单相真空泵 变频 恒压控制

微型真空泵总的选型原则是：能用无刷真空泵就用无刷的。因为无刷真空泵的寿命比有刷的长。特别适合昼夜不停连续运转的场合，比如做长期在线采样气泵使用；连续抽抽真空泵等等。 微型无刷真空泵（新为诚品牌），寿命往往接近上万小时(满负荷下)；特别适合昼夜不停连续运转的场合，有的甚至可以连续运转1年以上，如果是间断使用，甚至可能到几年。而且还有“调速”功能，即可以采用占空比调电机的转速(PWM调速)，从而达到间接调泵流量目的，配合相应的控制电路，甚至可以实现恒压、恒流、恒速等高级应用。 所以在参数能达到的情况，应该尽量选择无刷微型真空泵。 在微型真空泵的选型时，还要考虑的因素有：带负载启动问题，微型泵的介质温度问题，微型泵的可靠性问题，微型泵的电磁干扰问题。关于更详细的介绍，可以访问成都新为诚科技网站

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新界家用变频加压泵一般是离心泵，自动变频恒压供水，有铸铁和不锈钢两种材质可选，价格较之国外品牌要低一些，是国内数一数二的水泵品牌，质量可靠，根据家庭用水环境的不同，可以选择不同型号的，如不了解该如何选择，可咨询耐川自动化。

有的，一台全自动自吸泵就可以搞定。

现代农村一般都采用这种泵。电动的，打开水龙头是，抽水泵开始工作，通过电动机抽水。关上水龙头就自动停止工作了。

该设备由集成微电脑供水模块的背负式变频器控制，具备全自动运行、自吸性好、吸程高、变频恒压、差量补偿、过流/过载/过压/缺相/缺水保护、清洁卫生、节能、低噪音、美观紧凑等特点，特别适用于家庭家用和别墅自来水管道自来水二次增压；小型工业生产流程清水自动增压，变频恒压控制的绝对不会出现水压一大一小的情况。

⒈ 掌握恒压过滤常数 、 、 的测定方法,加深对 、 、 的概念和影响因素的理解.

⒉ 学习滤饼的压缩性指数s和物料常数 的测定方法.

⒊ 学习 一类关系的实验确定方法.

⒋ 学习用正交试验法来安排实验,达到最大限度地减小实验工作量的目的.

⒌ 学习对正交试验法的实验结果进行科学的分析,分析出每个因素重要性的大小,指出试验指标随各因素变化的趋势,了解适宜操作条件的确定方法.

二、实验内容

⒈ 设定试验指标、因素和水平.因课时限制,必须合作共同完成一个正交表.故统一规定试验指标为恒压过滤常数 ,实验室提供的实验条件可以设定的因素及其水平如表3-1所示,其中除滤浆浓度可以选二水平或四水平外,其余因素的水平必须按表3-1选取.并假定各因素之间无交互作用.

⒉ 统一选择正交表,按所选正交表的表头设计,填入与各因素水平对应的数据,使它变成直观的“实验方案”表格.

⒊ 分小组进行实验,测定每个实验条件下的过滤常数 、 、 .

⒋ 对试验指标 进行极差分析和方差分析；指出各个因素重要性的大小；讨论 随其影响因素的变化趋势；以提高过滤速度为目标,确定适宜的操作条件.

三、实验原理

⒈ 恒压过滤常数 、 、 的测定方法

过滤是利用过滤介质进行液—固系统的分离过程,过滤介质通常采用带有许多毛细孔的物质如帆布、毛毯、多孔陶瓷等.含有固体颗粒的悬浮液在一定压力的作用下液体通过过滤介质,固体颗粒被截留在介质表面上,从而使液固两相分离.

在过滤过程中,由于固体颗粒不断地被截留在介质表面上,滤饼厚度增加,液体流过固体颗粒之间的孔道加长,而使流体流动阻力增加.故恒压过滤时,过滤速率逐渐下降.随着过滤进行,若得到相同的滤液量,则过滤时间增加.

恒压过滤方程

（3-1）

式中： —单位过滤面积获得的滤液体积,m3 / m2；

—单位过滤面积上的虚拟滤液体积,m3 / m2；

—实际过滤时间,s；

—虚拟过滤时间,s；

—过滤常数,m2/s.

