（以各区带明显分开为宣）电泳后交换电极，缓冲液可反复使用。
（4）洗脱与定量 分别剪下HbA,HbA2和相当于HbA2大小的对照区带。如有异常Hb区带（HbX）也同时剪下，各自放在相应的试管中。于HbA管中加TEB缓冲液10ml，其余各管加TEB缓冲液2ml，浸泡30min，时时振摇。待完全洗脱后。将
洗脱液混匀，用721分光光度计，波长413nm。以空白调零，测各管吸光度。
（5）计算：
如有异常HbX，则计算HbA2%时，分母中还要加：HbX吸光度。
HbX%＝
47 正常值
电泳法：
HbA 95%
HbA2 11%～32%
HbA3 2%～3%
Singer法：HbF＜4%
48 化验结果临床意义（1）增高：重型地中海贫血（HbA2、HbF增高）、轻型β地中海贫血（HbA2 4%～10%）
（2）降低（HbA2）：缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血。
49 相关疾病电泳:金属表面有另外一种金属离子沉积的过程。溶液中带电粒子（离子）在电场中移动的现象，利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。
电泳涂的是一层树脂，电泳操作方便。所以从成本上来说相差甚远，
电泳漆是以水为溶剂，废弃物少，对环境污染少。
么是电泳
在确定的条件下，带电粒子在单位电场强度作用下，单位时间内移动的距离（即迁移率）为常数，是该
电泳图谱
带电粒子的物化特征性常数[1]。不同带电粒子因所带电荷不同，或虽所带电荷相同但荷质比不同，在同一电场中电泳，经一定时间后，由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。
在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。胶体有电泳现象，证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同，它们吸附的离子不同，所以带有不同的电荷。
NO，储藏液一般是母液，用的时候需要相应的稀释。所谓母液就是高浓度的储藏液。浓度低容易变质。
电泳储液一般50X ， 用的时候要稀释到1X，也就是按1ml 50X 储液 + 49ml 去离子无菌水的比例混匀。