将式（3-1）进行微分可得：

（3-2）

这是一个直线方程式,于普通坐标上标绘 的关系,可得直线.其斜率为 ,截距为 ,从而求出 、 .至于 可由下式求出：

（3-3）

当各数据点的时间间隔不大时, 可用增量之比 来代替.

在本实验装置中,若在计量瓶中收集的滤液量达到100ml时作为恒压过滤时间的零点.

那么,在此之前从真空吸滤器出口到计量瓶之间的管线中已有的滤液再加上计量瓶中100ml滤液,这两部分滤液可视为常量（用 表示）,这些滤液对应的滤饼视为过滤介质以外的另一层过滤介质.在整理数据时,应考虑进去,则方程式（3-2）变为：

（各套 为200ml）

过滤常数的定义式：

（3-4）

两边取对数

(3-5)

因 ,故 与 的关系在对数坐标上标绘时应是一条直线,直线的斜率为 ,由此可得滤饼的压缩性指数 ,然后代入式（3-4）求物料特性常数 .

⒉ 正交试验法原理,参阅《化工基础实验》第3章.

四、实验装置

⒈ 本实验共有八套装置,设备流程如图3-1所示,滤浆槽内放有已配制有一定浓度的硅藻土～水悬浮液.用电动搅拌器进行搅拌使滤浆浓度均匀（但不要使流体旋涡太大,使空气被混入液体的现象）,用真空泵使系统产生真空,作为过滤推动力.滤液在计量瓶内计量.

⒉ 滤浆升温靠电热,用调压变压器即时调节电热器的加热电压来控温.每个滤浆内有电热器两个.

⒊ 滤浆浓度的水平分别指存放在滤浆槽内浓度不同的滤浆.

⒋ 过滤介质的水平1、2分别指真空吸滤器（玻璃漏斗）G2、G3（G2、G3是玻璃漏斗的型号,出厂时标注在漏斗上）.真空吸滤器的过滤面积为0.00385m2.

14

13

12

11

10

9

8

7

6

5

4

2

3

1

图3-1 正交试验法在过滤研究实验中的应用的流程图

1—搅拌装置；2—温度显示仪；3—真空吸滤器；4—电热棒；5—调节阀；6—滤液计量瓶；7—放液阀；

8—放液阀；9—真空表；10—进气阀；11—缓冲罐；12—调节阀；13—真空泵；14—滤浆槽

五、实验方法

⒈ 每个小组完成正交表中两个试验号的试验,每个大组负责完成一个正交表的全部试验.

⒉ 同一滤浆槽内,先做低温,后做高温.两个滤浆槽内同一水平的温度应相等.

⒊ 每组先把低温下的实验数据输入计算机回归过滤常数.当回归相关系数大于0.95时,该组实验合格,否则重新实验.使用同一滤浆槽的两组实验均合格后,才能升温.

⒋ 每一大组用同一台计算机汇总并整理全部实验数据,每个小组打印一份结果.

⒌ 每个实验的操作步骤：

⑴ 开动电动搅拌器将滤浆槽内硅藻土料浆搅拌均匀.将真空吸滤器按图示安装好,放入滤浆槽中,注意滤浆要浸没吸滤器.

⑵ 打开进气阀,关闭调节阀5.然后接通真空泵电闸.

⑶ 调节进气阀10,使真空表读数恒定于指定值,然后打开调节阀5,进行抽滤,待计量瓶中收集的滤液量达到100ml时,按表计时,作为恒压过滤零点.记录滤液每增加100ml所用的时间.当计量瓶读数为800ml时停表并立即关闭调节阀5.

⑷ 打开进气阀10和8,待真空表读数降到零时,停真空泵.打开调节阀5,利用系统内大气压把吸附在吸滤器上滤饼卸到槽内.放出计量瓶内滤液,并倒回滤浆槽内.卸下吸滤器清洗待用.

⒍ 结束实验后,切断真空泵、电动搅拌器电源,清洗真空吸滤器并使设备复原.

六、注意事项

⒈ 每次实验前都必须认真核对将做的实验是否符合正交表中因素和水平的规定.

⒉ 每个人实验的好坏,都会对整个大组的实验结果产生重大影响.因此,每个人都应认真实验,切不可粗心大意!

⒊ 放置真空吸滤器时,一定要把它浸没在滤浆中,并且要垂直放置,防止气体吸入,破坏物料连续进入系统和避免在器内形成滤饼厚度不均匀的现象.

⒋ 开关玻璃旋塞时,不要用力过猛,不许向外拔,以免损坏.

⒌ 每次实验后应该把吸滤器清洗干净.

⒍ 加热滤浆时加热电压不能超过220V.当滤浆温度快升到温度的水平2所规定温度时,加热电压应迅速降到40～50V.然后再酌情调节电压进行升温或保温.

七、报告内容

⒈ 列出全部过滤操作的原始数据,表格由各组统一设计.

⒉ 用最小二乘法或作图法求解正交表中一个试验的 、 、 .

⒊ 把计算机输出的恒压过滤常数 、 、 填入实验结果表中.

⒋ 对试验指标K进行极差分析和方差分析,并写出表中某列值的计算举例.

⒌ 画出表示K随各因素水平变化趋势的线图,并做理论分析.

⒍ 由本次正交试验可得出的结论.

⒎ 回答下列思考题

⑴ 为什么每次实验结束后,都得把滤饼和滤液倒回滤浆槽内?

⑵ 本实验装置真空表的读数是否真正反映实际过滤推动力?为什么?

表3-1 正交试验的因素和水平

因素

水平

压强差△P（Mpa）

过滤温度t℃

滤浆浓度C

过滤介质M

1

0.03

室温： ℃

5%

G2

2

0.04

室温+10℃

10%

G3

3

0.05

15%

4

0.06

20%

自动增压泵的自动开关是通过检测流经开关的水流压力来控制增压泵的开和关，也就是说，当你拧开家中的水龙头，按装在水管主管上的自动开关就有水流过，水流产生的压力被自动开关检测到，就会启动增压泵。

原理

1、压差式：压差式控制器有三个触点，分别是上限压力触点、公共触点和下限压力触点，使用时别定义好上限停机压力值和下限启动压力值，正常运行后，管网压力达到上限触点时，控制器反馈给控制系统，在各种电气元件配合下，增压泵断电停机保压；当用水导致管网压力持续下降至下限压力触点时，控制器反馈给系统，增压泵重新上电增压。如此循环，达到自动增压的目的。

2、水位式：水位式控制器就是我们常说的浮球开关，依然有三个触点（满水点、公共点、缺水点）。浮球开关在朝下（缺水）和朝上（满水）两个状态时分别可以反馈开机和停机两个开关信号。当装水的水池满水后，浮球被浮上来了处于朝上的状态，此时便反馈给控制器一个停机断电信号，增压泵便停止运行；

反之，里面水少了或缺水了，浮球状态改变了，变反馈开机信号给增压泵重新开机抽水。如此往复循环......

3、变频式：变频是基于闭环控制系统的，所谓闭环控制就是根据控制对象输出反馈来进行校正的控制方式，它是在测量出实际与计划发生偏差时，按定额或标准来进行纠正的。闭环控制，从输出量变化取出控制信号作为比较量反馈给输入端控制输入量，一般这个取出量和输入量相位相反，所以叫负反馈控制，工业化自动控制通常是基于闭环控制理念的。

简单的说，变频水泵的闭环控制原理就是通过对比【实际设定目标压力值】与【当前实际检测到的压力值】进行对比，通过一些列函数算法将这个差值更改到趋近与零即可。在水泵设备的变频调速过程中，当水压下降速度快时，变频器调速过程就加快，反之则变慢。在流量扬程达标的情况下，变频控制模式的输出压力可以始终是恒定的。

增压泵工作原理

先将增压泵内充满液体，然后启动离心泵，叶轮快速转动，叶轮的叶片驱使液体转动，液体转动时依靠惯性向叶轮外缘流去，同时叶轮从吸入室吸进液体，在这一过程中，叶轮中的液体绕流叶片，在绕流运动中液体作用一升力于叶片，反过来叶片以一个与此升力大小相等、方向相反的力作用于液体，这个力对液体做功，使液体得到能量而流出叶轮，这时液体的动能与压能均增大。

气液增压泵工作原理类似于压力增压器，对大径空气驱动活塞施加一个很低的压力，当此压力作用于一个小面积活塞上时，产生一个高压。通过一个二位五通气控换向阀，增压泵能够实现连续运行。

由单向阀控制的高压柱塞不断的将液体排出，增压泵的出口压力大小与空气驱动压力有关。当驱动部分和输出液体部分之间的压力达到平衡时，增压泵会停止运行，不再消耗空气。当输出压力下降或空气驱动压力增加时，增压泵会自动启动运行，直到再次达到压力平衡后自动停止。采用单气控非平衡气体分配阀来实现泵的自动往复运动，泵体气驱部分采用铝合金制造。

接液部分根据介质不同选用碳钢或不锈钢。一般泵都有进气、排气两个口，在进气口能产生低于常压（即大气压）气压的叫“负压”；在排气口能产生高于常压气压的叫“正压”；比如常说的真空泵就是负压泵，增压泵就是正压泵。正压泵跟负压泵有很大的不同。比如气体流向，负压泵是外部气体被吸入到抽气嘴；正压是从排气嘴喷出去；比如气压的高低等。

参考资料：百度百科 增压泵

SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(P0012A)。该试剂盒提供了除水和配胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。(主要分为浓缩胶和分离胶，配方可自己上网查下)

(2) 样品处理

在收集的蛋白样品中加入适量浓缩[V1] 的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积，在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制，也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)(P0015)。

100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白[V2] 。

(3) 上样与电泳

冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。

为了便于观察电泳效果和转膜效果，以及判断蛋白分子量大小，最好使用预染蛋白质分子量标准(P0066)。

电泳时电泳液可以使用碧云天生产的SDS-PAGE电泳液(P0014A/P0014B)。

电泳时通常推荐在上层胶时使用低电压恒压电泳，而在溴酚蓝进入下层胶时使用高电压恒压电泳。对于Bio-Rad的标准电泳装置或类似电泳装置，低电压可以设置在80-100V，高电压可以设置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的电泳仪就可以满足要求，也可以采用碧云天的多功能电泳仪(带定时)(EEP102)。为了电泳方便起见，也可以采用整个SDS-PAGE过程恒压的方式，通常把电压设置在100V，然后设定定时时间为90－120分钟。设置定时可以避免经常发生的电泳过头。

通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳，或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的蛋白已经被适当分离后即可停止电泳。

3. 转膜(Transfer)[V3]

我们推荐在Western实验中选用PVDF膜(FFP30/FFP33)。硝酸纤维素膜(NC膜)(FFN06/FFN09)也可以使用，但硝酸纤维素膜比较脆，在操作过程中特别是用镊子夹取等过程中容易裂开。膜的使用请参考生产商的推荐使用步骤。

通常如果使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置，可以设定转膜电流为300-400mA，转膜时间为30-60分钟。也可以在15-20mA转膜过夜。转膜时也可以使用碧云天的多功能电泳仪(带定时)(EEP102)。具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。

在转膜过程中，特别是高电流快速转膜时，通常会有非常严重的发热现象，最好把转膜槽放置在冰浴中进行转膜。

转膜的效果可以观察所使用的预染蛋白质分子量标准，通常分子量最大的1-2条带较难全部转到膜上。转膜的效果也可以用丽春红染色液(P0022)对膜进行染色，以观察实际的转膜效果。也可以用考马斯亮蓝快速染色液(P0017)对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色，以观察蛋白的残留情况。

4. 封闭(Blocking)

转膜完毕后，立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液(P0023C)中，漂洗1-2分钟，以洗去膜上的转膜液。从转膜完毕后所有的步骤，一定要注意膜的保湿，避免膜的干燥，否则极易产生较高的背景[V4] 。

用微型台式真空泵(EVAC06/EVAC07)或滴管等吸尽洗涤液，加入Western封闭液(P0023B)，在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。对于一些背景较高的抗体[V5] ，可以4℃封闭过夜。在整个Western过程中我们推荐使用碧云天的侧摆摇床(ESHK02)或类似仪器，侧向摆动速度比较缓慢，而且也容易让溶液覆盖蛋白膜。

5. 一抗孵育(Primary antibody incubation)

参考一抗的说明书，按照适当比例用Western一抗稀释液(P0023A)稀释一抗。

用微型台式真空泵或滴管等吸尽封闭液，立即加入稀释好的一抗，室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。如果一抗孵育一小时效果不佳，可以4℃缓慢摇动孵育过夜。或根据抗体的说明选择适当的孵育温度和时间。

回收一抗[V6] 。加入Western洗涤液(P0023C)，在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后，再加入洗涤液洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。

注：Western结果通常需要提供内参作为对照，通常可以选用Tubulin抗体(AT819)或Actin抗体(AA128)，进行内参检测。

6. 二抗孵育(Secondary antibody inucubation)

参考二抗的说明书，按照适当比例用Western二抗稀释液(P0023D)稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。 二抗需根据一抗进行选择，例如，一抗是小鼠来源的IgG，则二抗需选择抗小鼠IgG的二抗，如辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)(A0216)。碧云天有多种二抗提供。

用微型台式真空泵或滴管等吸尽洗涤液，立即加入稀释好的二抗，室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。

回收二抗。[V7] 加入Western洗涤液(P0023C)，在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟。吸尽洗涤液后，再加入洗涤液洗涤5-10分钟。共洗涤3次。如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。

7. 蛋白检测(Detection of proteins)

参考相关说明书，使用BeyoECL Plus(P0018)等ECL类试剂来检测蛋白。压片可以采用专用的压片暗盒(FFC58/FFC83)进行。

洗片时可以使用X光片自动洗片机。如果没有自动洗片机，可以用显影定影试剂盒(P0019/P0020)自行配制显影液和定影液进行手工洗片。X光片推荐选用柯达原装的生物实验专用柯达X-OMAT BT胶片(FF057/FF081)。

8. 膜的重复利用(Membrane recovery)

如果蛋白样品非常宝贵，可以使用Western一抗二抗去除液(P0025)处理蛋白膜，以重复利用蛋白膜。

1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响？

在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。

所以，pH对整个反应体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素。

2. 样品如何处理？

根据样品分离目的不同，主要有三种处理方法：还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。

1）还原SDS处理：在上样buffer中加入SDS和DTT（或Beta巯基乙醇）后，蛋白质构象被解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，在电泳中，只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。

2）带有烷基化作用的还原SDS处理：碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的保护SH基团，得到较窄的谱带；另碘乙酸胺可捕集过量的DTT，而防止银染时的纹理现象。100μl样品缓冲液中10μl 20%的碘乙酸胺，并在室温保温30min。

3）非还原SDS处理：生理体液、血清、尿素等样品，一般只用1%SDS沸水中煮3min，未加还原剂，因而蛋白折叠未被破坏，不可作为测定分子量来使用。

3. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用？

聚丙烯酰胺的作用：丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体，其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否，与促凝剂及环境密切相关；

制胶缓冲液：浓缩胶选择pH6.7，分离胶选择pH8.9，选择tris－HCL系统，

TEMED与AP：AP提供自由基，TEMED是催化剂，催化自由基引起的聚合反应进行；

十二烷基硫酸钠（SDS）：阳离子去污剂，作用有四：去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。

4. 提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径？

聚丙烯酰胺的充分聚合，可提高凝胶的分辨率。建议做法：待凝胶在室温凝固后，可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置，前者易导致凝固不充分，后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天，SDS可水解聚丙烯酰胺。

一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料，不同染料又各自不同的染色方法，具体可参照郭尧君编著的《蛋白质电泳技术手册》P82-103。

5.“ 微笑”（两边翘起中间凹下）形带原因？

主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中。

处理办法：待其充分凝固再作后续实验。

6. “皱眉”（两边向下中间鼓起）形带原因？

主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。

处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。

7. 为什么带出现拖尾现象？

主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。

处理办法：加样前离心；选择适当的样品缓冲液，加适量样品促溶剂；电泳缓冲液时间过长，重新配制；降低凝胶浓度。

8. 为什么带出现纹理现象？

主要是样品不溶性颗粒引起的。

处理办法：加样前离心；加适量样品促溶剂。

9. 什么是“鬼带”，如何处理？

“鬼带”就是在跑大分子构象复杂的蛋白质分子时，常会出现在泳道顶端（有时在浓缩胶中）的一些大分子未知条带或加样孔底部有沉淀，主要由于还原剂在加热的过程中被氧化而失去活性，致使原来被解离的蛋白质分子重新折叠结合和亚基重新缔合，聚合成大分子，其分子量要比目标条带大，有时不能进入分离胶。但它却于目标条带有相同的免疫学活性，在WB反应中可见其能与目标条带对应的抗体作用。

处理办法：在加热煮沸后，再添加适量的DTT或Beta巯基乙醇，以补充不足的还原剂；或可加适量EDTA来阻止还原剂的氧化。

10. 为什么溴酚蓝不能起到指示作用？

我们在实验中常会遇到溴酚蓝已跑出板底，但蛋白质却还未跑下来的现象。主要与缓冲液和分离胶的浓度有关。

处理办法：更换正确pH值的Buffer；降低分离胶的浓度。

11. 为什么电泳的条带很粗？

电泳中条带很粗是常见的事，主要是未浓缩好的原因。

处理办法：适当增加浓缩胶的长度；保证浓缩胶贮液的pH正确（6.7）；适当降低电压；

12. 为什么电泳电压很高而电流却很低呢？

这种现象一般初学者易出现。比如电压50v以上，可电流却在5mA以下。主要是由于电泳槽没有正确装配，电流未形成通路。包括：a.内外槽装反；b.外槽液过少；c.电泳槽底部的绝缘体未去掉（比如倒胶用的橡胶皮）。

处理办法：电泳槽正确装配即可。

13. 浓缩胶与分离胶断裂、板间有气泡对电泳有影响吗？

这主要出现在初学者中，一般对电泳不会有太大的影响。前者主要原因是拔梳子用力不均匀或过猛所致；后者是由于在解除制胶的夹子后，板未压紧而致空气进入引起的。

14. 凝胶时间不对，或慢或快，怎么回事？

通常胶在30MIN-1H内凝。如果凝的太慢，可能是TEMED，APS剂量不够或者失效。APS应该现配现用，TEMED不稳定，易被氧化成黄色。 如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量过多，此时胶太硬易裂，电泳时易烧胶。

15. 电泳时间比正常要长？

可能由于凝胶缓冲系统和电级缓冲系统地PH选择错误，即缓冲系统地PH和被分离物质的等电点差别太小，或缓冲系统

1、打开CAD，使用矩形工具在作图区绘制一个矩形。

2、使用直线工具，绘制两条矩形的对角线。

3、使用直线工具，以矩形的中心为起点绘制一条横线。

4、使用镜像工具，将横线以通过矩形中心的竖线为镜面做镜像。

5、选中矩形，使用分解工具将其分解。

6、选中矩形的上下两条边，使用删除工具将其删除。

7、确定后，我们就得到了阀门图形符号。

一、阀分类：球阀、蝶阀、截止阀、止回阀、闸阀、调节阀、节流阀、氧气阀、电站阀、排污阀、放料阀、真空阀、电磁阀、减压阀、调压阀，角式阀、角阀、三通阀、四通阀、多通阀、鸭嘴阀、平板闸阀、油田阀、切断阀、排渣阀、刀型闸阀、卸灰阀、衬氟衬胶阀。

二、泵分类：水泵、油泵、化工泵、隔膜泵、排污泵、螺杆泵、液下泵、污水泵、潜水泵、往复泵、空调泵、给水泵、多级泵、管道泵、离心泵、三螺杆泵、双螺杆泵、导热油泵、扫仓泵、耐腐蚀泵、高温高压泵、真空泵、磁力泵、微型电泵、消防泵、恒压切线泵、清水泵、浓浆泵、泥浆泵。

泵分类：水泵，油泵，化工泵，隔膜泵，排污泵，螺杆泵，液下泵，污水泵，潜水泵，往复泵，空调泵，给水泵，多级泵，管道泵，离心泵，三螺杆泵，双螺杆泵，导热油泵，扫仓泵，耐腐蚀泵，高温高压泵，真空泵，磁力泵，微型电泵，矿用泵，渣浆泵，纸浆泵，无堵塞泵，自吸泵，增压泵，消防泵，恒压切线泵，清水泵，浓浆泵，泥浆泵，等等。

阀分类：球阀，蝶阀，截止阀，止回阀，闸阀，调节阀，节流阀，氧气阀，电站阀，排污阀，放料阀，真空阀，电磁阀，减压阀，调压阀，角式阀，角阀，三通阀，四通阀，多通阀，鸭嘴阀，平板闸阀，油田阀，切断阀，排渣阀，刀型闸阀，卸灰阀，衬氟衬胶阀，等等。